血清学检测是家禽疾病诊断和监测的基本方法，也是基层兽医工作者诊断和监测疾病最关键的方法。

     由于国家近些年来加大了对全国区县级动物疫病预防控制机构的投入，几乎所有的区县级兽医实验室都可以顺利开展血清学检测工作。酶联免疫吸附试验（ELISA）作为一种优越的血清学检测方法已被广大基层实验室所使用。使用该方法可在短时间内处理成百上千份血清样品，完成针对不同禽病抗原所产生抗体的检测和评估。尽管其他的检测方法可能也具有敏感、特异的特点，而且从短期内来看可能花费较少，但是这些方法通常需要耗时的实验程序和大量的劳动力，因此，从长远看来反而导致更高的费用。而且，随着生物技术的不断发展，目前用于动物疫病临床诊断用的ELISA试剂盒越来越多，操作的步骤也越来越趋向于简单和流水化，要求的实验室条件也越来越简单。

     受疫病、饲料原料、劳动力升值等多种因素的影响，全国的家禽行业不断加快整合，规模化的运营向更为广泛的地理区域延伸。由于家禽生产系统的快速发展，创建一个允许家禽疫病防控专业人员快速客观地分析数据，以确定家禽疾病发生原因或变化趋势的方法就显得至关重要。一个养殖场的内部数据库是客观分析血清学数据的关键。在任何情况下，一个家禽疫病防控专业人员不能够仅仅依赖预先设定的参考抗体滴度，哪怕是国家年度动物疫病监测计划提及的标准也不行，因为这些产生于特定区域、生产系统、免疫程序和野毒感染状况下的抗体数据是不同的，而且也是动态变化的。例如，屠宰禽类时检测到高于正常值的新城疫抗体可能表明以下潜在疾病威胁趋势：

     （1）被检禽类养殖场面临着比平时更高的新城疫感染压力，有可能是强毒株。

     （2）目前使用的免疫程序需要进行调整，甚至应该考虑重新筛选所使用的疫苗。

     （3）可能存在其他疾病病原潜伏感染、协同感染或与NDV的混合感染的情况。

     养殖场内部血清学数据库是家禽管理程序常规使用的最重要参考，而将其与养殖场所在区域的数据进行对比也是一个比较通用的做法。通过将养殖场的疫苗抗体滴度与本地区其他养殖场的数据进行比较，可帮助相关人员改善实际抗体滴度和反应均匀度。将自己养殖场的数据与来自国内或世界其他地域的数据进行比较，是一种无效且有风险的选择，是不值得提倡的，也是机械的。

     即使在没有传染性疾病感染压力存在的情况下，抗体滴度通常在全年中也不会是一成不变的。这种变化性在四季分明的北方地区尤为明显，即使在四季变化不是很明显的南方地区也可见到季节间ELISA抗体滴度的变化。秋冬季和早春月份可能会引起禽群呼吸道病例增多，因此,每年的这个时候抗体滴度都可能偏高。快速确定是否变化的客观方法是将历史内部数据和所产生的实时进行比较。理解数据的相关性和趋向性对分析监测结果的精准至关重要。将实时数据与同期产生的内部数据进行比较是很重要的，这就是为什么产生自其他地域或养殖集团预先设定的数据不能作为参考依据的原因。

     常规的血清学检测方法有很多，各个养殖场应用的试验方法也因场而异。ELISA检测方法在世界范围内被广泛应用，并且应用于非常重要的检测。举例来说，ELISA是一种经常用来评估传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)或禽呼肠孤病毒(REO)血清转化趋势的方法。任何养殖生产中产生的感染压力或者免疫程序的重要变化均可由ELISA所察觉。但是，ELISA检测方法不能对引起感染的特定毒株或者变异株的免疫反应进行区分，如ELISA不能确定有IBV问题的鸡群具体是被麻萨诸塞株、阿肯萨斯株、康狄涅格株、DE072株等哪一种血清型所感染。

     对于临床诊断来说，双份血清检测的方法是非常重要的。双份血清检测包括对疾病急性期和恢复期所收集血清的检测。许多家禽防控专业人员不接受这种检测方法，因为他们认为，如果等待恢复期采集第二次样本进行对照检测，对于感染鸡群来说为时已晚，诊断时间的延迟很可能造成鸡群大批死亡。但是，对于目前养殖规模化越来越大的生产体系，寻找养殖场内部各种疾病血清学的发展变化趋势，建立整个养殖场而不是针对个别养殖周期鸡群的综合防控措施至关重要。常规血清学监测可使快速预测疾病趋势成为可能。急性期和恢复期检测要求在第一临床症状确认后和2～3周后及时检测抗体，这样能够鉴定针对某一特定抗原的血清学消长规律。在肉鸡生产中，不可能将鸡只在出栏前保留如此长的时间，因此，建议在第二次采样之前，将少数鸡只隔离数天。一个简单的隔离采样步骤将会为饱受疾病困扰的养殖公司避免更大的损失。

     任何政府要求的方法必须用于规定的疾病监测。许多大型家禽公司都有内部针对性的检测计划，以保证养殖场内鸡群的健康状态，并且也专门制定了一些重要疾病的检测方案。此外，还应满足出口到其他国家的检测要求。

     任何养殖场都不能脱离当地的养殖现状而独立存在，不论养殖规模的大小，不考虑当地流行病原毒株的类型、变异株或血清型，单纯基于抗体水平，从而判断某一特定的抗体范围是否具有保护力是片面而且错误的方法。通常来说，ELISA检测是一个定量的检测而不是一个定性的方法，因此，它不能特异性地判定抗体所针对的毒株和变异株血清型。例如,一个滴度为3000的抗体对IBDVLukert毒株而言是具有保护力的，而对IBDV的DeIE株来说则没有保护力。对于确定疾病感染的地区特点、疫苗免疫表现、疫苗施打人员表现等因素都依赖于一个养殖公司的内部程序，而并不是在其他养殖地区所发现的感染状况。

     不是所有家禽生产地区内的各养殖场之间都有良好的沟通。当判断血清学数据时应考虑所有可用的和可信的信息，因为这可能有助于评估特定的疾病发生及流行状况。例如，如果一个养殖场从来没有发生过新城疫，也不知道所在的养殖区域是否曾有养殖场感染过该病，那么这个养殖场将极易忽略新城疫病毒引起的血清变化趋势，其结果是可能造成新城疫感染。

     几乎所有的家禽疫病防控专业人员都把高抗体滴度认为是免疫后良好血清转化的标志或临床上接触过特定抗原的提示，这代表定量评估。但是查看抗体反应的一致性和整齐度也很重要，这种一致性和整齐性通常以抗体均匀度的形式出现在检测报告中。抗体均匀度是对一组血清样品抗体滴度间差异程度的衡量，抗体均匀度越高，表示抗体反应越一致。因此，从数量上讲，抗体滴度越高，疫苗反应越好。抗体均匀度整齐，表示疫苗免疫反应的整齐性越好。综上所述，在实际检测中最好可以得到一个抗体滴度高，且均匀度整齐的抗体反应样本。由于ELISA滴度或一个ELISA滴度范围只是简单地用数量表示抗体反应，这类滴度应做如下使用：①作为野毒感染时家禽企业血清转化可能趋势的参考。②在诊断时，对急性期和恢复期成对样品血清转化的快速鉴定。③评价疫苗和疫苗应用程序。④确定没有诸如AIV、MG或MS等病原的特异性抗体存在。

（黑龙江省哈尔滨市动卫生防疫站，梁宏志）