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目前猪繁殖与呼吸道综合征、 猪伪狂犬病、 猪瘟、 猪圆环病毒２型和猪支原体肺炎等多种疾病， 在猪群中普遍存在， 且很难从猪场清除或净化。这些病原不仅能引起特征性的疾病， 还可能引起免疫系统损害而导致机体暂时性或永久性免疫功能低下。除特定病原引起的免疫抑制外， 应激、 饲料污染、 环境污染等均可能损害动物机体的免疫功能， 致使机体免疫功能下降甚至缺失， 导致机体对疫苗不能产生足够的免疫应答， 疫苗免疫效果下降， 或引起多种疾病混合感染， 对养猪生产危害很大。为应对免疫功能下降后的发病风险， 抗生素、化学合成药物在仔猪生长过程中被广泛使用， 耐药性的产生导致抗生素对各种细菌性疾病的治疗效果下降， 同时畜产品中的药物残留给人类健康带来严重威胁。中草药含有多种生物活性成分， 对机体的免疫功能具有增强或调节作用， 可提高机体的抗病力和抵抗力。本试验旨在研究复方中草药作为饲料添加剂， 在免疫前阶段性的添加对仔猪免疫功能和生产性能的影响， 为复方中草药在仔猪防病、抗病中的应用提供理论依据。
１ 材料与方法
１． １ 试剂
猪淋巴细胞分离液（天津市灏洋生物制品科技有限责任公司， 批号ＬＴＳ１１１０）；Ｈａｎｋｓ液（吉诺生物医药技术有限公司， 批号１３０５１４０９） ；亚硝酸钠；副品红； ２．５％戊二醛；ｐＨ ７．４、７．６磷酸缓冲液； 甲基绿； 猪瘟病毒抗体检测试剂盒（美国爱德士生物科技公司， 批号Ｂ０２１） ；猪伪狂犬病毒ｇＩ抗体检测试剂盒（美国爱德士生物科技公司， 批号ＢＪ０７６） ；猪伪狂犬病毒ｇＢ抗体检测试剂盒（ 美国爱德士生物科技公司，批号ＥＪ４９５） ；电子秤。
１． ２ 中药制剂
复方中草药由黄芪、 白术、 党参、 茯苓、 当归、 淫羊藿等１ ９味中药组成（ 购自上海养和堂药业公司） ，按处方配合后粉碎、 超微处理， 密封保存。
１． ３ 试验动物
选用２１日龄断奶仔猪（ 杜长大三元杂交）４８头， 随机分２组， 试验组在前２次猪瘟疫苗免疫前１周， 即２３～２９日龄、 ５３～５９日龄饲料中按１％添加复方中草药制剂， 对照组不添加药物。试验组和对照组饲养管理条件相同， 在３０、６０、９０日龄接种猪瘟活疫苗（ 脾淋源， 中牧实业股份有限公司成都药械厂） ，７０日龄接种猪伪狂犬活疫苗（Ｂａｒｔｈａ株， 梅里亚有限公司法国生产厂） 。
１． ４ 血样采集
在５０、８５、１３０日龄对试验组和对照组进行颈静脉血样采集， 将２ｍ Ｌ血样注入肝素钠抗凝管用于Ｔ淋巴细 胞 计 数， ３ｍＬ血 样 析 出 血 清 用 于 抗 体检测。
１． ５ 实验室检测
用酸性ɑ－醋酸萘酯染色法〔１～３〕， 检查Ｔ淋巴细胞占淋巴细胞总数的百分率。用酶联免疫试剂盒检测猪瘟抗体、 猪伪狂犬野毒抗体、 猪伪狂犬抗体阳性率。
１． ６ 生产性能测定
在２３、３８、６８、９８、１３０日龄进行称重，２３～１３０日龄每日记录各组的饲料喂量。计算各阶段增重情况和料重比。
２ 结果与分析
２． １ Ｔ淋巴细胞百分率
试验组和对照组５０、８５、１３０日龄猪血液Ｔ淋巴细胞检查结果见表１。试验组８５日龄外周血液Ｔ淋巴细胞百分率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），５０和１３０日龄时差异不显著。
２． ２ 血清抗体检测结果
对５０、８５、１３０日龄猪血清进行猪瘟抗体、 猪伪狂犬病野毒抗体、 猪伪狂犬病抗体检测， 结果见表２。其中猪伪狂犬抗体阳性率为去除野毒感染阳性后的结果。比较试验组和对照组， 相同日龄的猪瘟抗体阳性率、 猪伪狂犬抗体阳性率、 猪伪狂犬野毒抗体阳性率差异性均不显著。
２． ３ 仔猪的生产性能
试验组和对照组各２４头，从２３日龄到１３０日龄各组猪体重记录见表３，试验组增重１５８５．３ｋｇ，对照组增重１ ５ ５ ７． ６ｋ ｇ。试验期间料重比试验组为
２．１７、对照组为２．１９，试验组增重高于对照组， 料重比低于对照组，组间差异不显著。对仔猪初重和各阶段增重情况分析见表４， 初重组间差异不显著，９８～１３０日龄阶段增重试验组极显著高于对照组（ Ｐ＜０．０１） ， 其余阶段试验组与对照组差异不显著。
３ 讨论
３．１ 复方中草药对仔猪细胞免疫水平的影响
Ｔ淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞， 经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居， 并可经淋巴管、 外周血和组织液等进行再循环， 发挥细胞免疫及免疫调节等功能。许多中草药及其复方具有促进免疫器官发育的作用， 复方中草药含有多糖等多种生物活性成分， 研究表明黄芪多糖可增加动物胸腺、 脾脏、 法氏囊等免疫器官的重量〔 ４〕， 对病原或污染物所造成的动物免疫抑制起到拮抗作用； 对Ｔ淋巴细胞介导的细胞免疫不仅有增强作用， 还有较强的调节作用， 能显著提高机体的细胞免疫作用。还可通过增强淋巴细胞与内皮细胞的黏附而促进淋巴细胞的再循环， 增加淋巴细胞与抗原的接触机会， 从而扩大免疫反应， 增强机体免疫功能。本试验中Ｔ淋巴细胞检测结果中５０日龄试验组和对照组差异不显著， 原因可能是２３～２９日龄仔猪免疫功能不完善、 采食量少等因素造成； ８５日龄试验组显著高于对照组， 证明复方中草药能提高仔猪的细胞免疫作用。
３．２ 复方中草药对仔猪体液免疫水平的影响
复方中草药能够增强机体免疫功能； 对人工感染ＩＢＶ雏鸡免疫指标测定显示， 复方中药能增强鸡的体液免疫功能， 更好的发挥抗病毒作用〔 ５〕。本试验对５０、８５、１３０日龄仔猪血清抗体检测结果进行比较， 猪瘟抗体阳性率、 去除野毒抗体阳性后的猪伪狂犬抗体阳性率差异不显著， 这与复方中草药的生物活性成分之一多糖的研究结果， 即多糖作为药用主要是提高细胞免疫作用〔 ４〕相一致。
３．３ 复方中草药对仔猪生产性能的影响
中草药及复方能明显促进机体特异性免疫和非特异性免疫功能， 提高机体的抗病力和抵抗力，促进生长发育， 试验结果显示，９８～１３０日龄试验组仔猪体重增长高于对照组， 差异极显著， 表明中草药复方制剂能提高仔猪的生产性能。综上所述， 复方中草药制剂在断奶初期的添加， 由于仔猪采食量少， 免疫功能不完善， 对细胞免疫和生产性能的改善不明显；在５３～５９日龄按饲料的１％比例添加， 试验组总增重和料重比优于对照组， 试验组８ ５日龄Ｔ淋巴细胞百分率显著高于对照组，９８～１３０日龄试验组仔猪体重增长极显著高于对照组。试验结果表明在饲料中添加中药复方制剂， 能提高仔猪的细胞免疫作用和生产性能。
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