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徐会波 河北远征药业有限公司
为了解京津冀部分地区猪圆环病毒 2 型 （PCV2 ）的流行情况，笔者于 2010 年 610 月采用 ELISA（酶联免疫吸附试验 ）诊断试剂盒对宁河、大兴、 迁安、 遵化、 昌黎、 抚宁、 廊坊的 22 个猪场 66 份血清进行 PCV2 调查， 现报告如下。
1 材料与方法
1.1待检血样
66 份血清样品采自宁河、 大兴、 迁安、 遵化、 昌黎、 抚宁、 廊坊的规模猪场和散养户， 其中种猪 24 份、肥育猪 18 份、 仔猪 24 份。无菌从耳静脉或前腔静脉采血， 分离血清后置于灭菌小瓶中， -20 ℃保存备用。
1.2诊断试剂和仪器
猪圆环病毒 2 型 ELISA 诊断试剂盒 （购自华中农业大学动物医学院动物病毒研究室） 、 DNM-9602型酶标分析仪、 微量移液器等。
1.3 ELISA 检测方法
1.3.1取预包被的微孔条板，用样品稀释液将待检样品按 1∶40 稀释后加入板孔中，每孔加 100 μL； 再用样品稀释液 1∶4 稀释阴、 阳性对照血清， 阴、 阳性对照血清各设 2 孔， 每孔 100 μL； 另设一空白对照孔加 100 μL 稀释液， 轻轻振匀孔中样品， 将板置37 ℃温育 30 min。
1.3.2甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板 5 次， 200μL/孔， 每次在干净吸水纸上拍干， 然后每孔加酶标二抗 （ 抗猪IgG-HRP结合物 ） 100μL， 置37℃温育30min。
1.3.3甩掉板孔中溶液， 用洗涤液洗板 5 次， 方法同上。每孔加入底物 A 液、 B 液各 1 滴 （50 μL ） ， 混匀，室温避光显色 10 min 后； 每孔加终止液 1 滴 （50 μL ） ，并在 10 min 内测定结果。
1.3.4按厂家说明书介绍的方法进行检测。以空白孔调零， 在酶标仪上测各孔 OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均 OD630值大于或等于 1.0，阴性对照孔平均 OD630值必须小于 0.2。 样品 OD630值大于0.42， 判定为阳性； 样品 OD630值在 0.38～0.42 之间， 判定为可疑； 样品 OD630值小于 0.38， 判定为阴性。
2 结果与分析
2.1不同类别猪圆环病毒 2 型血清学检测结果由表 1 可知， 母猪血清 24 份， 阳性率为 66.7%；肥育猪血清 18 份，阳性率为 27.8%；仔猪血清 24份， 阳性率为 29.2%。 说明在京津冀部分地区猪场中PCV2 的感染率还是很高的。
2.2不同地区猪圆环病毒 2 型血清学检测结果由于部分县 （市、 区） 猪场感染 PCV2 存在着一定差异， 因此， PCV2 阳性率在不同地区的分布也有所区别， 详见表 2。
2.3规模猪场与散养户猪圆环病毒 2 型血清学检测结果比较通过对规模猪场与散养户 PCV2 阳性率比较可以看出， 散养户 PCV2 阳性率相对低， 规模猪场阳性率较高， 详见表 3。
3小结
本试验结果表明， PCV2 阳性率母猪明显高于仔猪、 肥育猪， 仔猪高于肥育猪， 但种猪是否带毒、 持续感染以及垂直传播等深层次问题还有待进一步研究。另外， 本文采集血样数量少， 需要扩大采集范围和数量才更有说服力。但本文的调查数据足以说明PCV2 感染在京津冀部分地区猪场已普遍存在的。
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