卵黄抗体的特点
冯瑜菲 东北农业大学
IgY 在多种环境下均具有良好的稳定性,如耐热、耐酸、耐碱和一定的抗酶降解能力。IgY 制剂在 4℃贮存 5 年或在室温下贮存 6 个月,其抗体活性仍无明显变化。在通常情况下,IgY 基本能够耐受巴氏消毒,37℃下其活性基本无明显变化。当温度达到 65℃时,IgY 的活性可保持 24 h 以上,70℃加热 90min 后活性下降,90℃处理 15min,大部分 IgY 活性丧失。
若是在 IgY 溶液中添加糖类物质(如蔗糖、乳糖或海藻糖)可以提高其热稳定性,使 IgY 在75~80℃依然能够保持较高的活性。lgY 在 pH4.0~11.0的范围内具有较好的稳定性。当 pH 值低于 3.5 或高于 12 时,IgY 的活性迅速降低。IgY 对反复冻融具有耐受性,实验表明经 5 次反复冻融,其抗原结合活性几乎不受影响。此外,IgY 能够抵抗幼龄动物的胃酸屏障及肠道中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的消化。IgY 在 37℃、pH2.8、低浓度胃蛋白酶存在下,处理 1.5 小时后用 ELISA 法检测,其活性仅损失 1/4。Hatta 等也做了相关试验,考察了 3 种主要的胃肠道蛋白酶对抗轮状病毒特异性 IgY 稳定性的影响,结果表明将胃蛋白酶和 IgY 在 pH2.0 温育 lh 后,IgY 活性几乎完全丧失,而在 pH4.0 温育 lh 后,IgY 保持 91%的活性,甚至温育 10h 后仍可维持 63%的活性。随着 pH 值的降低,IgY 对胃蛋白酶的敏感性增强。IgY 对胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶的水解稳定性较好。将 IgY 分别与胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶温育 8h 后,其活性分别保持在 39%和 41%。
IgY 具有独特的生物学特性。由于禽类和哺乳动物生物系统发育的差距,两者的亲缘关系较疏远,哺乳动物的蛋白质抗原在禽体内更易产生特异性较高的抗体,所以 IgY 的生化特性优于哺乳动物抗体。当 IgY 与相应抗原结合形成免疫复合物时,不能够激活哺乳动物的补体系统,不与哺乳动物细胞的 Fc 受体、人抗鼠抗体、葡萄球菌蛋白A(SPA)和葡萄球菌蛋白 G(SPG)结合,也不能与哺乳动物的类风湿因子(RF)发生反应。因此,使用 IgY 可以避免由于补体系统激活所导致的假阴性结果的产生以及抗原抗体复合物激活 Fc 受体所引起的蛋白表面发生的改变,进而对试验结果造成的干扰的发生。
卵黄抗体制备简单且来源广泛。鸡受到抗原刺激后 7~10d,蛋黄中就有相应的抗体产生,约 20d 能达到高峰,当再次受抗原刺激后,又可产生一个新的高峰。经实验表明,可持续获得高特异性的 IgY 长达 28 周,且每毫升蛋黄液中含有 8~20mg 的抗体。此产量比从哺乳动物体内获得抗血清抗体的产量高很多。此外,动物的采血不仅对动物本身产生极大的应激,而且费时、费工,不易于规模化生产,故卵黄抗体的制备为规模化生产提供广阔的前景。
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