反向遗传系统的前景与展望
顾江萍 上海交通大学
对需辅助病毒的DIRNA基因组的分析曾提供了TGEV复制及转录调控的一些信息,但在感染性cDNA克隆或RNA构建后越来越显示其局限性,主要是因为作为大基因组的RNA病毒,其复制及转录调控相当复杂,必需放在全基因组的氛围中才来窥出其全貌。全长感染性cDNA克隆或RNA的构建成功已在冠状病毒的分子生物学特性研究及在用于新型疫苗和基因治疗的载体研究中显示其领头军作用,并还将产生长远的影响。尽管构建全长感染性cDNA克隆或RNA的方法有不同程度的改进,但对大多数实验室来说仍然存在相当的技术难度,且在比较成熟的实验室,这也是一件工作量很大、成功率偏低的事情,仍需进一步改进构建方法,突破大片段克隆连接效率低、RNA稳定性差、大基因组转染效率低等瓶颈。
TGEV作为一种冠状病毒,用作载体有种种优点,未来用TGEV作载体表达其它猪传染病的保护性抗原的应用研究将会蓬勃开展。近年来对TGEV分子水平上的研究,如病毒基因组结构、核酸序列、结构蛋白和基因工程等方面已取得较大进展。
在未来,畜牧研究人员对TGEV的基因复制、表达调控的研究有助于了解包括曾经造成全世界恐慌的SRAS病毒在内的一系列冠状病毒的病毒生物学特性、遗传和变异规律,对各病毒疫苗的开发与抗病毒药物的研制起到了巨大的作用。
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