猪传染性肠胃炎病毒的传统诊断方法
顾江萍 上海交通大学
在小肠上皮细胞、肠内容物或粪便中检测猪传染性肠胃炎病毒（TGEV）是兽医诊断仔猪该病的简单和最常用的方法。免疫组化法包括免疫荧光法(IF)和免疫过氧化物酶技术，其中免疫组化法较为常用。若IF或免疫过氧化物酶试验呈阳性，并伴有腹泻症状，则几乎肯定为TGEV。国外有学者在小肠上皮细胞中检测TGEV抗原。采集病死猪小肠，或者在腹泻早期将猪捕杀，取空肠和回肠粘膜涂片或将空肠和回肠制备冷冻切片，进行直接或间接免疫荧光检测的方法己经建立，并得到广泛应用。但该方法必须在死后或扑杀后才能进行。有学者建立了通过采取猪只的扁桃体组织，制成冷冻切片，进行荧光检测的活体诊断方法，己被广泛用于疫病普查和口岸检疫。另外，应用抗TGEVN蛋白的单克隆抗体免疫过氧化物酶技术检测小肠组织中病原的方法己建立，且TGEV的单克隆抗体已被用IF或免疫过氧化物酶试验中。用上述两种试验方法在呼吸道组织和鼻腔上皮细胞中均检测出TGEV。用抗TGEV单克隆或多克隆抗体双层夹心酶联免疫吸附法（ELISA）已被广泛应用于检测在细胞培养、粪便和肠内容物中的TGEV，是一种快速且适用于从活猪中取得大量样品的诊断方法。
用电镜检测TGEV也是常用的诊断方法之一。通过电镜负染色法证明，在感染猪肠内容物和粪便中有TGEV。发病期间病毒存在于病猪的许多器官中，试验证实除脾脏外，其他器官均可检测到病毒,但是以空肠、十二指肠和肠系膜淋巴结中含毒量最高。通过电镜观察，病毒多分布在胞浆的空泡里和微绒毛间隙。在微绒毛间的病毒往往呈串球状排列。研究证明，免疫电镜(IEM)比常规EM技术更好，前者对检测临床样品或细胞培养物中的TGEV更敏感，并可提供病毒血清学鉴定。此外，用IEM更易区分TGEV和常见的膜类碎片，而且同时可检测其它肠道病毒的存在。
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