猪渗出性皮炎的诊断方法
张乐宜 内蒙古农业大学
目前诊断兽医常用的检测猪渗出性皮炎的方法包括镜检、生化鉴定、PCR 诊断和特异性抗体的血清学检测以及动物致病性试验等实验室诊断方法。通常根据临床症状、病理变化以及本病只感染哺乳仔猪,母猪不发病这些特征来确诊。病猪不发热,全身皮肤粘胶样渗出,恶臭,形成黑色痂皮,肥厚干裂等,其外观在同一窝小猪中严重程度不同,这些都是该病的特征。
1. 细菌学方法
通常是采取化脓的皮肤、组织或脓性渗出物等做涂片,革兰氏染色后,用显微镜观察,并依据细菌的形态、排列和染色特性等进行诊断。
2. 分子生物学方法
Andresen 和 Ahrens 等人设计了 4 对特异性引物利用多重 PCR 方法检测猪葡萄球菌编码脱落毒素蛋白 ExhA、ExhB、ExhC 和 ExhD 基因,来确定在丹麦境内猪群中渗出性皮炎的存在情况。通过对这些脱落毒素基因的检测来评价其建立的检测方法的特异性,结果显示在该类毒素的基因型和表现型上有着完全一致的对应性。但该检测方法也存在一定的局限性,那就是对样本 DNA 的纯度要求很高,必须选用高标准的 DNA 提取试剂盒进行 DNA 的提取。
T. Kanbar 等人在前人研究的基础上,设计了四对特异性引物,用多重 PCR 检测方法,对在德国和俄罗斯分离到的猪葡萄球菌进行流行性分析,结果表明俄罗斯分离到的猪葡萄球菌是产 ExhD 型,在德国分离到的菌株包括 ExhC 和 ExhD 型。但是在对德国分离到的所有菌株的研究对比中,发现在德国分离到的 ExhD 型菌可能与俄国ExhD 型有密切关系。
在日本也用多重 PCR 检测方法对日本范围内猪场猪葡萄球菌外毒素蛋白分子流行病学检测,结果发现在日本流行的菌株为主要含有 ExhA 毒素基因的毒株,而且该毒力型猪葡萄球菌菌株在日本有大面积流行的趋势。
3. 血清学诊断
Andresen等人用猪葡萄球菌产生的外毒素蛋白ExhA、ExhB、ExhC的菌株通过能够产生脱落毒素的菌株进行培养,培养结束后利用这些毒素蛋白的特异性,对其进行纯化,以纯化的毒素蛋白进行包板而建立的间接ELISA方法。结果显示,通过该间接ELISA方法对来自69个猪群的猪皮样本进行检测,总共鉴定出655株S.hyicus,产生毒素的S.hyicus 的检出率为74%。
另外,由于引起该病的病因很复杂,极易与猪圆环病毒病、及其它皮肤病变混淆,如脂痘,疥癣,癣,玫瑰糖疹,缺锌,增生性皮肤病等,应做好鉴别诊断。
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