猪输血传播病毒流行病概述
刘建波 中国农业科学院
人源的输血传播病毒(Torque teno virus,TTV),最早由Nishizawa于1997年从一例输血后发生急性感染的非甲-戊型肝炎病人血清中发现,与肝炎有关,被认为是人类圆环病毒。1998年证实国内人群中也存在TTV感染。对肝炎患者、艾滋病病毒携带者等人群TTV感染的流行病学调查发现,TTV阳性率达10%以上。在灵长类、家养动物以及老鼠的体内也相继发现TTV的存在,并以初乳途径垂直传播。Verschoor等首次在血清中检测到猪输血传播病毒(Porcine torque teno virus,PTTV)。随后,畜牧研究人员对西班牙猪群进行的流行病学调查显示猪源的PTTV阳性率很高。国内一些地区PTTV1和PTTV2的阳性率达37%和21%以上,表明PTTV呈世界性流行。
1. 分类
猪输血传播病毒(Porcine transfusion transmitted virus, PTTV)或(Porcine torque teno virus,PTTV)以及其他动物相关的TTV,最近被国际病毒分类委员会归类于一个新建立的科:指环病毒科(Anelloviridae),下有九个病毒属,包括 α TTV(Alphatorquevirus)、βTTV(Betatorquevirus)、γ TTV(Gammatorquevirus)、δ TTV(Deltatorquevirus)、ε TTV(Epsilontorquevirus)、η TTV(Etatorquevirus)、ι TTV(Iotatorquevirus)、θ TTV(Thetatorquevirus)、ζ TTV(Zetatorquevirus),猪输血传播病毒根据其基因型不同分为两种类型,即PTTV1和PTTV2,均属于属于 ι TTV。
2. 形态结构与理化性质
TTV是一种无囊膜的单股负链环状DNA病毒,在氯化铯中的浮力密度为1.31~1.33g/ml,病毒粒子的直径为30~32nm,在蔗糖中的浮力密度为1.26g/ml,对DNaseⅠ和绿豆核酸酶敏感,但能抵抗Rnase A消化。
3. 培养特性
迄今为止,还没有合适的细胞系适于TTV病毒的培养,有很多学者已致力于病毒增殖的研究。Fabrizio等用荧光定量PCR检测了7位病人的血清中含有TTV,证明了TTV与外周血细胞之间的关系,其中6位病人的外周血单核细胞(PBMCs)和4位病人的多核淋巴细胞显示TTV阳性,但病毒的滴度很低;将PBMCs分成单核细胞、B细胞、T4、T8淋巴细胞亚群之后检测,没有发现病毒,证明TTV优先与某种或几种细胞有关。将TTV阴性的PBMCs细胞与含病毒的血浆在4℃孵育的情况下,这些细胞能够吸附可测量的病毒数量。用植物血凝素刺激的TTV阴性的PBMCs在体外与病毒阳性血清和粪便抽提物混合后培养后,这些细胞能够向悬浮液体中释放出相当水平的有感染性的TTV。用TTV刺激PBMCs获得同样结果。这些结果显示,新鲜收集的PBMCs细胞不能够产生病毒,但用TTV病毒刺激后能够刺激PBMCs产生病毒的复制。尽管从感染的病人中分出的PBMCs中能够检测到TTV DNA,仍然不知道在PBMCs中的TTV是否是产生于细胞内复制是否来自于吸附、细胞内吞。最近,TTV DNA病毒的复制形式在骨髓细胞中被发现,仍然没有关于TTV在体外培养系统中复制的报告。PBMCs细胞能够从感染的血浆中吸附相当数量的TTV,附着结合的病毒很难被清洗下来。用PHA刺激过的TTV阴性的PBMCs再与TTV阳性血浆或粪便提取物孵育后,彻底清洗,然后培养5周,选择时间点检测TTV DNA的含量,在孵育后的第1周,悬浮上清中没有或很少有病毒存在,紧接着病毒滴度出现2-3个对数的高度。在孵育后21-28天内,所有的培养物恢复阴性状态。在不同的实验组中,于培养的第2周中出现峰值,每毫升液体中病毒滴度在4.2×104~6.2×105之间变化。这些峰值太高,不能仅仅用吸附的病毒来解释。
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