血清学方法诊断猪附红细胞体病
刘海涛 山东农业大学
对于附红细胞体的血清学诊断方法国内兽医的研究较少，国外研究相对较多。目前报道的主要方法有：
1 间接血凝抑制实验（IHA）：
Smith 等采取抗凝血并分离附红细胞体作为检测用抗原，从接种附红细胞体的康复猪体内获得抗体作为检测用抗体，收集 IgM 和 IgG，用双向琼扩检测其抗原抗体特异性后进行 IHA 试验，结果接种猪血清效价达到 1: 40 以上，感染有微粒孢子虫的猪检测得到阴性结果。此法在一定程度上能够检测出潜在感染病猪。
2 补体结合实验（CFT）：
1958 年 Splitter 首先报道用补体结合试验诊断猪附红细胞体病，病猪在临床发病后第一周，患畜血清呈阳性反应，但 2-3 周后逐渐转为阴性。该方法对于急性病例效果较好，但慢性病例则为阴性。
3 酶联免疫吸附实验（ELISA）：
Lang 等建立了将附红体与红细胞分开，制备抗原的方法，用去掉红细胞的E.ovis抗原对羊进行ELISA与间接血凝试验(IHA)的对比，认为ELISA比 IHA 敏感性高 8 倍，Hsu 等人用 ELISA 及 CFT 检查 E. suis 感染猪，ELISA 敏感性明显高于 CFT, 而且证明 E. suis 抗原与猪的其他病感染的血清无交叉反应。因此ELISA 是一种敏感、快速、特异的诊断方法。但此法不适用于小猪及公猪的诊断，也不适用于急性病例诊断。
Frank 等无菌采取患病抗凝猪血，分离抗原，并进行 10 倍递进稀释；采用 1-6 周龄 SPF 猪血清，并设有胸膜肺炎、巴贝斯虫、放线杆菌感染猪血清做对照，用辣根过氧化物酶标记的羊抗猪 IgG 做二抗并；采用邻苯二胺（OPD）显色进行 ELISA 实验。同时进行 IHA 实验。
两则结果进行比较，表明 ELISA 阳性率为 87.7%，而 IHA 检测阳性率为 80.7%。且与胸膜肺炎、巴贝斯虫放线杆菌等无交叉反应，可用于快速诊断。张守发等人所建立的Dot- ELISA 不与常见猪病阳性血清发生交叉反应，且稳定性高。韩惠瑛等人用物理方法纯化猪附红细胞体抗原，建立的以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌 A 蛋白为二抗的酶联免疫吸附试验(PPA-ELISA)检测方法，也具有很高的敏感性和特异性，重复性良好。
4 免疫荧光试验(IFA)：
Ohder 首先用 IFA 诊断该病，Nicholls 等用 IFA 检查羊的 E.ovis 感染表明该方法敏感、特异。但在 Lang 的报告中认为 IFA 的敏感性低于 ELISA。1970 年华松等用 IFA来诊断牛温氏附红细胞体病，抗体在第 4 天出现，随着感染率上升，抗体水平在第 28天达到高峰。
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