猪附红细胞体病的病原学特点
刘海涛 山东农业大学
1种类
迄今为止，人们已经发现在猪、牛、绵羊、山羊、马、兔、犬、猫、猴、骆驼、羊驼、狐类、驴、鹿、角马、骆马等哺乳动物和鸟类及人体中感染附红细胞体的病例。根据畜牧研究人员先后报道的已发现并命名的附红细胞体主要有：猪附红细胞体 (猪)、小附红细胞体 (猪)、球状附红细胞体 (鼠)、异形附红细胞体 (鼠)、温氏附红细胞体 (牛)、绵羊附红细胞体、山羊附红细胞体、兔附红细胞体、犬附红细胞体、猫附红细胞体、微小附红细胞体、狐附红细胞体、鸡附红细胞体、和人附红细胞体等。一些附红细胞体并不具有严格的宿主特异性，例如绵羊附红细胞体也可感染山羊，现已证实，猪的小附红细胞体是猪附红细胞体的前体或未成熟阶段，两者是同一个种。
2形态特征及染色特性
附红细胞体是一种血液寄生的，大小不一，缺乏细胞壁的多形态微生物，不同种类的附红细胞体在形态学上往往缺乏明显的鉴别特征。附红细胞体随其寄生宿主的不同以及在同一宿主中不同的生长阶段，其形态差异极为显著。常见的形态多样，有杆状、球杆状、环状、圆形、卵圆形、哑铃型和网球拍形等。张富梅等对牛血液悬滴镜检，发现被感染的红细胞发生变形，呈车轮或菠萝状，红细胞上有许多虫体附着，牛温氏附红细胞体呈圆形、椭圆形、月牙形或杆状，有时可见几个虫体结成团块，且附红细胞体具有遮光性，血浆中的虫体具有运动性，可上下翻滚、前后移动，附着在红细胞体上的虫体似乎无运动性，但实际上能使红细胞发生震颤。有的附红细胞体寄生于红细胞的凹盘处,其附红细胞体和红细胞表面之间大概有 15~25 nm 的间隙。附红体通过此空间粘附于红细胞表面。Adam 等发现，在电镜下附红细胞体无壁无核无细胞器，只有单层限制性单位膜包裹，在胞浆内可见低密度的类似核糖体颗粒物质和精细的丝状结构，此外在胞浆内还可见电子半透明区域。
冯立明等在一个红细胞内发现有成百上千个附红细胞体。最近的研究发现附红细胞体不仅可以附着红细胞表面，而且还可以进入红细胞内部 。Zachary 和 Liebich 等，在电镜下发现了猪附红细胞体的三个不同发展阶段，即球形的未成熟的附红小体、盘形的幼年的附红体和环形的成熟的附红细胞体。现己证实，猪的小附红细胞体是猪附红细胞体的前体或未成熟阶段，两者是同一个种。最近一些学者研究认为附红细胞体可能含有 RNA 和 DNA。
附红细胞体对苯胺色素易于着染，张和平对猪附红细胞体进行染色，然后油镜下观察，发现附红细胞体姬姆萨染色呈淡紫色，瑞氏染色呈紫蓝色。吖啶橙染色为典型的黄绿色荧光，对碘不着色。在油镜下，调节微调螺旋时折光性较强，附红细胞体中央发亮，形似空泡。
3 分布及增殖方式
附红细胞体在红细胞表面及内部都有存在，也有的游离在血浆中。一条茂等发现，人工感染的绵羊的骨髓中存在有附红细胞体，冯立明、裴标等也曾在病人的骨髓中发现大量附红细胞体，而且在血液中增加之前，骨髓中已显著增多。因此研究者认为附红细胞体增殖部位可能主要在骨髓。
对于附红细胞体的增殖方式至今尚不十分清楚，Keetoon等曾发现附红细胞体是以二裂方式增殖；Zachary等发现附红细胞体是以出芽方式进行复制的。中国的冯立明和许耀成分别发现，附红细胞体是以裂解增殖的方式进行增殖的。
4 培养特性
目前，由于附红细胞体在宿主红细胞上以直接分裂或出芽的方式进行增殖，所以还没有发现体外培养附红细胞体的最佳方式。Smith对猪附红细胞体进行了体外培养。Nonaka等对猪附红细胞体在厌氧环境下，用 rEM 培养液加入10%犊牛血清并加入肌酐可连续培养 72h。张守发等用分别含 40%的犊牛血清的 RPMI-1640、D-MEM、M-199 三种培养基，37℃下培养牛附红细胞体，在RPMI-1640 培养基中,每 12h 更换 1 次培养液，并补充适量正常红细胞，可连续传代培养可达 44 代以上。杨世锦，用人和猪等 8 种动物的红细胞加入 RPMI-1640培养液中培养猪附红细胞体，发现猪附红细胞体对人、猪、兔、小白鼠、绵羊、山羊、黄牛、犬、鸡的红细胞皆有感染性，其中猪红细胞可传代培养 36 代；山羊和黄牛可传 24 代；小白鼠可传 18 代；兔可传 9 代；人、犬的红细胞可传 7 代；绵羊、鸡红细胞可传 3 代。目前附红细胞体的体外培养条件比较苛刻，如果想要进一步进行附红细胞体的研究工作，对于其体外培养条件仍然需要进一步改进。
5 生物活性
附红细胞体病原对化学药品及干燥环境抵抗力较弱，对温度较敏感。将附红细胞体滴于载玻片上，自然干燥 1min，复溶，只有极少部分还具有很弱的活动能力，自然干燥 2mins，复溶，几乎全部停止活动。一般消毒几分钟即可将其杀死，在含氯消毒剂中 1min 中即可全部灭活，在含碘消毒剂中很快失去活性，停止运动，而在酸性溶液里其活性会增强。杜海霞研究发现，附红细胞体在 3%-5%甲酚皂溶液中，5min 即可失活，3%-5%石碳酸溶液中 4-6h 死亡。在 3%苛性钠溶液中18-24h，较大个体被杀死，小球性的仍然能够运动。0.1%新洁尔灭中 24h，附红细胞体仍能活泼运动。附红细胞体在 75℃-100℃水浴中作用 1min，即失去活性停止运动，对低温抵抗力较强，0℃-4℃环境可存活 60d，并具有感染力，90天仍有约 30%的附红细胞体具有活性。
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