印迹基因在同批传代畜牧胎儿成纤维中的甲基化
吴志强 西川农业大学
哺乳动物印迹基因都具有一定的周期性，其周期大致分为三个过程:印迹的建立，印迹的维持和印迹的去除。其中印迹的建立是在配子形成过程中完成的，但在配子形成后，印迹基因的印迹状态在后续的胚胎发育和个体生长过程中保持不变。因此正常情况下，30d胎儿成纤维细胞中的甲基化状态与新生正常胎猪中的甲基化水平类似。
为了验证IGFZ/Hj基因在克隆猪肺脏中的异常甲基化和IGFZR基因在克隆猪肺脏和肝脏中的异常甲基化状态是否有供体细胞带来，我们检测了与新生克隆猪供体细胞同批传代的胎儿成纤维细胞中的甲基化状态。结果显示，它们在胎儿成纤维细胞中的甲基化状态与其在正常胎猪各组织中的甲基化差异不显著(P>0.05)。然而基因DMRZ的甲基化水平极显著低于其在克隆猪肺组织中的甲基化率(P<0.01);IGFZR基因DMRZ的甲基化水平显著低于其在克隆猪肝组织中的甲基化率(P<0.05)和极显著高于其在克隆猪肺组织的甲基化率(p<0.01)。这说明IGF2/H19基因和IGF2R基因在克隆猪中的异常甲基化不是由供体细胞带来，而是由于不完全甲基化重编程造成。
虽然印迹基因对体外操作很敏感，但我们实验用的体外培养细胞中印迹基因的甲基化水平与正常猪类似，差异不显著(P>0.05)，可能跟我们所用的细胞传代次数少(第4代)、体外培养时间较短有关。
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