猪萎缩性鼻炎的病原流行病学调查
余腾 华中农业大学
兽医在规模化猪场中，采集种公猪、经产母猪、后备母猪、哺乳仔猪、保育仔猪、育肥猪等不同阶段的鼻拭子样品。
1鼻拭子样品采集计划和背景调查
鼻拭子样品采集数量按照每个规模化猪场中不同阶段猪群总数的1一5%进行采集鼻拭子样品。哺乳仔猪和保育仔猪的采样比例约为5%;种公猪采样比例约为1%;经产母猪、后备母猪和育肥猪采样比例在1一3%之间。
采样之前调查采样猪场的背景:疫苗的免疫种类和时间，猪场是否有萎缩性鼻炎症状出现，猪场的生产管理情况等，依据猪场的基本情况，适时调整采样计划，使采样方案更能反映出猪萎缩性鼻炎的病原菌产毒素多杀性巴氏杆菌的流行情况。
2鼻拭子样品的采集和处理
鼻拭子样品的采集:将要进行采集鼻拭子的猪只的头部固定(小猪直接用手固定住头部，4Okg以上的猪则需使用套口器将其头部固定)，用酒精棉迅速擦去猪鼻盘周围的污物，取出无菌的医用棉签，插入猪鼻腔中后部，轻轻转动几次，迅速抽出棉签拭子，并立即放入灭菌的空EP管中或已经装有500拼LTsB培养基的EP管中，短时间内放入4℃条件下冷藏，24h内应对鼻拭子样品进行检测。
鼻拭子样品的处理:在装有鼻拭子的EP管中加入500林 LTsB培养基放入37’C摇床中培养6一8h(已经放入有培养基的鼻拭子样品EP管直接放入摇床中)，随后取出棉签拭子，将其放入灭菌的空EP管中;鼻拭子样品按照3.2.1.1中方法制备巢氏PCR模板。
3鼻拭子样品的检测
巢式PCR方法进行两轮PCR扩增，随后通过电泳验证是否扩增出目的片段，一记录检测结果。阴、阳性对照成立才能记录结果，否则，需要重新进行检测。
4鼻拭子样品检测的结果统计分析
将检测结果进行分场分批统计，计算出鼻拭子总阳性率，各个猪场阳性率，各个猪等数据，并进行进一步分析，得出相关结论。
上一篇： 猪萎缩性鼻炎间接ELISA检测试剂盒的研制
下一篇： "以养为主"成气候 ——广西钦州渔业养殖跨越发展纪实
