猪支原体肺炎免疫疫苗研究
马丰英 华中农业大学
兽医利用分子克隆、定点突变以及重组表达等技术，成功获得猪肺炎支原体的主要免疫原蛋白p46和p65。通过小鼠的免疫试验可见，含有p36+P46+P65蛋白和含有 P36+P46+P65+P97RI一Nrdf蛋白的猪支原体肺炎亚单位疫苗均可通过激活体液免疫和细胞免疫途径，从而产生了针对猪肺炎支原体的特异性抗体以及相关细胞因子。
利用基因工程相关技术，构建了以asd基因缺失株减毒猪霍乱沙门氏菌C50O为载体分别表达猪肺炎支原体主要免疫原抗原p46和p65蛋白的重组菌株 C46(PYA一46)和C65(pYA一65)，并与重组菌株 C36(PYA一36)、C97RI一Nulr(nYA一97RI一Nrd幻相给合研制猪支原体肺炎的基因工程活疫苗。经小鼠免疫试验证明，构建的猪支原体肺炎基因工程活疫苗对小鼠均具有较好的免疫原性，除了能诱导较高水平的体液免疫外，还产生一定水平的细胞免疫反应，并且采用肌注方式免疫时，其免疫原性更好。
利用原核表达可溶性的猪肺炎支原体免疫原性膜蛋白p36蛋白为免疫原，成功地筛选到19株特异性的抗p36蛋白的单克隆抗体细胞株，并利用筛选得到的特异性单抗，建立了一种用于检测猪肺组织中猪肺炎支原体的免疫组化方法。该方法定位准确且成本较低，从而为猪肺炎支原体的诊断以及该病的预防和控制打下基础。
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