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猪支原体肺炎的血清学检测方法

马丰英 华中农业大学
1酶联免疫吸附试验(ELISA)

    BereiterM等兽医发现ELISA法可在猪人工感染3周后检测到抗体。Fekl等建立了不需完全纯化抗原的单克隆抗体阻断ELISA方法。随后,Potier等利用猪肺炎支原体特有的膜蛋白作抗原进行单克隆抗体阻断ELISA,避免与絮状支原体和猪鼻支原体的交叉反应。OkdaaM等利用P46的单克隆抗体及其原核表达蛋白建立了双夹心ELIsA方法。

2补体结合试验(CFT)

    L10yd等认为补体结合试验出现假阴性是因循环抗原的影响,而假阳性则是由于没产生或发现病变或感染其他支原体导致交叉反应,但该法无法确定4一9周龄猪的感染状况。BereiteM等发现eFT可检出感染2周的猪肺炎支原体抗体。虽然CFT阳性率与猪肺部病变相关性好,但存在较高假阳和假阴性。

3免疫酶试验(IEA)

    Vibeke等用IEA检测猪肺炎支原体时,光学显微镜下可看到结构清晰的病原,样品能长期保存。但该法在人工感染35天后才检到抗体。

4免疫荧光试验(IF)

    D.Kwon等用改良的直接荧光抗体技术可检出人工感染2一12周后猪的细支气管及细支气管上皮中的猪肺炎支原体。间接免疫荧光技术用于冰冻切片检测早已经在丹麦SPF猪群中应用,但仅限于猪肺炎支原体大量存在时。

5间接血凝试验(IHA)

    Dowdie等用IHA检测猪肺炎支原体抗体,但感染猪血清能使绵羊红细胞自然溶血。Lam等用猪红细胞替代绵羊红细胞,效价虽低但不易溶血。国内广泛使用中国兽医药品监察所的检测猪肺炎支原体抗体的间接血凝试剂盒。 FreemanMJ等通过ELISA、CFT及剖检来评价IHA时发现,该法检测滴度低、检测结果与感染相关性低。

6放射免疫酶试验(RIDEA)

    BereiterM等得出DEA在感染5周后才检测到抗体的结论。

7表面细胞质基因组共振试验(SRP)

    KimTJ等用p97粘附因子中约 30KD的蛋白为抗原,建立表面细胞质基因组共振试验用于检测猪肺炎支原体抗体滴度,并与传统的ELISA方法检测结果比较,具有较高特异险和敏感性

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