猪肺炎支原体的病原学诊断方法
马丰英 华中农业大学
咳嗽和气喘是兽医检测发现的猪支原体肺炎的临床主要症状，肺的尖、心、中间以及隔叶前缘音d检可见肉样或虾肉样实变。X射线可对隐性或疑似患猪作出诊断，有着重要价值。
1分离培养法
分离培养是证实感染该病原的有效方法，但猪肺炎支原体是最难分离和鉴定的病原体之一。其生长缓慢，对营养条件要求严格，常被猪鼻支原体掩盖，药物治疗或康复猪很难分离。
1.1染色法
用姬姆萨或瑞氏染色进行镜检观察时，可见环状或电灯泡状的猪肺炎支原体。郑忠发等用改良的复红染色法，可见着色鲜艳清晰，呈球状、二极状、车轮状以及藕节状等的菌体，菌体中的细丝着色深而粗。
1.2免疫印迹法
stiPkovitsL等用抗猪肺炎支原体p36蛋白的兔血清对16株不同来源的猪肺炎支原体进行检测时，发现 36KD处均有很强反应。相同抗血清，抗原为47种不同来源的支原体属或无胆支原体属的蛋白质，却不发生反应。
1.3核酸探针检测
Ahrens等用355标记探针用于检测猪、牛不同支原体，仅与猪肺炎支原体有着特异性反应。Futo等用32P标记与猪肺炎支原体rRNA互补的寡聚脱氧核营酸作DNA探针，其灵敏度是放射性同位素测定结果的10倍。Johansson等则用与猪肺炎支原体 165rRNA可变区互补的特异性寡聚核普酸作探针建立斑点杂交法。Stemke将猪肺炎支原体DNA酶切片段的重组产物作探针，敏感性好但特异性不强。KWon等用地高辛标记DNA探针，检测结果易出现假阳性。
1.4 PCR技术
ArtiushinS等建立的检测 16srRNA的PCR法具较强特异性和敏感性。StemkeGW等根据 16SrRNA设计引物，鉴别猪肺炎支原体与猪鼻支原体和絮状支原体。 StemkeGW等建立可特异性检测肺中猪肺炎支原体的套式PCR。 StarkKD等则用套式PCR，首次在试验和野外条件下测出空气中的猪肺炎支原体。CalsmigliaM等根据16srnNA设计两套套式PCR引物，可从鼻拭子中检测猪肺炎支原体。通过扩增猪肺炎支原体的p36和p46基因区分猪鼻支原体。于敏等根据16srRNA建立的PCR法特异且敏感。zeehF等建立的real一time PCR方法，可从活猪鼻拭子中检出病原，特异性达100%。
上一篇： 抗猪肺炎支原体单克隆抗体的研究
下一篇： "以养为主"成气候 ——广西钦州渔业养殖跨越发展纪实
