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猪支原体肺炎疫苗的研究

马丰英 华中农业大学
1弱毒和灭活疫苗
    中国兽医药品监察所研制的猪喘气病弱毒苗,能使免疫猪在攻强毒后肺组织的保护率达80%,且免疫持续8个月。但该疫苗存在成本较高、产量很低、副反应大,胸腔注射的途径操作不方便,且不能对已发病的猪群注射。江苏省农科院畜牧兽医研究所的168株弱毒苗保护率高达84.4%,免疫期可达6个月,但仅对杂交猪安全,对地方猪安全性不高。美国辉瑞公司的“瑞倍适”采用肌肉注射简便易行,可有效减少肺部损伤,但需多次免疫使成本增加。

2基因工程疫苗
    人们希望借助基因工程的方法,通过大量表达猪肺炎支原体的免疫原性蛋白来研制有效的疫苗,以期解决传统疫苗制备方法中抗原制备难的问题。

2.1勃附因子相关疫苗
    Chen等用缺失△111假单胞杆菌外毒素PE与p97的RRI区16拷贝AAKPV(E)的融合蛋白制成亚单位疫苗,免疫小鼠和猪的效果较好,但对强毒株的保护力有待验证。 Yoshihiroshimoji等用表达p97基因的RI和R2区及丹毒杆菌表面保护抗原spaA.1的弱化丹毒杆菌YS一1免疫猪,发现肺部的损伤明显降低,呼吸道可检到抗p97特异性 IgA。 OkambaFR用表达P97C末端的复制缺陷型腺病毒rAdP97C通过滴鼻和肌注两种途径免疫小鼠,血清和支气管肺泡灌洗液有较高的特异性lgG抗体。王亮等则证实Dnak一p97刺激小鼠产生针对p97的抗体。

2.2核普酸还原酶相关疫苗
    PeterK等用猪肺炎支原体NulF的R2亚基C末端的融合蛋白所制备的疫苗对猪进行免疫,并用猪肺炎支原体的野毒株进行攻毒试验,发现免疫组比对照组的肺组织损伤有着明显减轻。PeterK等将该片段克隆至沙门氏菌表达系统制成活疫苗,小鼠口服后血液和肺部抗猪肺炎支原体的IgG和IgA明显增加。仅用纯化的该杂和蛋白接种时,血清和肺中抗此杂和蛋白的IgG显著增加,IgA却增加有限。

2.3表达文库免疫
    Mooe:RJ等从猪肺炎支原体以大肠杆菌质粒表达载体构建的表达文库,筛选到1500个克隆子,随机分为5个亚文库,提取各亚文库的克隆混合质粒免疫猪,发现分别含有96和480个克隆的两个亚文库组保护率达到750。

2.4DNA疫苗
    ehen等构建nNA疫苗peDNA3/p42并免疫小鼠,IgGI和IgGZ。在前8周为对照组的64倍,同时IFN一Y、IL一2、IL一4和mRNA的水平也上升,脾细胞的增殖加强,表明该疫苗能同时诱导产生Thl和ThZ免疫反应。

2.5肤疫苗
    肤疫苗是通过合成产生特异反应的免疫原抗原决定簇部分的肤,从而有效避免传统疫苗抗原成分复杂或病原变异及毒力可能恢复的缺陷。而噬菌体肤库的构建及筛选技术在肤疫苗的设计方面有着巨大的潜力。Yang等将SPF小鼠接种含有猪肺炎支原体免疫原蛋白抗原决定簇的噬菌体,小鼠产生较强的血清IgG反应和IgA抗体。

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