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仔猪免疫应激的模型设计

高庆 四川农业大学

    由于免疫应激在动物生产中比较普遍,如用免疫应激模型来评价功能性养分对于动物机体免疫功能的影响则具备实用价值。猪的免疫应激源很多,包括猪场病原性或非病原性微生物、疫苗和异源蛋白等能刺激猪免疫系统的物质。可利用这些免疫应激源建立免疫应激模型。在之前畜牧人的研究报道中,对照组可采用对猪舍进行消毒或实施“隔离早期断奶”和“全进全出”等措施来减少猪群与病原体接触,而免疫应激组猪群则与猪场病原体密切接触,从而建立比较接近生产实际的模型。

    但这类模型存在稳定性差而风险高、不易控制应激程度、缺乏特异性敏感指标来衡量等缺点。另可采用毒素(如LPs)或病原体(如大肠杆菌、轮状病毒)攻击感染健康猪来建立模型,这是目前建立免疫应激模型的趋势。免疫应激源效应不一,而建立这类模型时可选用特定己知功效的抗原、毒素或病原体攻击健康动物机体,能有目的地使机体处于特定的免疫应激状态。依据受到攻击后机体所处免疫应激状态的不同,可将免疫应激模型分为免疫抑制模型和免疫活化模型。从猪腹膜、肌肉或静脉注射一定剂量的LPS,激活猪的免疫系统,这是目前常用的免疫活化模型。LPS是革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、沙门氏菌、奈瑟氏球菌属等)细胞壁结构物质,能诱导猪产生细菌感染后的症状,如厌食、嗜睡和发热等。LPS与巨噬细胞表面受体CD14结合,可刺激巨噬细胞合成和分泌IL一1、IL一6等炎性细胞因子,急速地激活猪的免疫抵抗机制,导致猪免疫系统活化。

    一般情况下,LPs诱导急性的免疫激活,应激反应持续的时间较短,而次数过多的LPS刺激又可能使猪产生耐受性。而较长的应激持续时间才有利于进行动物营养方面的研究。本课题组在前人研究基础上,经过预试验确定了LPS注射剂量和注射频次,建立了应激持续时间为7d的LPs免疫激活模型。尽管LPs刺激与猪场中活细菌诱导的免疫反应并不一样,LPs模型也不能完全模拟在实际猪场条件下常见的慢性免疫应激,但LPS攻毒建模还是因为其效应比较确定,以及应激程度相对可控制,而应用较普遍。本课题组已多次成功地将LPS攻毒模型应用于动物营养与免疫的研究。

    生产上Pcv一2感染仔猪危害巨大,Pcv一2感染可导致仔猪出现免疫抑制。利用PCV一2攻毒所建立免疫抑制模型可以更接近生产。PCV一2是一种嗜单核一巨噬细胞性的病毒,感染单核一巨噬细胞和树突状细胞却不在其内复制,也不引起巨噬细胞凋亡,而B细胞可能是其复制的重要靶细胞,Pcv一2感染将弓}起B细胞凋亡,感染初期的PMws猪淋巴组织和骨髓样组织的凋亡指数却比对照组低;感染pCV一2引起猪组织IL一4、IL一10、IFN一a、MeP一1等细胞因子的水平发生变化,淋巴细胞不能有效地激活和增殖,巨噬细胞表面抗原MHC一I类分子和MHC一n类分子表达下降,而增殖不足的影响大于细胞凋亡,使外周血液中B细胞和T细胞减少等对免疫系统的损伤和抑制。本试验室已经成功利用PCv一2攻毒的建立了仔猪免疫抑制模型。

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