猪繁殖与呼吸综合征的理化及病毒培养特性
周丹 四川农业大学
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病毒直径约50一80nln，病毒粒子呈球形，是一种有囊膜的单股正股RNA病毒。病毒粒子大多数呈球形，内有一个核衣壳，核心直径25一35nm，呈20面立体对称，内含长约15kb单股线状正链基因组RNA，外绕脂质双层膜，表面有小而不显著的纤突。病毒理化特性研究表明:乙醚、氯仿等有机溶剂可使本病毒失活，脱氧胆酸钠和Triton一X一100可使PRRSV失去感染力。这是因为PRRSV的双层脂质囊膜结构，造成其对脂溶剂和去垢剂敏感。
PRRSV对温度极为敏感，在较热的环境中不可能存活较长的时间，56℃45min、37℃48h病毒完全失去致病性;潮湿、低温的环境有助于PRRSV存活，一20℃至一70℃时，PRRSV可长期保存，4℃可存活1个月。PRRSV对pH敏感，在6.5<PH<7，5的环境中稳定，当PH超过其适应范围，其感染力很快丧失。病毒凝集红细胞试验表明:自然分离到的 PRRSV不凝集鹅、鸡、猪、豚鼠、牛、马、绵羊和人等大多数动物的红细胞，不具有血凝活性。但日本学者Jusa等报道:用乙醚和吐温一80处理后，PRRSV具有血凝活性，并且PRRSV特异性抗血清可以抑制这种血凝活性，Hl抗体滴度与中和抗体滴度具有非常明显的相关性。但是，其他学者按相同的方法进行试验研究，未能得到相同结果，因此，PRRSV是否具有血凝活性需进一步证实。
PRRSV有着严格的宿主范围，猪肺泡巨噬细胞(PAMs)是其首选靶细胞，PRRSV最初用原代细胞猪肺泡巨噬细胞分离得到。早期的病毒培养特性研究认为，PRRSV主要在肺泡巨噬细胞、肺血管内皮巨噬细胞、外周血单核细胞等单核一巨噬细胞系统中才能生长增殖，后来研究证实公猪的翠丸细胞如精子细胞和精母细胞等也适合于PRRsv的生长繁殖。除了能在PAM体外培养外，仅能在有限的几种细胞中生长增殖，如源于MA104猴肾细胞系的两个细胞亚克隆eL2621和Mare一145，猪脾巨噬细胞，脑小胶质细胞，近年来有人用HsZH细胞分离PRRSV，它是从Marc一145细胞中克隆出来的，但是比Marc一145细胞更敏感，更适应于PRRsv的增值。一般来讲，不同的PRRsv毒株其细胞敏感株也会存在部分差异，但大多数毒株对队M均有很强的适应性且病毒滴度高，PAM是PRRSV最重要的靶细胞，故早期研究者利用队M分离野毒株，但由于制备队M存在技术要求高，难度较大，方法比较烦琐等问题，目前大多数研究者和疫苗生产企业利用Marc一145细胞来分离与培养PRRSV。
PAM是PRRSV病毒最重要的靶细胞，用PAM培养病毒，其增值速度较快，通常细胞病变出现较早，在感染后1一4天便能观察到，但在CL2621和Marc一145上，病毒生长稍慢，细胞病变出现较晚(2一6天)，PRRSV在各种细胞上都呈杀细胞性复制，主要表现为细胞圆缩、聚集、鬃毛样的细胞质膜和颗粒形成，最后从培养瓶上崩解脱落。PRRSV的复制局限于细胞浆中进行，成熟的病毒粒子在接毒后9一12h通过细胞的排粒作用而释放。
有研究者发现，用PRRSV全基因体外转录的基因组转染细胞时，PRRSV转录的基因组可以在BHK一21、Vero等几种不能被病毒粒子感染的细胞系中增殖，因此可以推断，病毒的细胞亲嗜性很大程度上是由细胞表面的某种受体所决定的。Duan曾报道获得了一种能识别巨噬细胞表面的单克隆抗体，这种210kDa的抗体蛋白与巨噬细胞发生特异性结合，而后便能成功阻止PRRSV感染被结合的巨噬细胞，研究者推测这种蛋白就是PRRSV的一种受体蛋白。
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