土壤中猪链球菌检测方法的建立及应用
涂攀 华中农业大学
猪链球菌是其常见的病原之一，主要引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症和突然死亡等。目前多个国家和地区有该病的报道，在我国也有多个省市治区流行过。在华南、西南、华东及江西等地曾大面积爆发流行过，近年来其病率也有逐年上升的趋势，给畜牧养殖业造成了巨大经济损失，是多年来困扰养猪业展的重要传染病之一。研究中采取两种方法来检测土壤中猪链球菌:
1土壤中猪链球菌PCR检测方法的建立。
由于猪链球菌类型多样，毒力因子各不相同，对该病仍缺乏有效手段诊断和防治。谷氨酸脱氢酶在进化上是极为保守的一种蛋白，是一种重要的诊断性抗原，本研究采用GDH基因为目的片段，用PCR来检测土壤中猪链球菌。
2研制一种对猪链球菌有较强选择作用的选择性培养基，用于猪场土壤中分离猪链球菌。
猪场土壤中最常见的杂菌是大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌和肠球菌，这些细菌营养要求低、生长速度快，严重影响猪链球菌菌落的形成和鉴别，所以本研究要求的最终抗菌药物尽可能地对这些细菌产生抑制作用，而猪链球菌生长良好，通过阅读关于一些抗猪链球菌的药物，所以最终选择了多粘菌素B，四环素，磺胺间甲氧嗜咤，三中抗生素筛选猪链球菌，其中多粘菌素B抗菌作用最强。多粘菌素B不只对革兰阴性菌有强大抗菌效能，对革兰阳性菌中的乙型溶血性链球菌也有作用。四环素为广谱抑菌剂，高浓度时具杀菌作用。除了常见的革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌以及厌氧菌外，支原体属、衣原体属、非典型分枝杆菌属、螺旋体也对本品敏感，对革兰氏阳性菌的作用优于革兰氏阴性菌。磺胺间甲氧嗜咙对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有抑制作用。
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