我国家畜主要保种方法及应用现状

    摘要：近几十年来，各个养殖场引进了大量外国品种与我国优良地方品种进行广泛杂交，导致地方品种优良基因的流失。为了更好保存我国畜禽的优良基因，在生产中采取了活体保种、超低温保种等方法。笔者就应用比较多的几种方法进行了介绍。

    中国是个畜禽品种比较丰富的国家之一。但近些年来，许多养殖者为了追逐经济效益，大量引进外来品种与当地的优良家畜品种杂交，使一些品种濒临灭绝。冀南黄牛、草原红牛、甘肃著名的八眉猪和甘肃黑猪等很多优良地方品种已经到了灭绝边缘。为了保护国家的优良家畜品种，保种工作是目前一件紧迫而重要的任务。

    1 活体保种

    可以从优良品种群体中挑选优秀的公、母畜，在其原产地的保种场或者保护区进行活体保存。由于我国生物技术起步较晚，活体保存仍是目前畜禽保种最常用的方法。家畜活畜保种的效果受留种数量、公母畜比例、选配方法和世代间隔等影响。通江县空山黄牛的保种方案是：黄牛保种核心群要求公牛为特级或一级，80％的母牛为一级以上。留种方式：种母牛100头～200头，种公牛20头以上，三代之内没有血缘关系的家系不少于6个。采用各家系等量留种，即每头公牛后代留l头公牛，每头母牛后代留l头母牛。交配方式为避免近交，世代间隔定为6年。吴平山对江西几个地方品种猪的进行了活体保种，其保种群由60头～100头纯种母猪和6头～10头纯种公猪组成。这样小的群体猪近交系数上升快，加上遗传漂变必定会造成基因的丢失，很容易因近交而引起退化。这时，可以通过同一品种内的不同品系杂交或轮回杂交，来增加小群体内的遗传多样性，或者母猪适当引入外血。

    2 超低温保种

    超低温包括冷冻配子、胚胎、体细胞、胚胎干细胞等。

    2.1 冷冻精子

    1950年，英国的Polge和Smith等用冷冻牛精液，使用人工授精技术产下了世界上第1头用冻精受孕的小牛，是养牛业的一个飞跃。如今，为保护濒危动物和优良地方品种，世界各地相继建立了多种动物精液基因库。20世纪80年代，我国采用冷冻精液授精的奶牛已占90％以上。朱志伟等制作湖羊的冻精和冷冻胚胎，解冻后冻后平均活力为0.35～0.40。虽然绵羊冻精制作保存技术已经比较成熟，但冻精的受胎率低仍是限制绵羊冷冻精液进行生产推广的重要因素。猪精子对冷应激特别敏感，冻精的受胎率比较低，窝产仔数也较低；因此，猪精液的冷冻技术应用难以推广。马月辉、吴常信等认为，冻精和冷冻胚胎能最大限度地防止质量性状等位基因的丢失并减少数量性状的遗传漂变。但这种方法不能保存全部基因和性状，还有必要用冻精对畜禽进行回交，并结合冷冻胚胎技术，必要时通过胚胎移植的方法来获得纯种。

    2.2 冷冻卵子

    与精子相比，卵细胞体积较大，结构复杂，抗冻能力低，解冻后比精子复活率低。在其冷冻保存时易发生细胞骨架解体、基因异常、透明带质地变硬、膜完整性丧失等损伤，进而影响冷冻后卵母细胞的发育能力，降低了复苏后的受精率。

    2.3 冷冻胚胎

    胚胎冷冻技术是将胚胎和冷冻液装入冷冻管中，经过慢速降温（第2天～第3天的胚胎）和快速降温（第5天～第6天的囊胚）后，使胚胎停止发育，并在液氮中保存的一种技术。冻胚保种延长了双亲的配种年龄和世代间隔，此技术促进了胚胎移植在畜牧业中的推广，也给品种资源保护提供了可靠经济的途径。王荣民等研究发现，年龄在3岁左右的经产母牛冷冻胚胎采集制作效果更好。经吴细波研究发现，马头羊以细管玻璃化冷冻比OPS冷冻效果略好。2006 年，桑国俊等发明了玻璃化冷冻后保存猪胚胎的方法，胚胎移植后的产仔率最高能达到17.74％，还远不能将冷冻胚胎用于商业。

    2.4 冷冻体细胞和胚胎干细胞

    第一个克隆羊Dolly的出现，证实了哺乳动物体细胞具有全能性的理论。构成生物体的各种细胞都含有全套的遗传信息基因，使得每一种细胞都有可能诱导发育成为个体的潜能。取肾、皮肤等组织的体细胞，经体外传代培养，得到成纤维细胞或上皮状细胞。再经消化处理后，可以长期保存在液氮中。需要时通过核移植技术克隆出与供体一样的个体，从而达到保护种质资源的目的。中国农科院畜牧研究所遗传资源研究室从成立以来，共建立了民猪、鲁西黄牛等50多个濒危地方品种的成纤维细胞库。这些细胞将为种质资源的保护提供了更好的思路。

    从原肠胚期之前早期胚胎内细胞团中取出的胚胎干细胞，经过培养还具有继续分裂和增殖的能力和多向分化的特性。其在体外或者体内都能被诱导分化成机体几乎任何一种的细胞类型。而且其经过解冻后成活率高达90％。进行核移植后，在短期内可获得大量与供体完全相同的个体，对于保护珍稀野生动物有着重要意义。

    3 繁殖技术保种

    3.1 胚胎移植

    胚胎移植又称受精卵移植，俗称借腹怀胎，是指把通过手术或非手术方法取出来的雌性动物的早期胚胎，或者从体外受精胚胎，移植到经过同期发情处理，并且处于同样生理状态的其他同种雌性动物体内，然后继续发育为个体的技术。赤峰市在20世纪80年代末即开始了牛的胚胎移植技术的研究和应用。由于我国胚胎技术研究试验起步较晚，国产超排激素效果不太理想，移植器械的生产厂家很少；因此，此技术相关的器械、药品和激素主要靠进口。成本的提高，阻碍了此技术的推广。目前，此技术主要用于种用家畜的生产。

    3.2 胚胎切割

    胚胎分割是指将哺乳动物的早期胚胎采用手术或非手术的方法从子宫或输卵管中取出，用显微操作仪的玻璃针把每个卵裂球分开，分别放入透明带，然后移植，最后发育成同卵双胎、同卵多胎的克隆动物。因此，胚胎分割技术可以有效扩大优质种畜的和濒危野生动物数量。

    4 结语

    综上所述，活体保种是一种最基础的保种方法；冷冻精子和胚胎的保种技术也比较成熟，在全国已经推广。在胚胎发育机制和基因表达调控等未研究清楚的情况下，胚胎切割、克隆、DNA标记等保种方法在应用和推广方面受到了限制。未来保种方法的研究方向应该是以群体遗传学和分子遗传学相结合为主。

    作者简介：张颖，1980年出生，女，汉族，讲师，研究生学历，主要从事动物繁殖与改良等课程的教学与研究工作。

   （张颖  河北省邢台市现代职业学校）

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