根据农业部《中国奶牛群体遗传改良计划》中关于加快建立我国种公牛自主培育体系，提高种公牛自主培育能力的要求，适应国家奶牛良补工程建设需要，天津市奶牛发展中心(简称“中心”)结合自身实际，近年来一直在荷斯坦奶牛种公牛自主培育体系建设方面进行大胆探索和认真实践，并取得了显著成效，培育出了一批顶级优秀种公牛。

     天津市奶牛发展中心是集奶牛育种科研、生产性能测定、外貌鉴定、品种登记和良种冻精推广等工作于一体的奶牛科研和生产单位。随着良种奶牛冻精、胚胎、活体在全球范围的交流使用，育种值指数选择的普及，特别是近年来全基因选择技术的应用，国内外奶牛育种事业发展迅速。如何在新形势下把握机遇，实现加速发展乃至跨越式发展，中心结合自身实际，制订了引进和自主培育相结合的种公牛培育方案。方案引进部分是指利用进口胚胎、冻精的便利形式，通过胚胎移植和自主选种选配的方式，获取国际顶级公牛;方案自主培育部分是指利用嘉立荷牧业集团有限公司高水平育种核心群，在传统DHI测定、线性鉴定和品种登记工作的基础上，通过全基因组选择等分子育种技术和传统育种技术相结合，在缩短公牛培育时间，提高后备公牛遗传品质和选育准确性，合理组建和利用育种核心群等方面进行探索研究，以期建立成熟、高效、适合中国国情的优秀种公牛自主培育体系。

     2006—2014年，中心引进了美国、加拿大等奶业发达国家优质胚胎800余枚。2011年起，为满足自身种公牛选育的需要，中心通过对美国和加拿大优质母牛和顶级种公牛进行自主选配来生产胚胎的方式进行了尝试。2014年起，中心计划每年继续引进胚胎至少200枚。

     1．1．1国外公牛选用标准

     美国的总性能指数(G)(TPI)、加拿大的终生效益指数(G)(LPI)分别排名其国家前10名或国际公牛组织排名(选配方案制订时的当月最新数据)前20名的验证公牛，外貌鉴定评级为特级。

     1．1．2国外供体母牛选用标准

     成母牛1胎305d产奶量≥14t，乳脂率≥3．8%，乳蛋白率≥3．2%，(G)TPI、(G)LPI排名各自国家前10位，外貌鉴定评分85分以上。所有公母牛都必须在各自国家奶牛品种协会登记注册，有详细完整的系谱资料，并且不携带结核病、副结核病、布鲁杆菌病、口蹄疫、蓝舌病、黏膜等传染病及其致病菌;无脊椎畸形综合症(CVM)、瓜氨酸血症(CN)、尿酐酸合酶缺乏症(DUMPS)、牛白细胞黏附缺陷症基因(BLAD)、妊娠延期症(PG)、凝血因子缺陷症(XI)、粉红牙症(PT)等隐性遗传缺陷。

     1．1．3胚胎定制

     选配用的种质公母牛由美国CＲI、北京百百格林进出口有限公司和加拿大太平洋遗传育种有限公司等按照中心国外公母牛选用标准提供。并且为更好地引进国外顶级遗传资源，加速提高中心公牛遗传品质，中心还选用了基因组检测育种值(G)TPI、(G)LPI排名前10的青年公牛(可靠性≥75%)，但由该部分公牛选配生产的胚胎数量控制在15%以内。采用平衡育种的理念，在充分了解公母牛生产性状、外貌性状、功能性状等遗传相关的基础上，详细研究其各性状的数据资料和系谱信息(参考公母牛的全同胞、半同胞信息)，在兼顾奶牛长寿性、繁殖力、健康性状的同时，突出高产奶量、高乳脂率和高乳蛋白率等遗传品质。

     在选配时，组合的近交系数控制在6．25%以内(极高品质公母牛允许适度近交)，组合选定后，根据供体父亲和供体外祖父的乳脂、乳蛋白、体型、乳房系统、肢蹄、畜群寿命、公牛女儿繁殖力和体细胞16个分项育种值计算胚胎组合的TPPI值，要求胚胎TPPI值≥2500。

     2011年前中心引进的胚胎多为国际奶牛育种公司生产的顶级胚胎。2011年起引进的胚胎以自主选配方式生产为主。

     1)引进标准:所有胚胎必须是来自供体内7～8日龄的一级紧缩桑葚胚或桑椹胚、囊胚或扩张囊胚，解冻后胚胎的可使用率不低于95%;胚胎必须由中国出入境检验检疫总局认可的胚胎移植中心所生产，并具备各自国家农业部门出具的出口检疫许可证书;必须提供胚胎系谱证明、冲胚记录、冷冻及解冻方法。

     2)引进时间:每年胚胎分2批次引进，春季5月份以前，秋季9月份以前，供货商务必确保胚胎按时交付中心，以保证胚胎移植的顺利进行。

     3)受体母牛:选择嘉立荷5000头标准化示范牛场为胚胎移植场，受体母牛要求在15～20月龄，发情周期正常，健康无疫病，且营养状况良好。选定的受体母牛数量与待移植胚胎的数量比例为2∶1。

     1．2自主培育

     建立高水平开放式育种核心群是实现种公牛自主培育能力的重要条件，DHI测定、良种登记和线性鉴定是建立育种核心群的基础。开放式育种核心群以嘉立荷2．2万头高产母牛为基础群，规模250头，青年母牛和成母牛的比例为7∶3。

     1．2．1青年母牛的选择

     其组成部分为来自基础群的青年母牛和来自进口胚胎移植生产的青年母牛。选择方法为综合分析青年母牛双亲的各项育种值，并参考其TPPI值，对待选母牛进行初选。然后，对初选群进行全基因组检测，按照检测总成绩排序，并在参考分项育种值的基础上，选择出育种核心群(青年牛部分)。

     1．2．2成母牛的选择

     分析基础群品种登记系谱，要求个体3代系谱明确，不携带隐性遗传缺陷，健康无疫病。整理奶牛群的DHI测定成绩和线性鉴定成绩，委托中国奶牛数据处理中心计算个体牛的综合育种值CPI1(测定日模型)，然后对CPI1值进行排序，选出育种值较高者组成育种核心群(成母牛部分)，要求奶牛的泌乳均衡性好，一胎产奶量≥12000kg，乳脂率≥3．5%，乳蛋白率≥3．1%，外貌鉴定成绩≥85分，无缺陷性状。

     1)冻精的选择:主要选择国外顶级冻精(选择标准同1．1)，还包括部分中心和国内其他公牛站的优秀冻精;2)选配方法:具体选配方法同1．1．3，但近交系数严格控制在6．25%以内，TPPI值作为参考。

     1．3犊公牛来源及选择方法

     犊公牛主要来自于进口胚胎移植和核心群自主选配，还包括少数来自核心群外的成母牛自主选配所生产的犊牛，这部分成母牛的产奶量、乳脂率或乳蛋白率中某1项或2项育种值较高。

     犊公牛出生后即采取血样(2014年起采集尾部带毛囊毛样)，寄送到中国奶牛数据处理中心统一检测。根据基因组检测育种值高低，选择可进入当年国家良种补贴的犊公牛(基因组检测育种值GCPI≥1100)和部分未进入国家良种补贴的犊公牛(800≤GCPI≤1100)。虽然我国奶牛全基因组选择研究已经于2008年展开，但当前全基因组检测的产奶性状育种值可靠性仅0．6～0．75，为避免优秀个体被过早淘汰，中心对未入良补的犊公牛进行适当选留。

     犊公牛出生后要进行体重、体尺的测量，并拍照，打耳标，建立系谱档案。犊公牛发育过程中，还要对其体重、体高、体斜长、胸围、腹围、管围、睾丸周径和膘情等各项指标进行追踪记录，对发育情况不良者进行严格淘汰。

     后备种公牛在18月龄时，聘请农业部专家对其进行体型外貌鉴定，并且3岁前每年鉴定1次。12月龄时进行试采精，采精量、精子密度、活力、畸形率和顶体异率等指标符合中心冻精制作标准的精液送交农业部指定检测中心检测。对精液不符合中心冻精制作标准或农业部检测机构检测不合格的公牛要分析查明原因，并进行治疗，对反复治疗仍不合格者进行严格淘汰。

     1．4．2后裔测定

     所有选定的后备种公牛都参加中心自主组织的后裔测定和香山联盟联合后裔测定。1)后裔测定场的要求:①奶牛场规模在200头以上，且饲养后备母牛，奶牛个体采用全国统一的12位标准牛号;②参加全国奶牛品种登记，有完整的系谱、繁殖、配种、健康等信息;③参加全国奶牛生产性能测定(DHI)，有完整的产奶量、乳脂率、乳蛋白率和体细胞数记录;④参加全国奶牛线性鉴定;⑤采用机械化挤奶，操作规程规范;⑥有完善的疫病防控计划和措施，保证牛群健康。

     2)后裔测定冻精的发放与使用:要求每头参测公牛的冻精数量为600支，分布在50个以上不同地区的不同奶牛场。后裔测定冻精发放后，要求按照随机交配的原则在4个月以内完成试配工作。

     3)后裔测定公牛后代女儿的DHI测定和线性鉴定:所有发育良好且健康的公牛后代女儿都要建立完整的系谱档案，15～18月龄时进行配种，产犊后范地参加DHI测定，并将测定数据上报中国奶牛数据处理中心，要保证数据在育种值计算时的有效性。公牛后代女儿产犊后30～180d由中国奶协在册鉴定员按照《中国荷斯坦牛外貌鉴定规程标准(草案)》进行鉴定，并将鉴定成绩上报中国奶牛数据处理中心。

     全基因组检测技术应用以来，2012—2014年中心共引进美国、加拿大定制胚胎347枚(父母亲均有基因组检测成绩)，胚胎均价10000元以上。供体母牛一胎305d平均产奶量14t以上，其中部分供体母牛的305d产奶量达23t。胚胎TPPI指数均在2200以上，其中部分组合TPPI达3100以上。这批胚胎已经全部移植，胚胎平均受孕率55%以上，已出生健康犊公牛30头。

     2006—2011年，共获得胚胎移植种公牛50头，其中验证公牛成绩良好，编号12107227公牛CPI1指数高达2600;基因组检测青年公牛成绩良好，编号12112283公牛(G)CPI指数高达1887。核心群生产犊公牛20头，已获得基因组检测成绩的有9头，除个别个体成绩不理想外，大部分个体检测成绩理想，其中编号12113294公牛(G)CPI指数为1427。

     当前中心的种公牛培育体系虽然取得了一定的成绩，但也存在许多潜在的问题;因此，中心提出了一些针对性的改进措施，以期自主培育出更多的适合中国生态环境和经济环境的优秀种公牛。

     3．1存在的问题

     1)高价引进的国外顶级胚胎生产的种公牛，其优秀遗传品质没有在其后代女儿中得到充分表现;2)高品质育种核心群的利用不够细化和充分，全基因组选择和传统的品系育种等方法未有效结合;3)转基因和杂交育种等工作开展的不够到位;4)种公牛长寿性、繁殖力、抗病性和耐湿热育种进展缓慢;5)核心群规模偏小，遗传进展受到一定限制。

     为解决种公牛长寿性、繁殖力、抗病性和耐湿热等低遗传力性状的选择准确性问题，拟扩大青年公牛的后裔测定后代女儿数至200头以上;充分利用核心群加速遗传进展，计划今后对其中极优秀个体进行超数排卵，通过胚胎移植的手段，在获得高品质犊公牛的同时，扩大其后代女儿(基因组检测优秀个体)在核心群中所占的比例;为充分利用核心群高产奶量、高乳蛋白率、高乳脂率、优秀体型等遗传品质，计划深入开展奶牛产奶量、乳品质、体型分化选育的探索研究，以期尽快培育出新的专门化品系;快速提高种公牛的抗病性(如抗乳房炎等)遗传品质，与高校联合开展转基因动物育种研究;加速提高种公牛耐热性遗传品质，拟通过选育低红细胞钾个体、导入杂交和分子辅助育种的方法培育新品系;使核心群获得更高的遗传进展，适度扩大育种核心群规模，将核心群以外基础群中的优秀青年个体纳入育种核心群;继续加强奶牛生产性能测定、线性鉴定、良种登记、遗传缺陷筛查等基础工作，建立并完善奶牛育种综合数据库。

     2013年天津市奶牛存栏量为15．6万头，平均单产为7．6t。嘉立荷牧业集团有限公司存栏奶牛2．2万头，年平均单产10．6t，个别牛场年平均单产达12．5t以上，单产水平已经接近或达到世界奶业发达国家水平。因此，今后天津奶牛育种改良在稳固产奶量的基础上，有必要在奶牛长寿性、乳品质、繁殖力和抗病性等方面进行有效遗传改良。

     当前探索的种公牛培育体系将引进国外优秀种质资源和自主培育相结合，将全基因组选择等分子育种技术和传统育种手段相结合，重视开放式育种核心群的组建和有效利用，必将有效加速产奶量、乳脂率、乳蛋白率、体型等性状突出的优秀种公牛的培育进程;也有望培育出长生产寿命、高繁殖力、抗乳房炎等优良性状的奶牛新品系，适应不同奶牛场改良目标多样化的迫切需求。相信通过顶级公牛的培育和优质冻精的推广，将有力促进全国奶牛群体遗传改良进程。

(天津市奶牛发展中心，吴周良，刘自增，赵庆彬，汪湛，王一文0