随着我国家禽养殖业的快速发展，禽病流行更加复杂，给养禽业带来了巨大的经济损失。新城疫（newcastledisease，ND）是一种重要的家禽传染病，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类家禽传染病之一［1］。目前主要采用疫苗免疫接种的方法对ND进行预防，但是在实际生产中，常因气温、药物和病原等多种因素的影响，导致疫苗免疫效果不理想［2-3］。近年来，随着中药理论和实践的发展，人们发现天然非细胞毒性物质———中药多糖可以增强机体的免疫功能和抗病能力［4］。

     多糖作为一种免疫治疗药物，是近年来新药开发研究的热点。枸杞多糖是从枸杞子中提取的一种水溶性多糖，具有显著的降血糖、降血脂功效［5-6］。研究证明，枸杞多糖能增强机体非特异性免疫功能和刀豆蛋白A（ConA）诱导的淋巴细胞增殖，增加血清溶血素含量［7］。枸杞多糖能够显著地促进小鼠脾细胞增殖反应和抗体生成反应［8］，并对剧烈运动后大鼠的肝脏和肾脏细胞具有保护作用［9］。在比较枸杞多糖、灵芝多糖、茯苓多糖等6种多糖对小鼠免疫功能的影响时发现，枸杞多糖能够显著地增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能［10］。近年来，国内对枸杞多糖的研究不断深入，但其在家禽养殖及疾病预防领域的研究较少。笔者通过开展枸杞多糖对雏鸡新城疫免疫效果影响的研究，初步探索枸杞多糖对雏鸡发挥免疫调节作用的机理，以期为将其开发为一种优质的畜禽饲料添加剂提供理论依据。

     采用水提醇沉法提取枸杞多糖。经蒽酮硫酸法检测，提取的枸杞多糖含量为80.25%。将枸杞多糖以不含小牛血清的RPMI-1640培养基溶解后，配制成不同浓度的溶液，用微孔滤膜（0.22μm，爱尔兰Millex公司）过滤除菌，4℃保存待用。

     1日龄健康雏鸡（公雏）400只，购自河北省张家口市宣化县某鸡场，饲喂雏鸡全价日粮。

    

   

     选取健康的1日龄雏鸡400只，随机分为A、B、C、D共4组，每组100只。A、B组雏鸡于7日龄时，分别灌服10mg/kg和20mg/kg的枸杞多糖溶液各5mL，C、D组灌服等量生理盐水。同时，A、B、C组于7日龄时，用新城疫Ⅳ系疫苗点眼滴鼻，进行第1次疫苗接种，于21日龄时点眼滴鼻进行第2次疫苗接种，D组不作处理，为不免疫不用药的对照组。4组雏鸡的其他饲养管理措施完全一致。

     分别于7、14、21、28、35日龄，每组各随机抽取5只雏鸡，无菌翅下静脉采血1mL，分离血清。采用微量血凝抑制试验（HI）测定新城疫抗体效价。

     在免疫后的第7、14、21、28和35天，每组各取5只，编号并称量其体重，然后处死，迅速取其免疫器官胸腺、脾脏、法氏囊称重，计算免疫器官指数。法氏囊指数=（法氏囊重量/雏鸡体重）×100%，胸腺指数=（胸腺重量/雏鸡体重）×100%，脾脏指数=（脾脏重量/雏鸡体重）×100%。

     2.4数据统计分析

     各组试验数据以平均值加减标准差表示，用SPSS11.5软件进行Duncan′s多重分析，比较各组雏鸡的抗体水平及免疫器官指数之间的差异。P<0.05时，认为差异显著。

     由表1可知，接种14d和28d后，A组抗体效价显著高于C组和D组（P<0.05），接种21d和35d后，A组抗体效价极显著高于C组和D组（P<0.01）；接种21d和28d后，B组抗体效价显著高于C组和D组（P<0.05）；免疫后14～28d，A、B组的抗体效价呈升高趋势，并且在28日龄时达到最高值，35日龄时略有下降，但仍高于C、D组。

     3.2.1枸杞多糖对雏鸡胸腺指数的影响：由表2可知，接种后7d和14d，A组雏鸡的胸腺指数显著高于C组和D组（P<0.05），接种后21d、28d和35d，A组雏鸡的胸腺指数极显著高于C组和D组（P<0.01）；接种后21d、28d和35d，B组雏鸡的胸腺指数显著高于C组和D组（P<0.05）。结果表明，枸杞多糖能够显著促进雏鸡中枢免疫器官胸腺的发育。

     3.2.2枸杞多糖对雏鸡法氏囊指数的影响：由表3可知，接种后7d、14d、28d及35d，A组雏鸡的法氏囊指数显著高于C组和D组（P<0.05），接种后21d，A组雏鸡的法氏囊指数极显著高于C组和D组（P<0.01）；接种后7d和14d，B组雏鸡的法氏囊指数显著高于C组和D组（P<0.05）。结果表明，枸杞多糖能够显著促进雏鸡中枢免疫器官法氏囊的发育。

     3.2.3枸杞多糖对雏鸡脾脏指数的影响：由表4可知，接种后7d、14d、28d及35d，A组雏鸡的脾脏指数显著高于C组和D组（P<0.05），接种后21d，A组雏鸡的脾脏指数极显著高于组和D组（P<0.01）；接种后7d和14d，B组雏鸡的脾脏指数显著高于C组和D组（P<0.05）。结果表明，枸杞多糖能够显著促进雏鸡外周免疫器官脾脏的发育。

     体液免疫是机体重要的特异性免疫反应，能够防御细胞外微生物和病毒的侵袭，体液免疫的状态常用抗体效价来反映。研究报道，中药多糖能够显著增强免疫雏鸡的体液免疫水平［11］。该试验通过测定灌服枸杞多糖后的新城疫免疫雏鸡外周循环血液中的新城疫抗体效价，评价枸杞多糖对雏鸡体液免疫功能的影响。试验结果显示，灌服10mg/kg和20mg/kg的枸杞多糖溶液，均能够显著提高新城疫免疫雏鸡的抗体效价，提示一定剂量的枸杞多糖能够显著增强雏鸡的特异性免疫应答反应，延长高水平抗体的维持时间，提高疫苗的保护力。

     4.2枸杞多糖对疫苗免疫雏鸡免疫器官指数的影响

     禽类的免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子三部分组成。免疫器官是淋巴细胞和其他免疫细胞发生、分化、成熟、定居、增殖以及免疫应答产生的场所。机体的免疫功能取决于免疫器官的状况。动物在健康的情况下，免疫器官的重量增加表明机体免疫机能得到了提高，重量减少则表明机体免疫状况变差。免疫器官指数是衡量免疫器官生长发育状况的一个重要指标，可以反映机体的免疫功能。胸腺、脾脏和法氏囊是禽类重要的免疫器官，各自的指数代表了机体的免疫状态，是反映机体免疫器官发育水平的重要指标。法氏囊是B淋巴细胞分化、发育和成熟的场所，胸腺是T淋巴细胞分化、发育和成熟的场所。该试验结果显示，灌服枸杞多糖能够显著提高雏鸡中枢免疫器官胸腺、法氏囊以及外周免疫器官脾脏的指数，表明枸杞多糖能够促进雏鸡免疫器官的生长发育，有效地增强机体的免疫功能。

     一定剂量的枸杞多糖能显著提高雏鸡新城疫抗体效价和免疫器官指数，对鸡新城疫疫苗的免疫效果具有明显的增强作用。

（河北省张家口市动物卫生监督所，郑志新）