猪常温精液生产中的质量控制
近年来,随着生猪良种补贴项目的实施,种公猪站及精液配送网络建设日趋完善,种公猪及其精液产品质量明显提高。但在实际生产中,猪常温精液的生产要经历采精、原精质检、精液稀释和分装等多个环节。因此,要获得优质的精液产品,保证较高的的受胎率,必须加强每个环节的质量控制。这些控制措施对于猪常温精液质量的提高和稳定非常有益,也是进一步研究猪常温精液生产技术的重要基础。
《种猪常温精液》(GB23238-2009)国家标准对原精液品质的来源、外观、采精量、精子密度、精子活力、精子畸形率六个方面进行了强制规定,对常温精液产品从外观、剂量、精子活力、每剂量中直线前进运动精子数、精子畸形率、有效期六个方面也进行了强制规定。《猪常温精液生产与保存技术规范》(GB/T25172-2010)已于2011年1月1日起实施,其对原精液品质的判定标准除了《种猪常温精液》规定的六个方面外,增加了原精液细菌菌落数的要求,弥补了《种猪常温精液》的缺失。但两者在原精液和常温精液产品中对于精液有效期、精子活力、每剂量中直线前进运动精子数、总精子数、精子畸形率的规定存在差异。在实际生产中我们指导种公猪站要根据《猪常温精液生产与保存技术规范》指导生产,才能保证精液产品质量达到《种猪常温精液》规定的指标。
1原精液质量的控制
1.1加强种公猪的饲养管理
种公猪饲养管理的好坏直接关系到精液的品质,为了提高种公猪的性欲,生产出更加优质的精液,就必须对种公猪进行科学的饲养管理:①合理搭配日粮。喂给种公猪营养价值高的日粮,合理的饲养才能使公猪保持种用体况,体质结实,精力充沛,性欲旺盛,精液品质好。营养水平过高,可能会使公猪体内脂肪沉积过多,变得过于肥胖;营养水平太低,会使公猪体内脂肪和蛋白质损耗,变得过于消瘦。同时应注意维生素的供给,在种公猪采精期,饲料中应供给维生素A、维生素D、维生素E,烟酸、泛酸也是种公猪不可缺少的维生素。②饲料与饲喂技术。饲喂种公猪应定时定量,每次不要喂得过饱,体积不宜过大,应以精料为主,宜采用生干料或湿料,加喂适量的青绿多汁饲料,供给充足清洁的饮水。③加强运动。适度运动可促进代谢,增强种公猪的体质,提高精子活力。有条件的场,可进行驱赶运动,每天上下午各一次,每次1.5~2h;也可自由运动,在建猪舍时设运动场,使种公猪在户外进行运动和阳光浴。④适时调教、采精。最适宜的开采月龄,应根据品种和体重来确定。在一般正常的饲养管理条件下,公猪适宜的配种年龄和体重是:国内地方品种8~10月龄,体重60~90kg;良种杜、长、约公猪10~12月龄,体重达到120kg以上为宜。采精过早影响公猪本身的生长发育,缩短利用年限。⑤适宜的采精频率。2岁以上的成年公猪每周采精2~3次,青年公猪每周采精1~2次。
1.2提高原精液的品质
原精液品质包括采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率等。在生产过程中,应科学饲养认真选留优秀种公猪,并根据公猪精液检验结果,选留精液量大、精子密度高、精子活力强的公猪,及时淘汰30月龄以上各项生理机能开始退化,精液质量下降的公猪,可以有效提高原精液的质量。需要特别注意夏季热应激对种公猪原精液的影响,应及时调整日粮配方,添加维生素C、维生素E或清热消暑中草药等缓解种猪的热应激;采用湿帘降温或修建恒温猪舍;供给种猪充足的清洁凉水或井水;调整饲喂、运动时间;采精室安装空调等措施可以明显提高夏季种公猪精液的品质。另外在种公猪的防疫、治疗上应避免对精液品质造成影响,疫苗注射应分批、合理安排注射时间;一些药物如磺胺类药、伊维菌素等对精液品质都有影响,应尽量避免使用,尽量采用中草药来代替。
1.3注意采精环节的管理
在实际生产过程中采精环节处理不当,将对原精液的质量造成严重的影响,很多种公猪站都存在一些问题,应该注意以下几点:①采精室应干净、无尘、地面平整,便于冲洗和消毒,并铺设防滑垫,安装空调控制室内温度。②采精室应安装紫外线灯。③公猪采精前应清洁体表,腹部和包皮必须进行清洗、消毒,最后擦干。④手握法采精过程中应一只手带双层消毒手套,按摩公猪包皮后要脱去外层手套再紧握龟头采精。⑤公猪最初射出的少量精液约(5mL)要弃之不用。⑥集精杯在开采前要预热到37℃,杯口用过滤纸或四层消毒纱布进行精液过滤。⑦采精人员要树立无菌概念,采精前更衣换鞋,一切与精液接触的物品要严格消毒并与精液等温,尽量减少人为因素对原精液品质造成的影响。
2精液处理过程中的质量控制
2.1注重实验室卫生和环境
实验室要专人负责,保持地面、操作台面、仪器设备的清洁,设置更衣辅助区,进出必须更衣换鞋;实验室要安装空调控制室内温度在18℃~25℃,并安装紫外线灯消毒,安装窗帘防太阳光直射;精液传递窗口在精液传递后应及时关闭,有条件的应设置双层推拉门;根据生产实际需要将仪器设备依次摆放在精液检查、稀释、分装和洗涤区,以减少实验室卫生和环境对精液品质造成的影响。
2.2加强精液品质的鉴定
种公猪精液采集后要及时进行精液品质的检查、稀释和分装。精液品质的检查,主要包括外观气味、采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率和细菌菌落数的检查。生产中要严格进行每一项的检查,任何一项不合格则判定为不合格,应弃之不用。
2.2.1外观、气味的判定
用目测和鼻嗅的方法,正常的种公猪精液成均匀一致的乳白色并略带腥味。如果精液呈黄色、红色、带有脓性物、有异物或带有腥臭味都应废弃。
2.2.2采精量的判定
由于猪的精液量大,采用有刻度的量杯或量筒测量会产生较大的误差。实际生产中应用称量法计算采精量相对比较准确,将猪的精液的比重按照1g/cm3计算,则1g精液相当于1mL,采精量低于100mL时弃之不用。要求电子秤的精确度越高越好,每次使用电子秤时都应调整归零,以保证称量的准确性。
2.2.3精子活力的判定
取中层精液在200~400倍的显微镜下观察3个视野,每份精液应做2次检查,取平均值,精子活力低于70%的弃之不用。检查时显微镜载物台的载玻片和盖玻片要预热至37℃,以减少温度对精子活力判定的影响。与精液接触的移液器枪头使用前要用75%酒精棉球消毒晾干。
2.2.4精子密度的判定
采用精子密度仪或可见光分光光度计法测定,密度低于1亿/mL的弃之不用。在测定中应取精液中层进行检查,仪器应定期用血细胞计数板法进行校正,以保证精子密度判定的准确性。
2.2.5精子畸形率的判定
一般采用姬姆萨染色法进行染色,在400~600倍显微镜下观察每个抹片中精子不少于200个,并记录畸形精子数,记算精子畸形率,取两个抹片的平均值,超过20%的弃之不用。精子畸形率的检查每2个月抽检一次。在环境温度变化巨大、疾病治疗后或防疫后要加强检查,才能保证精液的品质。
2.2.6细菌菌落数的判定
精液中微生物的含量对精液的品质、保存及受胎效果有重要的影响,虽然《种猪常温精液》中没有对其进行规定,但在实际生产中应该按照《猪常温精液生产与保存技术规范》的要求进行检查。因此对精液细菌菌落数的检查非常必要,一般采用营养琼脂培养基进行培养,48h后观察培养平皿中的菌落数,超过1×103/mL时弃之不用。菌落数的检查每2个月抽检一次。通过定期测定精液中的细菌菌落,可以掌握种公猪的健康状况及采精过程中的每个环节的操作,只有减少细菌对精液的污染,才能有效地提高精液品质。
2.3做好精液的稀释和分装
2.3.1稀释液的配制
猪精液稀释液的配制一般种公猪站都使用商品稀释剂,但在实际生产中往往出现很多问题,如不用双重蒸馏水、称量不准确、隔天还用等。稀释液的配制应严格按照以下要求进行:①所用器皿干燥箱加热至160℃后恒温1h,自然冷却后待用。②要用新鲜的双重蒸馏水。③现用现配,一般使用前1h配置,配制后标明配置日期和时间。④稀释粉使用后应立即密封,以免灰尘、杂菌等污染,防止分解和潮解。⑤稀释粉和双重蒸馏水称量必须精确。⑥剩余稀释液密封后置于冰箱中冷藏时间不超过24h。
2.3.2精液的稀释操作
首先要准确计算应添加稀释液的量。应添加稀释液量=采精量×精子密度×每份剂量/41.7-采精量。(41.7的解释:《种猪常温精液》要求精子活力≥60%,每剂量中直线前精子数≥25亿,则每剂量总精子数≥41.7亿)同时要严格进行以下操作:①精液采集后应尽快稀释,放置时间不宜超过15min。②稀释液要先在35℃~37℃水浴锅中预热,根据精液温度调节,采用等温稀释,不得反向操作。③稀释时将稀释液沿杯壁缓慢加入到精液中,轻轻摇动或一个方向搅拌,混合均匀,防止机械性损伤精子。高倍稀释时,先低倍稀释(1∶1)~(1∶2),30s后再加入余下的稀释液。④精液稀释后应静置5min再做精子活力检查,活力不低于60%进行分装。
2.3.3精液的分装
应选用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料袋或瓶;每份80~100mL,分装后应密封;精液包装应标明产品名称、剂量、生产单位、生产日期、批号、品种或类型、耳号、有效期和贮存温度。
3精液产品保存过程中的质量控制
猪精子对低温很敏感,因此保存温度至关重要。精液分装后置于室温22℃~25℃下1~2h缓慢降温后,平放入17℃恒温箱内避光保存;也可用纱布(或干毛巾)包裹后直接放在17℃恒温箱内;稀释后的精液应能保存72h以上,在保存中每天摇动,防止精子因为沉淀而死亡;对于储存的常温精液产品应尽快用完,超过保质期的精液不应使用。
4及时进行精液产品的质量检验
猪常温精液产品的质量检验分为常规检验和型式检验。常规检验是型式检验的一部分,即单项目检验,主要检验项目是外观和精子活力,在生产批入库前和销售前的检验。型式检验是评定产品质量是否符合标准的检验,即全部项目检验,为保证精液产品质量每两周为一抽检周期。无论常规检验还是型式检验,任何一项检验未达标,都判定为不合格。
在实际生产中,销售前要由质检人员对精子活力再进行一次检验,活力低于60%的不能出售。除此之外,应每2周对精液产品的六项质量指标进行随机抽检。由于猪常温精液产品保存时间短、每头猪每天产量少,因此生产厂家只有及时进行产品质量检验,发现问题及时查找原因解决,才能保证生产出优质的精液产品。
总之,猪常温精液产品从生产到出售涉及许多环节,为生产出优质的精液产品,必须加强种公猪的饲养管理、实验室管理和质量检测等各个环节的质量控制,才能充分发挥种公猪的种用价值,保证猪品种改良工作的顺利进行。
(河南省许昌市畜牧技术推广站,倪俊娟)
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