2014年黑龙江省鸡西地区奶牛子宫内膜炎检测试验报告

朱二勇 殷丽霞 曲立春 尹春花 孙学良 鞠连民

黑龙江工业学院
黑龙江省鸡西市畜牧兽医局

    奶牛子宫内膜炎是引起奶牛不孕症的主要原因之一，在我国奶牛子宫内膜炎型不孕症，约占成年难孕奶牛的 17%以上［2］。 据报道，每年美国因奶牛不孕症造成的经济损失近 2.5 亿美元；而英国的报道表明，不孕牛中约有 95%是由子宫内膜炎引起的。 在我国奶牛子宫内膜炎的发病率也非常高， 瞿自明等在1983—1985 年对北京、上海、南宁、兰州等 16 个城市的 41 个奶牛场的 9 754 头适龄奶牛进行了调查，其中，有 1 684 头奶牛发生子宫内膜炎（17.26%），占不孕牛的 68.34%（1 684/2 464）；对我国东北地区奶牛场的调查表明患子宫内膜炎的奶牛约占奶牛疾病的20%～30%［3］。 由此可见，奶牛子宫内膜炎所造成的经济损失是相当严重的。该研究对黑龙江省鸡西地区部分奶牛场临床诊断为子宫内膜炎的奶牛，采集子宫分泌物并对其中主要病原菌进行了分离和鉴定，通过对常用抗菌药物的耐药性分析，以期为鸡西地区有效防治奶牛子宫内膜炎提供理论参考。

1材料与方法
1.1病料采集
从鸡西地区部分奶牛场选取临床诊断为子宫内膜炎的患牛 25 头，首先使用 0.01%的高锰酸钾水清洗奶牛外阴，无菌采集其子宫分泌物，接种于已灭菌的肉汤培养基中，尽快送实验室置于 37 ℃温箱中培养。
1.2细菌分离鉴定
挑取少量用肉汤培养基培养 24h 的菌液，在普通琼脂培养基上划线分离，置于 37 ℃温箱中培养 24 h。 再挑取单菌落分别在血平板、伊红美蓝、麦康凯培养基上划线分离、培养，并根据菌落形态、革兰氏染色等进行形态学鉴定［4］。 在此基础上，进行糖发酵试验、触酶试验、三糖铁试验等生化试验，鉴定各菌株。
1.3药敏试验
将分离鉴定出的大肠杆菌、葡萄球菌分别均匀涂布于普通琼脂培养基，链球菌均匀涂布于血清琼脂平板内，再用无菌镊子将头孢曲松钠、头孢噻呋钠、土霉素、阿米卡星、青霉素、氨苄青霉素、链霉素、环丙沙星和庆大霉素 9 种药敏纸片分别贴到平板上，37 ℃培养 24 h 后测量抑菌圈直径。

2结果与分析
2.1细菌分离鉴定结果
25 份病料中共分离得到细菌 39 株（见表 1），分别为大肠杆菌（43.59%，17/39）、葡萄球菌（33.33%，13/39）、链球菌（12.82%，5/39）和其他菌株（10.26%，4/39）。
2.2药敏试验结果
试验结果见表 2，大肠杆菌对头孢曲松钠和头孢噻呋钠最敏感，耐药率为 0；对环丙沙星、庆大霉素较敏感，耐药率为 11.8%和 11.8%；对阿米卡星、氨苄青霉素、土霉素不敏感，耐药率分别为52.9%、41.2%和 35.3%。 葡萄球菌对头孢曲松钠和头孢噻呋钠最敏感，耐药率都为 0；对庆大霉素较敏感，耐药率为 7.7%；对土霉素、链霉素、阿米卡星和环丙沙星不敏感， 耐药率分别为 53.8%、46.2%、30.8%和30.8%。 链球菌对头孢曲松钠、头孢噻呋钠、青霉素和庆大霉素最敏感，耐药率为 0；对氨苄青霉素、土霉素、阿米卡星和链霉素不敏感， 耐药率分别为 80.0%、80.0%、40.0%和 40.0%。

3讨论
     通过对 25 份样品分离鉴定得到 39 个菌株，以大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌 3 种致病菌为主导，约占89.7%， 说明引起鸡西地区奶牛子宫内膜炎的主要致病菌为大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌。 药敏试验结果表明，大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌都对头孢曲松钠和头孢噻呋钠非常敏感，对庆大霉素比较敏感，对其他药物敏感性不高或比较耐药，这与该类药物长期在奶牛场不合理使用有关。

4结论
①鸡西地区奶牛子宫内膜炎的主要致病菌是大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌。
②大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌都对头孢曲松钠和头孢噻呋钠非常敏感，对庆大霉素比较敏感。
③世界各国对奶牛子宫内膜炎的研究结果表明，导致该病发生的细菌多种多样， 其中以大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌这 3 种菌为主导，该研究支持这一结果。

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