猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）免疫效果监测

栗 新 安徽省裕安区动物疫情测报站

    猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种急性、烈性传染病，对养猪业危害极大，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的传染病。我国已把猪瘟归为一类传染病，列入强制免疫病种，疫苗由政府统一采购，免费供应。为提高免疫效果，针对基层防疫冷链系统尚不完善的现状，2012 年，裕安区春秋二季集中免疫，猪瘟疫苗全部选择使用安徽省统一招标采购的猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）。但该种新型疫苗在自然状态下的强制免疫效果到底如何，在春秋二季集中免疫之后，我们跟踪监测了50 个规模猪场和 380 个散养户仔猪血样 2140 份，具体情况报告如下。

1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　试剂及仪器　猪瘟抗体 ELISA 检测试剂盒（美国 IDEXX 公司，批号：43220--z431）；酶标仪（赛默飞世尔科技公司，Multiskan FC）；各种规格移液器，购自德国普兰德公司。
1.1.2　疫苗　猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源），
由安徽省统一招标采购。春免疫苗由 1 个疫苗厂家生产，简称 A 苗；秋免猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）有二部分组成，一是新采购疫苗，简称 B 苗，二是春免剩余部分的 A 苗，简称 C 苗，均在有效期内。
1.1.3　样品来源　在裕安区境内，随机采集 19个乡镇的 50 个规模猪场和 380 个散养户仔猪血样
2140 份，要求样品猪必须是免疫猪瘟耐热保护剂活疫苗 21 天之后的仔猪。
1.2　方法
1.2.1　疫苗免疫　按疫苗说明书要求，对猪瘟耐热保护剂活疫苗进行储存、运输和免疫注射。
1.2.2　样品采集　采取随机抽样方法，规模猪场以仔猪存栏量 10% 比例采集血清样品，每场不少于 15 份，散养户的猪按实际存栏数的 30% 采集血清样品，每户不超于 10 份。血样采集后及时进行常规血清分离，冷冻保存备用。
1.2.3　免疫抗体测定　待测样品采用阻断 ELISA法检测猪瘟免疫抗体水平，操作程序参照试剂盒说明书，样品阻断率≤ 30% 判为抗体阴性，30%~40%可疑，≥ 40% 判为抗体阳性。
1.2.4　离散度分析　离散度采用变异系数表示，一般 CV ≤ 40% 为群体抗体整齐度合格，CV ﹥40% 为群体抗体整齐度不合格。

2　结果
　　由表 1 可知：春防抽检猪瘟样品 1170 份，抗体阳性数为 788 份，阳性率为 67.3%。其中规模场抗体阳性率 79.8%，散户 56.3%；秋防抽检猪瘟样品 970 份，抗体阳性数为 670 份，阳性率为 69.1%。其中，抽检免疫 B 苗的抗体阳性率为70.1%（规模场 81.6%，散户 61.3%），C 苗的抗体阳性率为 65.8%（规模场 78.5%，散户 51.2%）。春防抗体离散度平均 37.5，其中规模场 25.5，散户48.2；秋防 B 苗接种的抗体离散度 31.4，其中规模场 28.4，散户 35.6；秋防 C 苗接种的抗体离散度41.5，其中规模场 42.1，散户 41.2。

3　分析与讨论
3.1　本次跟踪监测的免疫抗体阳性率﹝不考虑可疑样品中的阳性率﹞总体不高，平均只有 68.1%，根据农业部《2012 年国家动物疫病强制免疫计划》的规定，猪瘟抗体阻断 ELISA 检测试验抗体阳性判为合格，存栏猪抗体合格率≥ 70% 判为群体合格，可见监测的猪群猪瘟抗体总体不合格，但规模场均能达到合格标准要求。规模场免疫效果好于散户，其原因可能与规模场的饲养管理、防疫注射相对规范于散户有关。2012 年 9 月，笔者参与开展《不同厂家猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）免疫效果对比试验》，选择 3 个不同厂家生产的猪瘟耐热保护剂活疫苗，储存在 2 个不同温度 7 天，以 1倍或 2 倍不同剂量分别接种相同猪群结构的 120 头试验猪。试验结果显示 3 家疫苗抗体阳性平均值77.1%，好于本次常规免疫状态下监测结果。涂长春提出要避免猪瘟发生，猪瘟群体免疫保护率至少要达到 85% 的标准，按该标准要求，抽检的免疫抗体连有的规模场也达不到应有的保护水平，这就有可能出现疫苗虽打猪瘟照发的现象。
3.2　猪瘟耐热冻干保护剂活疫苗是应用新型有效的耐热冻干保护剂制造而成，按疫苗说明书介绍，可在 2℃ ~8℃条件下保存 24 个月，8℃ ~25℃保存10 天，病毒滴度无明显下降。现行的政府强免疫苗是由省统一采购，逐级发放到区乡动物防疫机构，最后由村级防疫人员领苗到户注射。据调查，新采购的 A、B 二种疫苗到户使用距离疫苗出厂期6 个月左右，C 和 A 疫苗是同批采购的相同规格疫苗，到户使用距离疫苗出厂期近 1 年时间，如果以传统的牛奶、蔗糖、明胶等做冻干疫苗保护剂，在2℃ ~8℃条件下，保存期只有 4~6 月，大多需要在 -15℃以下保存，要是这样的疫苗可能早就失去免疫作用，说明这种新型耐热冻干保护剂确实有作用。同时也看到 C 苗免疫抗体阳性率比 A 苗低，反映出疫苗储存时间与病毒滴度下降可能具有一定相关性，所以在实际免疫工作中，要尽可能使用近期出厂疫苗。
3.3　抗体离散度是衡量猪群免疫后抗体水平均匀度和整齐度的判定指标。本次抽检只有规模场使用 A、B 苗形成抗体离散度小于 40%，可视为群体抗体整齐度合格；但 C 苗和散户的抗体离散度均大于 40%。覃绍敏等认为，种猪群的猪瘟抗体离散度一般要求在 20% 以下，商品猪可放宽到25%。按该标准，所监测的猪群个体间猪瘟抗体水平差异偏大，都有发生猪瘟的可能。
3.4　阻断 ELISA 不能有效区分疫苗免疫和野毒感染， 故检测的抗体不能说明一定是疫苗免疫引起的，也有可能是野毒感染引起的。本文监测的数据只代表在现行强免常态下一定区域使用新型猪瘟耐热保护剂活疫苗免疫效果指标， 不能完全反映疫苗效果。猪瘟的免疫预防，不管是政府，还是养殖场，都十分重视，可以说 80% 以上猪群注射过兔化弱毒疫苗，但免疫效果并不理想，猪瘟时有发生，多以不典型症状出现，究其原因尽管多种，如疫苗质量、疫苗储存和运输温度、猪瘟持续感染、其他病原感染影响、母源抗体和免疫程序等，但笔者认为，提高疫苗质量，强化疫病监测，加强种猪疫病净化，及时淘汰猪瘟病原阳性猪，制定合理免疫程序对猪病控制至关重要。

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