抗生素的污染已经是一类新兴的环境污染，在过去的10年里已经被越来越多的关注。到目前为止，抗生素研究主要集中在欧洲、北美洲、澳大利亚的都市化城市。尽管一些研究曾在中国、日本和越南调查抗生素污染，但在亚太地区的信息仍然缺乏。这项研究主要在大肠杆菌，因为它已被证明是病原体分类中最敏感的细菌。

     2012年11月于黑龙江某鸡场采集新鲜堆粪，采样点布设覆盖所有堆放点。将装有粪样的样品袋放入泡沫箱，加入冰袋保鲜，于24h内进行相关实验。

     将营养肉汤培养管中的粪便样本稀释为10-2、10-3、10-4、10-5、10-6共5个梯度，用无菌接种环分别挑取菌液接种于麦康凯琼脂平板上，于37℃培养24h观察菌落的生长情况，待麦康凯琼脂平板上形成均匀的粉红色菌落后，挑取典型的单个菌落即大肠杆菌进行扩增培养，将所有菌株与甘油按9∶1保存于-80℃冰箱备用。

     抗生素药敏试验是在96孔微量滴定板进行。根据英国社会的抗菌化疗耐药性检测标准采用肉汤稀释法，在对数生长期结束的细菌接种到MH肉汤一系列抗生素浓度（0，0.25，0.5，1，2，4，8，16，32，64，128，256，512和1024μg/ml）。所有的程序都按照实验室标准协会（CLSI，2011）进行。

     所有的数据进行了统计分析，使用SPSS进行（Windows13版，SPSS公司，芝加哥，IL）。当一个显著的值（P＜0.05）是由单因子变异数分析得到的，进行进一步的分析。所有的数据表明正态分布，通过方差相等检验，之间的差异意味着显著差异。数据被表示为平均值±标准差。

     经MIC值测定，实验结果表明50株肠杆菌对18种抗生素均有不同程度耐药。所有肠杆菌对青霉素类、碳青霉稀类全部耐药；四环素、头孢霉素类、氨基糖苷类、第三代头孢菌素类、耐药率为90%以上，此外甘氨酰环素类、青霉素类、氨基糖苷类、脂肽类耐药率在80%～90%之间；第四代头孢菌素类、碳青霉稀类、氧头孢烯类耐药率在70%～80%之间；氨基糖苷类耐药率为16%；呋喃妥因耐药率较低为27.3%；喹诺酮类耐药率为2%。

     近年来，细菌耐药性问题已是抗感染治疗的主要威胁，合理使用抗菌药物以降低耐药性和采取有效措施控制其传播是非常重要的。此实验分离出50株大肠杆菌进行相关实验，使用18种临床常用抗生素进行药敏试验，MIC实验结果显示，耐药率超过50%的药物有3种；超过80%的药物有11种，耐药性非常严重。

     通过本研究为规模化鸡场临床合理使用抗生素提供了参考依据，同时也为鸡源性肠道细菌耐药性的分子流行病学调查提供了检测手段。为细菌的耐药变化趋势提供了理论依据，对规范临床合理使用抗菌药物具有重要意义，但抗生素耐药性等问题还需要一代甚至几代人继续不懈的努力研究下去。

（东北农业大学，周洪艳）