随着畜牧业向集约化和规模化方向发展，如何控制疾病的发生、保证动物健康成长是养殖者首要关注的问题。针对这个问题，抗生素曾经扮演了相当重要的角色，自1940年以来，抗生素在预防和治疗各种病原菌感染、促进动物生长、饲料养分利用、改善胴体组成和提高猪的瘦肉率以及促进畜牧生产的发展方面起到了巨大的作用。然而，随着食品安全问题的出现和人们生活水平的提高及人民健康饮食观念的转变，人民对绿色无公害畜产品的需求日益提高。因此，开发天然、绿色、无残留的饲料添加剂势在必行。

     本研究就复合益生素制剂进行试验，通过在断奶仔猪饲料中添加复合益生素，观察其对断奶仔猪的生产性能及免疫功能的影响。现将试验结果分享如下，以期对养殖户有所帮助。

     益欣元复合益生素制剂（主要成分：乳酸菌、芽孢菌等）。

     选用60头28±3d断奶体重接近的长×大二元杂交仔猪，断奶后继续饲喂14d乳猪料，然后更换仔猪料，预饲2d后正式开始试验。试验仔猪按体重、性别、窝别的原则随机分为2组，每组设30头猪。第一组为对照组，饲喂基础日粮；第二组在每吨基础日粮中添加1kg复合益生素制剂。基础日粮配方按照NRC（1998）猪饲养标准进行配制，配方见表1。

     试验在某公司猪场进行，试验仔猪于28日龄断奶，断奶后继续饲喂2周乳猪全价料，于42日龄更换仔猪全价料，预饲2d后，于44日龄正式开始试验，试验期28d。采用网床试验，饲养在半漏缝地板的猪舍，舍温保持在22~25℃，猪栏面积为2m×2m。采用自动喂料槽，乳头式饮水器。粉料喂食，自由采食和饮水。按猪场正常管理程序进行驱虫和免疫。

     试验开始（第0d）、14d和28d对仔猪个体空腹称重，计算平均日增重（ADG）；按重复统计给料量和剩料量，计算平均日采食量（ADFI）和耗料增重比（F/G）；连续收集试验结束前1周各重复的饲料样品，混合制备饲料样本，待测；连续收集试验结束前1周各重复的粪便样品，待测；在测试第28d清晨，前腔静脉采血10mL，分成2份，3000r/min离心，制备血清保存在-20℃，待测。

     粪便成分：粗蛋白、粗脂肪。

 

     生产性能指标：ADG、ADFI、F/G、营养物质消化率及腹泻频率。

     粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷分别参照中华人民共和国国家标准GB/T6432-1994、GB/T6433-2006、GB/T6436-2002和GB/T6437-2002推荐的方法测定；其中粗蛋白质采用凯氏定氮法进行测定，粗脂肪采用索氏浸提法进行测定，钙采用高锰酸钾滴定法进行测定，总磷采用矾铝酸铵比色法进行测定。

     试验结束前1周收集各重复的新鲜粪便，收集时间为每天8:00、17:00，然后从每次收集的粪便中分离出一部分，滴加10%的盐酸以固氮。收集完毕后，将粪样混匀，60~70℃烘干制成风干样本，用于测定粗蛋白质消化率。未滴加盐酸固氮的粪样用于测定粗脂肪的消化率。消化率测定采用内源指示剂法，指示剂用4N-HCL不溶性灰分。

     计算公式：某养分消化率/%=100-（a÷b）×（c÷d）×100（式中a代表饲料中酸不溶性灰分、b代表粪便中酸不溶性灰分、c代表粪样中某养分含量、d代表饲料中某养分含量）。

     试验开始5d后，连续观测记录15d各重复仔猪的腹泻情况，计算腹泻频率。

     计算公式：腹泻频率/%=腹泻头日数总和/（试验猪头数×试验天数）×100%（腹泻头日数是指每天有一头仔猪腹泻，为一个头日数）。

     应用SPSS模型进行单因素方差分析，结果表示为平均值±标准差（±SD）。

  

     由表2、3可以看出，第二组14d增重比第一组提高了4.74%，差异显著（P＜0.05）,第二组末重比第一组提高了4%（P＜0.05）。在试验0~14d期间，第二组平均日增重比第一组提高了4.71%（P＜0.05）；14~28d期间，第二组平均日增重比第一组提高了4.99%（P＜0.05）；试验全期，即0~28d，第二组平均日增重比第一组提高了5.80%（P＜0.05）。

     

     由表4可以看出，在平均采食量方面，0~14d期间，第二组与第一组差异均不显著；14~28d期间，第二组比第一组提高了1.48%（P＞0.05）；试验全期（0~28d），第二组与第一组之间差异显著（P＜0.05），平均日采食量提高了2.06%。

     

     由表5可以看出，粗蛋白质消化率第二组比第一组提高3.16%（P＜0.05）；粗脂肪消化率第二组比第一组提高1.53%，但没有达到统计学显著水平P＜0.05。

      

     由表6可以看出，第二组腹泻频率比第一组下降了23.08%，差异显著（P＜0.05）。

     测定猪瘟、伪狂犬病、圆环病毒抗体水平，均采用ELISA检测方法。

     1）复合益生素对仔猪猪瘟抗体水平的影响，见表7。

      

     猪瘟抗体水平分别在28d、72d前腔静脉采血，分离血清，测定抗体。

     2）复合益生素对仔猪猪伪狂犬抗体水平的影响，见表8。

   

     伪狂犬抗体水平分别在28d、70d（二次免疫后天5d）前腔静脉采血，分离血清，测定抗体。

     3）复合益生素对仔猪猪圆环病毒抗体水平的影响，见表9。

       

     猪圆环病毒抗体水平分别在12d、54d（免疫后40d）前腔静脉采血，分离血清，测定抗体。

     实验中ELISA试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司，判定标准如下。

     猪瘟：样品OD630值≥0.35，判定为阳性；样品OD630值＜0.35，判断为阴性。

     猪伪狂犬病：S（样品OD630值）/N（阴性对照OD630值）≤0.6，样品为阳性；S/N值介于0.6到0.7之间疑似；S/N值＞0.7判定为阴性。

     猪圆环病毒2型：样品OD630值≥0.35，判定为阳性；样品OD630值＜0.35，判定为阴性。

     根据表7~9检测结果结合以上判定原则，第二组猪瘟、猪伪狂病犬病、猪圆环病毒2型抗体水平与第一组相比均有显著提高（P＜0.05）。

     乳酸菌类益生菌产品可以发酵糖类产生乳酸，激活内源酶活性，降低动物肠道pH，从而抑制病原菌的繁殖，还可以产生溶菌酶、抗生素等物质，杀灭动物胃肠道的病原菌，从而净化动物胃肠道环境，增强动物对营养物质的吸收功能，提高养殖动物的生产性能。

     仔猪免疫力获得提高的机制是仔猪在食入复合益生菌后，肠道菌群发生了变化，肠道微生物系统处于最佳平衡状态，使肠黏膜内相关的淋巴组织发生活化，可诱导T、B淋巴细胞和巨噬细胞产生细胞因子，增强非特异性免疫系统的活性，有效提高动物的免疫力。

     本研究表明，复合益生素在提高仔猪消化率、生长速度，降低腹泻发生率等方面有明显的改善作用。同时，能够有效地提高猪瘟、伪狂犬病及圆环病毒2型的抗体水平，从而增强猪的免疫功能和抗病能力，降低发病率，减少抗生素的使用量，最终降低养殖成本。

（河南省许昌县 李志红；欧科拜克生物技术 廖建伟）