鸡传染性贫血对生产鸡群的免疫抑制影响试验研究

    鸡传染性贫血是我国近年来养禽生产中较为多发的一种免疫抑制性疾病，其致病原为鸡传染性贫血病毒（Ｃｈｉｃｋｅｎ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ａｎｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ），以鸡再生障碍性贫血和淋巴组织萎缩为主要病理特征。当鸡受到ＣＩＡＶ感染后，ＣＩＡＶ对Ｔ细胞的损害会影响细胞因子和辅助性Ｔ细胞的作用以及对体液免疫和局部黏膜免疫功能的降低，从而影响整个免疫调控系统的协调作用，引起机体的免疫抑制；在感染期间如继发其它细菌或病毒感染，会加速患病鸡群的死亡。在２００８～２０１１年间，我们运用间接ＥＬＩＳＡ检测诊断技术对贵州部分感染疑似病例进行了血清学特异性诊断和流行病学调查实验研究，其阳性率依次为肉用种鸡５０．９％、蛋用种鸡４５．２％、商品蛋鸡３４．３％、商品肉鸡２６．１％、地方土鸡５．６％，即以肉用种鸡感染率最高，地方土鸡感染率较低。为了解ＣＩＡＶ对感染阳性生产鸡群在禽流感、新城疫等主要疫病的常规免疫过程中产生的免疫抑制影响，我们运用ＨＩ试验对部分ＣＩＡＶ感染阳性鸡群进行了禽流感、鸡新城疫的阶段性免疫抗体水平监测，通过对其群体免疫抗体滴度的高低、均匀度等方面的情况进行科学评估，有针对性地建立免疫补种强化措施，这对提高禽群的饲养管理水平和搞好疫病防控具有重要的生产指导意义。

１　材料与方法
１．１　试验材料
　　待检血清样本按２∶１００采自２个ＣＩＡＶ感染阳性和１个阴性对照生产鸡群；禽流感病毒Ｈ５亚型血凝抑制抗原、鸡新城疫血凝抑制抗原（生产批号：２０１１２１００９）和标准阳性血清由青岛易邦生物工程有限公司提供；ＥＬＩＳＡ检测试剂盒为美国ＩＤＥＸＸ公司生产，购自北京爱德士生物科技有限公司，生产批号：０９７３６—ＧＤ５４５；ＰＢＳ液及相关实验器材由贵州省畜牧兽医研究所畜禽疫病研究室制备提供。
１．２　试验内容及方法
１．２．１　试验鸡群的选择及要求：（１）试验鸡群均分别在５～７日龄、２１～２２日龄按常规要求免疫鸡新城疫ｌａｓｏｔａＨ　１２０和ｌａｓｏｔａＨ　５２；在１６～１８日龄注射禽流感Ｈ５亚型灭活疫苗。（２）待检血清样本采自经ＥＬＩＳＡ检测为ＣＩＡＶ感染阳性和阴性参照鸡群。
１．２．２　分别在４２～４７日龄对３个经鸡新城疫、禽流感Ｈ　５亚型常规免疫后的试验鸡群按２∶１００随机翅静脉采血，注入离心管内，约４５°倾斜静置，在常温下待血清析出后，以３　０００ｒ／ｍｉｎ离心制备血清。
１．２．３　试验方法及步骤：鸡新城ＨＩ试验参照《新城疫检测技术规范》（ＧＢ／Ｔ１６５５０－１９９６）ＨＩ试验技术进行；鸡禽流感ＨＩ试验按照农业部《高致病性禽流感诊断技术》（ＧＢ／Ｔ１８９３６－２００３）ＨＩ试验技术进行。利用ＳＰＳＳ　１３．０统计学软件进行方差分
析，数据以平均数±标准差表示。
１．２．４　ＨＩ试验分组：根据ＣＩＡＶ　ＥＬＩＳＡ血清阳性抗体检测结果，共设３个试验组，将Ⅰ、Ⅱ组ＣＩＡＶ感染阳性鸡群作为试验组，Ⅲ组为参照组。

２　试验结果
　　表１结果显示，试验Ⅰ、Ⅱ组ＣＩＡＶ的感染阳性率分别为３８．０％和２６．７％，试验Ⅲ组为阴性。表２结果显示，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鸡新城疫的血凝效价分别为５．６０±０．５２、７．３０±０．６７和１１．７０±０．７３，禽流感Ｈ　５亚型的血凝效价分别为４．１０±０．７９、５．９０±０．８４和９．２０±０．６４。表明试验Ⅰ、Ⅱ组鸡新城疫和禽流感Ｈ５亚型的免疫效价较低，且个体间抗体效价差异极显著。

３　分析与讨论
３．１　本试验选择的Ⅰ、Ⅱ组试验鸡群均为４５日龄左右的ＣＩＡＶ早期感染鸡群，分别进行了２次鸡新城疫ｌａｓｏｔａ疫苗和１次禽流感Ｈ５亚型灭活苗免疫，ＨＩ试验结果表明，其鸡新城疫和禽流感免疫效价平均值均未能达到免疫保护要求，且群组个体之间差异显著，与实验参照组差别较大。表明ＣＩＡＶ病毒对感染鸡群在鸡新城疫、禽流感等疫病的常规免疫中能够造成明显的免疫抑制，致使免疫抗体滴度较低或个体间抗体效价差异较大，使鸡群不能获得足够的免疫保护。

３．２　经卵广泛垂直传播是ＣＩＡＶ的主要流行途径，因此，祖代或父母代种鸡饲养场应加强对种群的ＣＩＡＶ疫病净化投入或ＣＩＡＶ的强化免疫接种，避免ＣＩＡＶ经商品代鸡的大量流通而广泛传播。

３．3　对早期感染ＣＩＡＶ的鸡群要加强饲养管理，提高禽群的抗病能力，减少ＣＩＡＶ和其它相关继发性疾病发生的机会。有条件的养殖企业要定期对鸡新城疫、禽流感等主要疫病的免疫抗体实施监测，根据其免疫抗体效价水平制定相应的免疫补种计划或增大免疫密度，以降低新城疫、禽流感等疫病在生产中不断“再现”的潜在风险。

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