两种猪瘟疫苗免疫效果对比实验

郑教雀 福建省宁德市动物疫病预防控制中心

    我国预防、 控制猪瘟实行以疫苗免疫为主的综合防制方针， 在预防过程中， 安全高效的猪瘟疫苗是免疫成败的关键。目前，市场上猪瘟疫苗主要有 3种， 分别为细胞苗、 组织苗、 脾淋苗 不同疫苗的免疫效果存在差异， 因此， 选用何种猪瘟疫苗与猪瘟的防控有密切关系。
    为比较不同厂家猪瘟疫苗的免疫效果， 笔者于2013 年 4—8 月对两个厂家生产的猪瘟疫苗进行了效果对比试验，旨在为该猪场选定适合使用的疫苗种类， 并为该场制定最佳免疫程序提供科学依据， 同时也为临床疫苗的使用提供参考。

1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1试验动物
从某小型猪场随机挑选出同一批次、 品种、 来源相同的 30～35 日龄健康仔猪 36 头。
1.1.2猪瘟疫苗
猪瘟脾淋苗 A （由福州某生物制品公司生产， 批号： 20121121 ） ， 猪瘟细胞苗 B （由山东某动物保健品公司生产， 批号： 20121218 ） 。
1.1.3检测试剂
猪瘟正向间接血凝抗原，由中国农业科学院兰州兽医研究所生产。
1.1.4主要设备
SW-CJ 净化工作台、 高速台式冷冻离心机、 96 孔 V 型血凝板、 电热恒温培养箱、 可调微量移液器。
1.2试验方法
1.2.1猪群分组
将 36 头健康仔猪随机分成猪瘟脾淋苗组和猪瘟细胞苗组， 每组 18 头。为便于不同猪只在采血、 记录时容易区分， 于每头猪耳朵上按顺序打上耳标。
1.2.2免疫程序
采用颈部肌肉注射方法免疫， 35日龄时进行免疫 （猪瘟脾淋苗组接种疫苗 A， 猪瘟细胞苗组接种疫苗 B ） ， 免疫剂量均为 1 mL/头。
1.2.3采集血清
35 日龄首免前采 1 次血， 免疫后分别于 50 日龄、 65 日龄各采血 1 次。 每次采血后于12 000 r/min 离心 2 min， 分离出血清， 放置 4 ℃冰箱中保存待检。
1.2.4抗体检测
抗体效价用正向间接血凝试验法检测。在 96 孔 V 型血凝板上将被检血清用稀释液作倍比稀释， 同时设阴、 阳性对照， 每孔加 50 μL 血清， 再每孔加入 25 μL 猪瘟正向间接血凝抗原， 将血凝板置于微量振荡器上振荡 1 min， 盖上薄膜， 放置37℃静置 1.5~2 h 后， 判定结果
1.2.5判定标准
当抗体效价≥1∶24时，为抗体阳性， 表示免疫合格； 当抗体效价＜1∶24时， 为抗体阴性， 表示免疫不合格。

2结果与分析
2.1应激反应
    疫苗免疫注射后， 对两组猪进行观察和记录， 第1天每 6 h 观察 1 次， 第 2 天每 8 h 观察 1 次， 结果两组均出现了不同程度的应激反应。猪瘟脾淋苗组6头出现应激反应， 其中 1 头反应较大， 表现为局部红肿、 体温升高、 出现震颤； 另外 2 头表现为局部红肿、 体温升高； 剩下 3 头仅出现局部红肿猪瘟细胞苗组有 2 头出现应激反应，其中 1 头表现为体温升高、 局部红肿； 另外 1 头仅出现红肿现象。所有出现应激反应的猪只均出现轻度食欲不振，两组都未造成猪只死亡。具体情况见表 1。
   上述结果表明， 注射猪瘟脾淋苗产生的免疫应激高于注射猪瘟细胞苗。 若出现的免疫应激反应较严重时， 应该及时抢救， 否则严重者将会造成猪只死亡。
2.2抗体合格情况
    疫苗免疫前 35 日龄和免疫后 50、 65 日龄， 猪瘟脾淋苗组分别有 4、 15 和 13 头抗体合格，抗体合格率分别为 22.2％、 83.3％和 72.2％；猪瘟细胞苗组分别有 5、 12 和 10 头抗体合格，抗体合格率分别为27.8％、 66.7％和 55.6％ （表 2 ） 。由表 2 可以看出，免疫前虽然猪瘟脾淋苗组的合格率较猪瘟细胞苗组低， 但在免疫后 15 d 猪瘟脾淋苗组抗体合格率迅速达到 83.3%，而猪瘟细胞苗组增长则不如猪瘟脾淋苗组，仅为 66.7%；在免疫30 d 后两组抗体合格率均有所下降， 但猪瘟脾淋苗组合格率仍大于猪瘟细胞苗组。猪瘟脾淋苗组抗体合格率自免疫后都大于猪瘟细胞苗组，可见脾淋苗免疫效果比细胞苗免疫效果好。
2.3抗体水平
    试验猪只分别于35、50、65日龄采血、分离血清，采用猪瘟正向间接血凝试验方法监测猪瘟抗体效价。 由表 3 可知， 疫苗免疫前两组的抗体效价水平都为22.44；50日龄时猪瘟脾淋苗组为26.50、猪瘟细胞苗组为 24.94；65日龄时两组的效价水平分别为25.94和24.50。
    表3的数据表明，试验猪只在 35 日龄疫苗免疫前两组猪瘟母源抗体均值无差异， 可知母源抗体对该试验产生影响较小。免疫猪瘟脾淋苗 A 产生的抗体效价高于免疫猪瘟细胞苗 B 所产生的抗体效价，免疫 15 d 后 A 苗所产生抗体的平均效价是 B苗的 21.56倍，表明猪瘟脾淋苗组免疫效果明显优于猪瘟细胞苗组。由此进一步证明了脾淋苗免疫效果比细胞苗免疫效果好。

3小结与讨论
    试验结果表明，猪瘟脾淋苗免疫抗体合格率较高、免疫效果较好， 但出现的应激反应较重； 猪瘟细胞苗虽然应激反应小，但免疫效果不如脾淋苗。当免疫后猪只应激反应严重时应及时采取措施，立即进行脱敏治疗。具体做法： ①地塞米松， 每 10 kg 体重 1 mg， 肌肉注射， 每日 1 次， 连用 2 d； ②迅速皮下注射 0.1%盐酸肾上腺素 1 mL，如 20 min 内症状没有缓解， 可重复同剂量再注射 1 次； ③对症治疗， 配合强力解毒敏、盐酸异丙嗪或静脉注射 5%葡萄糖和维生素 C。
通过对比试验，准确掌握了两种疫苗各自的优缺点， 为制定合理的免疫程序提供科学依据， 能够更好地预防猪瘟的发生与流行。

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