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禽白血病控制和净化计划的优化与评估

报告人：何辉北京爱德士元亨生物科技有限公司

禽白血病的发生，对我国家禽产业造成了严重的经济影响。一般情况下，禽白血病可造成成年鸡死亡率和肿瘤增加、产蛋下降及饲料消耗上升；造成青年鸡群体均匀度下降、体重下降、死亡率和饲料消耗上升；育种群感染会影响商品雏鸡质量，导致客户满意度下降，或发生相关投诉或诉讼； SPF鸡感染会造成疫苗污染，带来的风险更为严峻。因此，开展禽白血病净化工作显得尤为迫切和重要。

1世界重要育种公司J亚群禽白血病的净化
从1988年开始，就有育种公司开始开展禽白血病净化工作，由于最初没有很好的净化方法，净化工作进展缓慢，直到2000年左右开始有公司完成净化工作。之后，随着禽白血病检测试剂盒的开发和科技进步，完成净化所需时间越来越短。

2禽白血病的主要传染方式
禽白血病主要通过以下几个途径进行传播，即通过生殖道（体细胞）发生的先天传播；通过遗传性（种系）发生的垂直传播；通过紧密接触（分泌物、排泄物、血液）发生的水平传播；通过污染疫苗发生的外源性传播。

3禽白血病在不同性别鸡群的传播和感染率
通过对感染禽白血病病毒的228只平养公鸡和228只平养母鸡群体不加控制，定期进行禽白血病检测，检测结果呈现以下特点：开始几周阳性率很低， 6~9周龄达到高峰，最高阳性率达50%，之后开始下降并保持在一定水平。因此，无论是从兽医角度还是育种角度出发，对禽白血病的检测控制都越早越好。因为， 12周龄以后内源性病毒开始表达，后期的检测结果越来越难以解释。后期禽白血病阳性率的降低，并非病毒被杀死，而是病毒刺激机体产生抗体并中和一定比例的病毒。

4禽白血病的检测方法
禽白血病检测主要有3种方法，即通过胎粪、泄殖腔或阴道拭子、蛋清和病毒培养物进行抗原捕获ELISA检测； A、 B亚群和J亚群ELISA抗体检测；病毒分离检测。
4.1抗原捕获ELISA在胎粪检测上的应用
该方法具有实用（在孵化室即可快速得到结果）、有效（可作为快速降低ALV感染的基础）、廉价（费用大大低于病毒分离）、易于操作（实验室人员不难培训，容易获得技术支持）等优点。在检测中，假阳性可通过重新检测解决，假阴性可通过小群孵化进一步排除。由于在孵化时内源性禽白血病病毒表达较少，检测结果不需太多解释。利用该方法，如净化有效，可使阳性率降到1%以下。
4.2抗原捕获ELISA在蛋清检测上的应用
该方法也具有有效、实用、廉价、易于操作等优点。但检测时需了解每个遗传系和鸡群年龄范围的基准线。由于内源性病毒特异性抗原的存在，慢羽品系和一些快羽品系可能产生大量假阳性结果。因此，必须在蛋清特异性抗原基准线建立后对检测方法做相应的内部修正。对检测结果需做进一步解释，可通过病毒分离进行支持。对于蛋清的选择，有研究结果表明内层的稠蛋清病毒含量可能更高，但从可操作性方面，外层稀蛋清更易于实验室操作处理。

5净化原则
主要包括以下几项原则：早期检测，越早检测越容易对检测结果进行解释；进行多次检测，一次检测结果难以分辨内源性病毒和外源性病毒；病毒分离是金标准； p27抗原的ELISA检测是所有计划的核心，因为所有的ALV都具有相同的p27抗原。

6美国对禽白血病进行根除的执行方案
①1 日龄进行胎粪抗原捕获 ELISA 检测；
②选育日龄开展病毒分离或者使用拭子进行抗原捕获ELISA （10周龄之前）；
③开产前进行病毒分离；
④开产初期，进行抗原捕获ELISA检测或病毒分离检测；
⑤利用开产最初的2~3个蛋进行蛋清抗原捕获ELISA检测，由于最初3个蛋一般不入孵，可节约生产成本；
⑥产蛋中期进行拭子或蛋清抗原捕获ELISA检测。

7净化管理
对开展净化的种群进行小群孵化，雏鸡进行胎粪抗原捕获ELISA检测p27抗原，对检出阳性个体的进行整群淘汰。出雏后进行小群饲养，饲养过程中至少进行2次病毒分离检测，对检测出现阳性的家系不进行繁育后代。此外还要实施严格的生物安全措施，尤其要加强鞋、野鸟以及人工授精等的管理。

8净化验证系统
验证程序包括以下几步：对所有死亡鸡只进行剖检；对可疑鸡只通过病毒分离进行复检；对可疑后代的父母代通过病毒分离进行复检；取可疑鸡只的脾脏进行PCR检测；进行DNA测序。

9净化进展评估方法
无论哪一种检测程序都要建立相应的基准线；需采用一致的采样日龄、样品类型和检测方法；对比正在进行的和计划开始时的数据；在遗传品系、遗传水平内和遗传水平之间进行对比。如果净化工作开展顺利，胎粪检测阳性率可迅速降至2%以下，病毒分离检测阳性率在1~2年内降至5%以内、 2~3年内降至2%以下，鸡群死亡率降低，极少发生肿瘤性疾病。

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