猪传染性肠胃炎的非结构蛋白
顾江萍 上海交通大学
畜牧兽医研究了解到3种非结构蛋白分别由ORF1、ORF3及ORF7编码。过去对TGEV的非结构蛋白的了解比较少,直到确定ORF1编码病毒的聚合酶后才对其非结构蛋白有所认识。ORF1a编码产物中有2个类木瓜蛋白酶区,1个类3C蛋白酶区和1个类生长因子和受体区。在类3C蛋白酶区两侧各有1个明显的疏水区。ORF1b编码产物中有金属离子结合区和解旋酶区。在伯尔尼(Berne)病毒、动脉炎病毒及TGEV、鼠肝炎病毒(MHV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、人冠状病毒(HCV229E)中,聚合酶区、金属离子结合区、解旋酶区及ORF多肽的羧基端都具有明显的保守性。
HegyiA等研究发现在ORF1产物中存在有14个类3C蛋白酶切位点,它们集中于ORFla多肽(7个)和ORFlb多肽(5个)的羧基端。基因3位于S和sM蛋白基因之间,有ORF3a和ORF3b两个阅读框。Wood等研究发现ORF3a在TGEV的某些小蚀斑(SP)变异株和猪呼吸道冠状病毒(PRCV)中缺失,研究表明ORF3a不是病毒复制所必需的,但这种缺失可能影响病毒毒力和组织嗜性,并且由mRNA3翻译的多肽可能参与了病毒吸附细胞的过程。ORF3b是分子量为27.7KD的非结构蛋白。目前虽然己经从体外翻译mRNA3得到ORF3b编码的多肽,但是在感染细胞中还未成功的检测到mRNA3的转译产物。在TGEV感染的细胞中检测到了ORF7编码的分子量为14KD的HP蛋白,该蛋白在感染中最终定位于细胞核,其进入细胞核的作用可能是TGEV克服宿主抵抗,而不是在细胞培养中病毒复制及其子代病毒所必需的。
OrtegoJ.等通过反向遗传技术构建缺失ORF7的重组传染性胃肠炎病毒(rTGEV-△7)cDNA,将其转染细胞后,发现重组病毒在细胞培养物上的繁殖效率与野生型病毒毒株相同,而且也很稳定,但将rTGEV-△7接种于仔猪后,病毒在肠道和肺中的复制能力明显减少,致病性也降低,这说明ORF7是病毒繁殖的非必需基因,同时该基因可能影响病毒的致病性。
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