其他具免疫保护作用的蛋白
张静 上海交通大学
三磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）具有多种生物学活性，参与糖酵解等多种生化反应，通常存在于细菌的胞浆内；作为细菌表面蛋白，可吸附纤维蛋白酶、纤连蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白等宿主蛋白。目前，已证实化脓链球菌（S.pyogenes）、无乳链球菌（S.agalactiae）、肺炎链球菌（S.pneumoniae）的表面天然存在 GAPDH。SS2表面存在 GAPDH，且具有粘附活性，对细菌的感染和入侵有重要作用。
二氢硫辛酰胺脱氢酶（Dihydrolipoamide dehydrogenase, DLDH）又称硫辛酰胺脱氢酶或二氢硫辛酸脱氢酶，属于 pyridine nucleotide disulfide oxdoreductasefamily，这个家族还包括谷胱甘肽还原酶，汞还原酶，硫氧还蛋白和锥虫胱甘肽还原酶。该生物催化剂早期从猪心肌中提取，产品又呈现为黄绿色的荧光蛋白质，故被称为心肌黄酶。本文中，猪链球菌的二氢硫辛酰胺脱氢酶最早由张炜等于 2007 年利用免疫蛋白质组学的方法鉴定出，故依据其文中名称，称此蛋白为 HM6。
多种真核生物和原核生物的二氢硫辛酰胺脱氢酶已被分离得到，原核生物中大肠杆菌是研究较多的，在真核生物中包括酵母和哺乳动物的均被广泛研究，其中，猪心的二氢硫辛酰胺脱氢酶是研究最深入的酶。在临床上，鉴于二氢硫辛酰胺脱氢酶是一种重要的生物还原剂，参与生物还原剂类药物的活化并对其毒性挥发是非常关键的，因此，二氢硫辛酰胺脱氢酶的酶活性方面的应用备受关注。
此外，二氢硫辛酰胺脱氢酶还具有较强的免疫原性。在脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）中，DLDH 被推测具有运输糖类的功能，且被检测出具很高免疫原性。
纤连蛋白/纤连蛋白结合蛋白(Fibronectin-and-fibrinogen-bining protein, FBP)存在于所有的 SS 血清型中（除了 32 及 34 型），且在 SS2 强毒株、弱毒株和无毒株中同时存在。该蛋白位于细菌表面，大小为 63kDa，它与格登链球菌（streptococcus gordonii）fbps 及化脓链球菌 fbp54 同源。FBP 作为免疫保护性抗原在其他革兰氏阳性菌中已有广泛研究。贺宽军等的研究证实，金黄色葡萄球菌中的 FBP 是一种重要的抗原，在金黄色葡萄球菌亚单位疫苗研制中占有重要地位。2002 年 de Greeff A 等将 SS2 FBPS 的完整基因 fbps 转入大肠杆菌质粒中进行表达，表达产物经提纯复性后每次取 50 ug 蛋白免疫兔子，3 次免疫后收集血清进行免疫检测，可以检测到 FBPS 抗体的存在，证明 SS2 的纤粘蛋白有很好的免疫原性，其基因可用于基因工程疫苗的构建。刘丽娜等应用反向疫苗学的原理，探讨研制 SS2 组分疫苗的可行性，其根据 SS2 全基因组序列和功能注释的结果，通过生物信息学方法进行全面分析与预测，选定包括 FBP 在内的 25 个抗原候选分子。以 SS2 人源分离株 05ZYH33 为模板，克隆 1700bp 的 fbp基因，表达纯化 FBP 蛋白，研究其免疫学活性，结果显示，重组 FBP 能与感染SS2 的人血清发生特异性结合，具有较好的免疫反应原性。
猪链球菌谷氨酸脱氢酶（glutamate dehydrogenase, GDH）的核酸序列分析表明，它包括一个开放性阅读框，编码 448 个氨基酸残基，分子量为 48.8kDa。核酸杂交结果表明 GDH 基因在所有 SS2 内是保守的，将这段基因克隆表达，提纯融合蛋白制备的多抗能与其他分离株中分子量相同的蛋白反应，说明此基因表达的蛋白具有免疫原性。在麻风杆菌、嗜肺军团菌等病原菌中，热休克蛋白 GroEL具有强烈的免疫反应性，也是主要的免疫原，葛君克隆表达 SS2 四川分离株 SC-19 的 5 个热休克蛋白基因 GroEL、Dnak、GrpE、Hsp33、GroEs，并研究了 GroEL(hsp60)、Dnak(hsp70)表达蛋白对小鼠的免疫保护作用，相对保护率为分别 25.5%、12.5%，对小鼠并无有效的保护力。
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