猪卵母细胞体外成熟抑制剂使用存在的问题
鲍建昌 西北农林科技大学
在 IVM 过程中添加抑制剂能够提高卵母细胞的质量及胚胎的发育能力,但也有畜牧研究人员指出,抑制剂的添加并不影响卵母细胞的成熟,甚至对卵母细胞的成熟有副作用,能显著降低卵母细胞成熟的质量及胚胎发育能力。
造成这种结果的因素很多,很可能抑制剂的添加量和抑制剂的作用机理不甚明了有关。在体内发育过程中,卵母细胞的成熟受到很多复杂的调控影响才具备发育成健康个体的能力,其中很多调控机制我们还不了解,仅仅靠添加某一种抑制剂很难实现与体内发育相同的结果。并且,目前我们还不能完全模拟卵母细胞体内成熟所处的环境,体外培养环境也可能是造成卵母细胞成熟质量的原因。
由于卵母细胞体内成熟的调控机制错综复杂,其 GVBD 等的发生不仅仅靠一种或少数几种因子调控。并且某些抑制剂的作用靶点及详细的作用机理不甚明了,因此盲目地使用一些抑制剂可能会抑制卵母细胞成熟的一些必须通路,导致级联反应造成非预期的抑制损害。因此,抑制剂的选择也是成熟抑制过程中存在的一个问题。并且,卵母细胞体内发育可能受多种抑制剂作用,所以,在体外培养过程中,多种抑制剂的联合使用或许能起到较好的抑制作用。抑制剂的组合使用也是一个需研究的问题。
抑制剂的添加量是目前抑制剂使用的一个问题,低浓度的抑制剂对卵母细胞的成熟抑制没有显著影响,但高浓度的抑制剂可能导致大量的卵母细胞退化死亡。因此筛选出一个合适的浓度来作用于卵母细胞体外成熟是目前存在的一个问题。抑制剂的添加时间,添加方式的选择也影响着卵母细胞成熟的质量及胚胎发育的能力。目前,猪卵母细胞体外成熟时抑制剂的添加时间多为 20h 左右,然后撤去再培养 24~36h。这主要是根据,卵母细胞在体外发育时 GVBD 发生的时间来确定的。但是目前获得的 GVBD 发生的时间是根据体外成熟培养经验获得的,并不是体内发与卵母细胞真实的时间。因此确定合适的抑制时间,也是提高抑制剂效率的关键。
猪卵母细胞体外成熟抑制剂的使用还存在很多问题,需要进行进一步的研究,来深入了解卵母细胞成熟机理和抑制剂的作用机理,提高体外成熟卵母细胞的质量。
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