嗜血支原体感染后的鉴别方式
崔成哲 延边大学
嗜血支原体的易感动物很多,包括多种哺乳动物中的啮齿类动物和反刍兽等,是畜牧养殖中常见的疾病之一。以往学者在进行嗜血支原体的感染性试验时,多采用血液涂片染色镜检和血液直接镜检,而由于各种嗜血支原体的形态十分相似,应用这些方法根本无法区分出动物所感染嗜血支原体的种属,试验的准确性不高。
应用分子生物学手段,尤其是DNA测序分析,是近年来进行病原诊断、鉴定、分类和研究种间近缘关系的常用方法。2006年于龙政〔叫根据GenBank中猪嗜血支原体 165rRNA基因序列设计了一对引物,并利用一该对特异引物建立了猪嗜血支原体病的PCR诊断方法。特异性和敏感性试验结果表明,该诊断序列不能扩增出弓形虫、链球菌、沙门氏杆菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌DNA和猪瘟病毒cDNA;当样本中猪嗜血支原体DNA含量为 56.25飞小L时,仍可扩增出清晰可辨的条带。本研究除应用传统检测法外,还应用PCR方法成功地从感染东方香猪体内扩增出猪嗜血支原体基因片断。结果表明,感染东方香猪体内的嗜血支原体基因序列与感染所用的猪嗜血支原体基因序列大小一致,证明东方香猪感染的嗜血支原体为猪嗜血支原体,提高了试验的准确性。
在应用分子生物学方法检测的同时,本研究还应用F坦SA方法对感染东方香猪进行猪嗜血支原体抗体检测。结果表明,感染猪嗜血支原体的东方香猪均呈阳性反应。此外,通过对感染东方香猪进行血液常规检测,发现东方香猪在感染猪嗜血支原体后,红细胞数、淋巴细胞数、红细胞比容及血红蛋白均出现不同程度的降低,白细胞数显著升高,这些变化均与猪嗜血支原体病相似;同时,低免疫力东方香猪相.继表现出体温升高,精神萎顿,食欲减退;可视粘膜苍白、黄染,个别猪全身皮肤黄染;两耳发给,耳尖干燥。四肢内侧、胸腹下有大小不同的出血点和紫斑;有不同程度的呕吐、腹泻,消瘦,生长发育迟滞;体温、呼吸率均有明显变化,出现了猪嗜血支原体病典型临床症状。
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