ST细胞中猪瘟病毒受黄芪复方注射液的影响
朱辉 山东农业大学
兽医通过实验发现黄芪多糖注射液的安全浓度小于 640 μg/mL，Co-APS 注射液的安全浓度小于 320 μg/mL。高于安全浓度，黄芪多糖以及 Co-APS 注射液均能致使 ST 细胞死亡。而在其各自安全浓度范围内，较高浓度的 APS/Co-APS 注射液具有增强 ST 细胞活性的作用。在九个梯度浓度中，320 μg/mLAPS、160 μg/mLAPS、160 μg/mL Co-APS、80 μg/mLCo-APS 具有明显增强 ST 细胞活性的作用；较低浓度无明显的增强细胞活性的作用。在其安全浓度范围内，黄芪多糖对体外细胞的增殖促进作用具有一定的量效关系；翁玲等在黄芪多糖能有效地促进小鼠和人的骨髓以及外周血造血干/祖细胞的增殖等研究中报道了黄芪多糖对体外细胞增殖作用的影响趋势，本试验结果与其相一致。
MTT 检测法主要反映细胞的能量代谢，是检测细胞增殖活力的一种简便、准确的方法，其原理是活细胞在其生长和增殖过程中，线粒体内的琥珀酸脱氢酶可将黄色可溶性的 MTT 分解成蓝紫色的结晶并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。MTT 结晶形成的量与细胞的数量和细胞的活性成正比，将其溶解在有机溶剂里，在一定波长范围内，通过比色分析以反映成活细胞数及细胞的活性。APS/Co-APS 注射液对猪瘟细胞苗病毒在ST 细胞体外培养影响的实验中细胞活性检测表明：320 μg/mL 黄芪多糖组以及猪瘟疫苗稀释液组 OD 值明显大于生理盐水组，这说明 320 μg/mLAPS 以及猪瘟疫苗稀释液具有明显增强 ST 细胞活性的功能；160 μg/mL APS 组、160 μg/mL Co-APS 组、80 μg/mLCo-APS 组的 OD 值与生理盐水组差异不显著，说明 160 μg/mL APS 组、160 μg/mLCo-APS 组、80 μg/mL Co-APS 组与生理盐水组 ST 细胞的活性没有明显差异。
病毒含量检测表明：160 μg/mL APS 组、80 μg/mL Co-APS 组以及猪瘟疫苗稀释液组的 CT 值显著小于生理盐水组，但 320 μg/mL APS 组、160 μg/mL Co-APS 组 CT 值与生理盐水组差异不显著。160 μg/mL APS 组、80 μg/mL Co-APS 组以及猪瘟疫苗稀释液组的病毒拷贝数显著大于生理盐水组，320 μg/mLAPS 组、160 μg/mL Co-APS 组的病毒拷贝数与生理盐水组没有显著差异；APS 两组中 160 μg/mLAPS 组病毒拷贝数显著高于320 μg/mL APS 组；Co-APS 两组中 80 μg/mL Co-APS 组病毒拷贝数高于 160 μg/mLCo-APS 组，但差异不显著。较高浓度组病毒含量低于低浓度组，说明较高浓度的 APS以及 Co-APS 在不同程度上具有抑制病毒在 ST 细胞上复制的作用。
综合细胞活性检测和病毒含量检测结果可见，猪瘟疫苗稀释液和 320 μg/mLAPS 具有明显提高 ST 细胞活性的作用，细胞活性的增加代表细胞代谢旺盛。猪瘟疫苗稀释液在增强 ST 细胞活性的同时猪瘟病毒的复制含量也增加了；在 APS 组中：320 μg/mLAPS组细胞活性显著大于生理盐水组，但病毒含量差异不显著；160 μg/mL APS 组的细胞活性与生理盐水组差异不显著，其病毒含量却显著高于 320 μg/mLAPS 组和生理盐水组；在 Co-APS 组中：160 μg/mL Co-APS 组以及 80 μg/mL Co-APS 组细胞活性与生理盐水组没有显著差异，80 μg/mL Co-APS 组病毒含量显著高于生理盐水组，高于 160 μg/mLCo-APS 组但差异不显著，160 μg/mL Co-APS 组病毒含量也高于生理盐水组但差异不显著。Co-APS 注射液在其安全浓度范围内，160 μg/mL Co-APS 组、80 μg/mL Co-APS 组相对于生理盐水组没有显著增强体外 ST 细胞活性的作用，但 160 μg/mL Co-APS 组病毒含量显著低于 80 μg/mL Co-APS 组。APS 注射液在其安全浓度范围内，较高的浓度如320 μg/mL APS 组在显著增强体外 ST 细胞活性的同时病毒含量相对于生理盐水组没有显著增加，而 160 μg/mL APS 组增强了体外 ST 细胞活性但与生理盐水组无显著差异的同时其病毒含量却显著高于生理盐水组，这说明适当较高浓度的 APS 注射液具有增强体外 ST 细胞活性的同时具有一定程度的抑制猪瘟病毒在 ST 细胞上复制的作用，这与黄小燕，胡元亮等人关于适当浓度的黄芪多糖具有抑制病毒感染体外细胞的报道相一致；并且优于低浓度的 APS 以及 Co-APS。
实验结果表明猪瘟疫苗稀释液具有增强 ST 细胞活性的作用的同时能促进猪瘟疫苗弱毒在体外 ST 细胞上复制的作用；适宜浓度的 APS 以及 Co-APS 也具有类似的作用（如160 μg/mL 的 APS 以及 80 μg/mL 的 Co-APS），比对不同浓度的 APS 以及 Co-APS 对细胞活性以及病毒含量的影响，加之 APS 具有增强免疫力的作用，160 μg/mL 的 APS 作为猪瘟疫苗稀释液较为适宜或者按照此浓度加入疫苗作为免疫佐剂。
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