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兽医临床上溶菌酶的应用

王 琦 曲明丽 赵芙蓉  东北农业大学动物疾病诊疗中心

  人们对溶菌酶的研究始于 20 世纪初,1922 年英国细菌学家发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶。自然界中溶菌酶存在非常广泛。在人和动物的许多组织和分泌物中,包括哺乳动物的乳汁和鸟类的卵中都有溶菌酶的存在,其他植物组织及微生物细胞中也存在,但溶菌酶的含量差异较大,结构也略有差异。以鸡蛋清中含量最多,其溶菌酶的含量可以高达 3.5%,是目前溶菌酶的主要来源。依据溶菌酶来源的不同,溶菌酶通常被分为动物溶菌酶、植物溶菌酶、微生物溶菌酶、噬菌体 T4 溶菌酶和基因工程溶菌酶几种类型。

  1 结构及性质

  溶酶菌又称胞壁质酶,化学名称为 N- 乙酰胞壁质聚糖水解酶,属葡萄糖苷酶。鸡蛋清溶菌酶是研究最清楚的溶菌酶,是由 18 种 129 个氨基酸残基组成的单肽链蛋白质,分子量为14 000 道尔顿,在分子中的 4 对含硫氨基酸间形成 4 个 S- S健。

  溶菌酶是碱性球蛋白,化学性质较稳定,干燥条件下在室温可长期保存,其纯品为白色或微黄色结晶体或无定型粉末,无臭、味甜,易溶于水,遇碱易破坏,不溶于丙酮和乙醚等。其等电点为 11.1,最适溶菌温度为 50℃,最适 pH 值为 7,对热的稳定性很强,在 pH 值 4~7 的范围内,100℃处理 1 分钟仍保持原酶活性,但在碱性环境中该酶对热的稳定性较差。反复冻融对溶酶菌的活性影响较大,每冻融 1 次,其活性的损失接近50%。

  2 作用机理

  溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖,其水解位点是 N- 乙酰胞壁酸(NAM)的 1 位碳原子和 N- 乙酰氨基葡萄糖(NAG)的 4 位碳原子间的 β- 1,4 糖苷键。细菌的细胞壁由胞壁质组成,胞壁质是由 NAG 及 NAM交替组成的多聚物,胞壁酸残基上可以连接多肽,称为肽聚糖,肽聚糖是细菌细胞壁的主要组成成分。

  溶菌酶不仅可以溶解细菌的细胞壁,还可以溶解酵母和霉菌的细胞壁。对于革兰氏阳性菌与革兰氏阴性细菌,其细胞壁中肽聚糖含量不同,革兰氏阳性菌细胞壁几乎全部由肽聚糖组成,而革兰氏阳性菌只有内壁层为肽聚糖。因此,溶菌酶只能破坏革兰氏阳性菌的细胞壁,而对革兰氏阴性菌的作用不大。

  3 在兽医临床上的应用

  溶酶菌本身是无毒、无害、安全性很高的高盐基蛋白质,且具有一定的保健作用,又具有一定的溶菌作用,是安全性高的饲料添加剂。他能专一作用于目的微生物的细胞壁,而不作用于其他物质。该酶对革兰氏阳性菌、枯草芽孢杆菌和耐辐射微球菌有强力分解作用。对大肠杆菌、普通变形菌和副溶血弧菌等革兰氏阴性菌等也有一定溶解作用。与聚合磷酸盐和苷氨酸等配合使用,具有良好的防腐作用。

  在饲料中添加溶菌酶可防止霉变,延长饲料的贮存期,减少不必要的损耗。溶菌酶制剂能有效控制因消化不良引起的腹泻,这是因为溶菌酶不但对引起动物腹泻的埃希氏大肠杆菌和轮状病毒有较强的抑制作用,而且溶菌酶可提高内源性蛋白酶活性,促使抗炎多肽的产生,因而具有抵抗和消除炎症的作用。

  溶菌酶与免疫球蛋白在功能上紧密联系,并能与其他生命活性物质互补增强抗体的活性,从而杀灭细菌。溶菌酶制剂还能有效防止球虫病。

  饲喂基础日粮的鸡,添加和不添加溶菌酶对球虫病的应激呈现不同的反应。对照组鸡生长被抑制率达 52.5%,而加酶组的抑制率为 30.5%,并且损伤系数好得多。

  在不用任何抗生素的情况下,在肉鸡饲料中添加饲用溶菌酶制剂作为饲料添加剂,对 175 羽肉用仔鸡进行了饲养对比试验。结果显示,在不用任何抗生素的情况下,饲料中添加4~100 毫克 / 千克的饲用溶菌酶制剂,试验组平均增重比对照组提高 2.0%~2.8%,饲料消耗量降低 2.1%~5.2%,存活率提高14%~17%,饲料报酬提高 5.0%~8.8%。

  饲用溶菌酶可以促进饲料中营养物质的消化吸收,提高饲料的消化率,最大限度地提高饲料原料的利用率。溶菌酶作为酶类抗菌药,能参与粘多糖代谢,具有多种药理作用。他具有抗菌、抗病毒、止血、消肿、增强抗生素疗效及加快组织恢复的作用。另外,还能分解稠厚的粘蛋白,使炎性分泌物和粘痰液化而易排除。

  据报道,采用溶菌酶注射治疗奶牛子宫内膜炎,结果可见溶菌酶对子宫内膜炎的总治愈率、治疗后子宫恢复程度均较抗生素治疗的效果好。对子宫内膜炎的总治愈率达 82.35%~88.24%,明显高于金霉素的治愈率(56.25%)。有人用鸡蛋清溶菌酶和中草药的复合制剂联用对引起乳房炎的致病菌作抑菌试验,溶菌实验组获得了良好的抑菌效果。

  最近的研究表明,溶菌酶不仅对具有细胞壁的微生物有抑菌作用,而且可以与 DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使侵入体内的病毒失活,还可以抑制腺病毒的生长。可用于鸡痘及流感等病毒性疾患的治疗。活菌制剂中有益微生物进入水产动物机体后,形成优势菌群,产生溶菌酶、过氧化氢等物质,可杀灭潜在病原菌,并且产生各种消化酶。

  有利于养分分解,具有高度安全性,不会对水产动物产生任何危害,也不会在水中和鱼体内有残留。溶菌酶或溶菌酶与抗生素合用,用于治疗海水、淡水养殖鱼类、螃蟹类、虾类,由弧菌、海洋曲桡菌、链球菌、爱德华菌引起的疾病,降低抗生素海水、淡水鱼类、螃蟹类、虾类养殖中的存留,提高海水、淡水养殖鱼类、螃蟹类、虾类的品质。

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