猪繁殖与呼吸综合征(PＲＲS)俗称“猪蓝耳病”，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PＲＲSV)感染引起的一种重要传染病。近年来，由PＲＲSV变异株引起的高致病性猪蓝耳病(HP－PＲＲS)危害严重，仔猪发病率可达100%，死亡率可达50%以上，母猪流产率可达30%以上，也可使育肥猪发病死亡。猪蓝耳病疫苗是国家强制免疫的疫苗之一，但其应用一直都存在争议。灭活苗较为安全，而弱毒苗免疫力强，保护率高。不同的PＲＲS疫苗免疫后均能产生一定的保护性抗体水平，但交叉免疫保护性较差［1］。

     目前国内疫苗生产企业较多，特别是HP－PＲＲS活疫苗，生产企业达17家。使用的疫苗毒株种类也比较多，如用于生产灭活苗的CH－1a和NVDC－JXA株，经典活疫苗毒株CH－1Ｒ和Ｒ98株，高致病性猪蓝耳病疫苗毒株JXA1－Ｒ、HuN4－F112和TJM－F92株等。为探讨不同疫苗在浙江金华地区的应用情况以及在不同规模猪场使用后的免疫效果，本文对金华地区9个县市的大、中和小规模猪场使用蓝耳病疫苗的情况以及免疫后的抗体水平进行分析，为该地区猪蓝耳病的有效防控提供依据。

     猪蓝耳灭活疫苗毒株为CH－1a和NVDC－JXA1;弱毒活疫苗毒株为CH－1Ｒ和VＲ－2332;高致病性蓝耳活疫苗毒株为JXA1－Ｒ、HuN4－F112和TJM－F92。所用的所有疫苗均有正规批准文号并在有效期内。

     1.1.2检测试剂和仪器

     猪蓝耳病抗体ELISA检测试剂盒，购自IDEXX公司(批号:99－40959，有效期:2014－05)。ThermoMultiskanAscent酶标仪，购自赛默飞世尔科技公司;BSP250型生化培养箱，购自上海博迅实业有限公司。

     免疫方法和免疫剂量按疫苗使用说明书进行，生产母猪:对整个生产群每3个月进行1次普免，但产前1月不免，产后10～12d加强免疫1次。仔猪:14～50日龄1次或2次免疫。猪颈部肌肉注射。

     1.3样品的采集

     2012年5月—2014年5月从金华地区的婺城、金东、浦江、义乌、永康、兰溪、武义、东阳、磐安9个县市的大、中和小规模猪场采集静脉血，分离血清。在蓝耳病疫苗免疫猪场共采集生产母猪或仔猪二免后28d猪血清样品1260份，其中:免疫灭活疫苗CH－1a株血样225份，NVDC－JXA1株血样150份;弱毒活疫苗CH－1Ｒ株血样345份，VＲ－2332株血样75份;高致病性蓝耳弱毒活疫苗JXA1－Ｒ株血样375份、HuN4－F112株血样45份和TJM－F92株血样45份。未免猪场母猪与仔猪的血清样品150份作为对照。

     1.4血清抗体检测

     按IDEXX猪蓝耳病抗体ELISA检测试剂盒操作说明进行［2］。S/P值大于或等于0.4，样品判定为PＲＲS抗体阳性，否则为阴性。存栏猪免疫抗体合格率≥70%时为群体免疫合格。

     2012年5月—2014年5月，金华地区不同规模猪场选择使用猪蓝耳病疫苗的类型和毒株有一定的差异，其中小规模猪场分别有采用经典弱毒苗、灭活苗和高致病性蓝耳病弱毒苗，而中、大型规模猪场以高致病性蓝耳病弱毒疫苗为主。从免疫效果看大型猪场的抗体平均合格率(87%～95%)都要高于同期小型(69%～90%)和中型猪场(68%～88%)。此外，2012、2013和2014年不同年份的数据显示差异不明显。详见表1。

   

     2.2不同规模猪场选择的蓝耳疫苗情况

     表2是在2012年5月—2014年5月针对不同规模猪场选择的疫苗类型和毒株所作的分析，共对34、20和11个小、中和大规模猪场(主要分布在婺城区、金东区、浦江、义乌、武义、永康)调查统计，其中未免疫任何蓝耳疫苗的猪场分别占了9%、20%和9%，灭活疫苗的使用量分别是3%、10%和0%，选择弱毒疫苗的比例分别是88%、70%和91%，其中使用高致病性弱毒疫苗的比例分别是67%、40%和64%，高致病性弱毒疫苗中又以JXA1－Ｒ毒株的使用最为广泛，分别占了61%、20%和55%。

    

     2.3不同的疫苗种类在猪场的应用效果

     从调查猪场中对随机选择2～5家使用不同蓝耳疫苗毒株的猪场作为试验猪场，对免疫后猪只采静脉血并分离血清，检测蓝耳疫苗免疫后的抗体水平，其中灭活疫苗的抗体平均合格率为51%～54%;而弱毒疫苗的抗体合格率为86%～98%;弱毒疫苗中高致病性毒株疫苗的抗体合格率也明显高于经典毒株疫苗的水平，达到88%～95%。详见表3。

   

     2.4不同日龄猪只使用的蓝耳疫苗情况

     从不同日龄使用蓝耳疫苗的情况看(表4)，经调查发现猪场对14～60日龄小猪的免疫注射率不如中大猪(生产母猪)，抗体合格率为75%，相较中猪(84%)和大猪(87%)都明显偏低。同时对免疫后中、大猪的血清进行猪蓝耳病抗原的ＲT－PCＲ检测，结果显示PＲＲSV阳性率几乎为0。在疫苗毒株的选择上现阶段针对不同日龄的猪只主要采用高致病性弱毒株，其中以JXA1－Ｒ毒株的使用最为广泛(90%)，这与浙江省统一政府采购也有一定的关联性，其次是经典毒株的普通弱毒蓝耳疫苗，分别是CH－1Ｒ和VＲ－2332毒株，这两者的使用猪场较少，约占10%。

     对金华地区不同规模的84个猪场进行了问卷调查，主要是针对不同疫苗注射后副反应和发病情况，前者包括体温上升、免疫部位红肿和采食量，后者包括腹泻、流产和死亡。从临床免疫效果看，灭活疫苗免疫后发病率低，为0.78%～1.65%，体现了灭活疫苗安全的优点，但副反应体现明显，特别在免疫后的1～2d采食量下降，到第3天即恢复正常;免疫后24h内猪群体温上升，免疫后48h体温反应有所减轻，到72h体温恢复正常，可见灭活疫苗在免疫后1～2d有较大的副反应，但第3天即能恢复正常，与吴宣等［3］关于灭活疫苗应用效果调查结果相符。弱毒疫苗免疫后，猪只未见明显的免疫副反应。

     2012年5月—2014年5月3年的数据分析显示金华地区不同规模猪场注射蓝耳疫苗后，不同年份间的抗体水平没有显著的变化和差异，整体而言大型规模猪场使用高致病性弱毒疫苗为主，而小规模猪场除了使用高致病性弱毒苗外，对经典弱毒苗和灭活苗的应用也较为广泛。但从免疫后的较果显示大规模猪场的平均S/P值和抗体平均合格率都要高于同期小型和中型猪场的水平，这与大规模猪场统一、稳定的免疫注射、抗体水平和饲养管理都有一定的关系。不同规模猪场选择使用疫苗的类型和毒株的情况分析，有相当一部分猪场并未进行蓝耳病疫苗的免疫(9%～20%)，这可能与免疫后效果不稳定以及引起相应的副作用有关。而在疫苗种类的选择上高致病性弱毒疫苗JXA1－Ｒ毒株的使用最为广泛，特别是小规模和大规模的猪场分别占了61%和55%，这可能与浙江省统一采购疫苗免费发放、JXA1－Ｒ毒株免疫后抗体增速快、持续时间长［4］、质量稳定［5］以及金华地区以高致病毒株流行［6］为主有关，同时由于蓝耳病疫苗市场竞争激烈，特别是TJM－F92、HuN4－F112(2013年也为政府采购疫苗)和VＲ－2332毒株由于它们各自的优势，在中型规模猪场中也占有一席之地，分别占有10%～20%。

     不同疫苗类型(毒株)在猪场应用中的抗体水平比较，从2012—2014年间的数据显示不同类型的疫苗使用后的抗体水平有明显的差异，特别是灭活疫苗的平均S/P为0.678～1.111，抗体平均合格率为51%～54%;而弱毒疫苗的平均S/P为1.685～1.993，抗体合格率为86%～98%;弱毒疫苗中高致病性毒株疫苗数据更为突出，分别是1.704～1.993和88%～95%。与王建等［7］研究结果一致，显示弱毒疫苗(VＲ2332、JXA1－Ｒ)和灭活疫苗JXA1分别免疫后，攻毒后发病率分别为36.4%和63.6%。胡守萍［8］等也证实弱毒疫苗对PＲＲSV变异株的免疫效果要优于灭活疫苗。

     不同日龄猪只免疫蓝耳疫苗后抗体水平比较分析，60日龄以内小猪的蓝耳抗体水平不如80～140日龄中猪和150日龄以上的大猪，这可能与猪场考虑到免疫后的副作用以及免疫程序的安排有关，对小猪的免疫注射率不如中大猪，该病的预防小型猪场主要集中在母猪的免疫上，并希望通过母源抗体达到免疫小猪的效果，从这点来说是需要改进和加强的。从金华地区2012年5月—2014年5月间不同规模应用蓝耳疫苗的情况看，除了未免的猪场，免疫后活疫苗的平均S/P和抗体合格率普遍高于灭活苗，而活苗无论是经典毒株(CH－1Ｒ和VＲ－2332株)还是弱毒株(JXA1－Ｒ、HuN4－F112和TJM－F92株)都没有显著的差异。总体来说，受蓝耳病污染的猪场使用弱毒疫苗比用灭活疫苗免疫效果好;未受到污染的猪场使用高致病性灭活疫苗总体免疫效果较好，与文献报道一致［9］。

     有效预防和控制蓝耳病的根本，是对猪群作蓝耳病疫苗免疫预防，但鉴于猪蓝耳病疫苗种类较多，市场上的疫苗质量良莠不齐，生产上蓝耳病疫苗免疫也存在一定风险，如蓝耳病病毒的抗体依赖性增强(ADE)作用、蓝耳病病毒带毒或感染对链球菌病的诱发和放大作用［10］，所以蓝耳疫苗种类和疫苗毒株的选择应该根据猪群的发病或潜伏感染情况，并设计合理的免疫程序，提高猪只自身免疫力，进行综合防控，这样才能把蓝耳疫苗的效果最大化地体现出来。

(1．金华职业技术学院，蒋春燕，何海健，张超颖;2．南京农业大学动物医学院，刘永杰;3．杭州市萧山区戴村镇农业公共服务中心，蒋春燕，田园明)