随着养鸡业集约化、规模化的发展和全球气候变暖，高温成为影响鸡生产性能的重要因素。高温可引起鸡产生热应激，进而会诱发鸡群一系列的生理、生化反应，造成采食量和产蛋量等生产性能的下降，严重时出现死亡，给养鸡业带来巨大的经济损失。李军乔等［1］研究表明热应激显著降低肉鸡的采食量和生长速度，降低饲料转化率，同时高温环境显著影响肌肉一些感官指标，使肉品质下降。刘梅［2］探讨急性热应激对肉仔鸡生产性能的影响，发现急性热应激情况下，肉仔鸡的平均采食量、平均日增重下降，料蛋比增加，导致生长性能下降。张乐萃等［3］研究发现热应激会引起鸡各免疫器官均发生萎缩性变化，个别鸡发生一定程度的坏死性变化。李玉保等［4］研究发现急性持续热应激2h，T淋巴细胞活性显著降低。目前生产中主要采取通风降温、品种选育、日粮调控及抗应激添加剂等综合措施来缓解鸡的热应激反应，从遗传育种入手改良鸡自身的耐热性也是缓解鸡热应激不利影响的有效手段。在家禽的热耐受性研究中，涉及的耐热指标有很多，且在鸡上虽然已经做了大量耐热指标的研究，但报道结果不尽相同，可能与家禽品种、年龄、换羽、热应激的强弱和时间长短等诸多因素有关。能够找到准确评定鸡热耐受性的性状指标是通过遗传育种手段增强鸡本身对高温热耐受性的基础。本研究分别测定了矮小型黄羽肉鸡群体在夏季(35℃)和冬季(20℃)的皮质酮、T3、H/L和CD细胞含量指标，通过比较2个季节这5个指标的变化，旨在能够找到准确评定鸡热耐受性的候选生理和免疫性状，为鸡耐热遗传改良打下一定的基础。

     矮小型黄羽肉鸡纯系母鸡300只由广东省温氏集团南方育种公司河头育种场提供。种鸡舍安装有纵向通风－水帘降温设施，半开放式，三层全阶梯式笼养，按照正常饲养标准进行饲养管理。

     1.2不同温度处理与血样采集

     夏季鸡舍外温度30℃时，关闭纵向通风－水帘设备，此时舍内温度达35℃，处理6h，对种鸡(30周龄)进行翅下静脉采血;冬季舍内温度为20℃时，对同一批次鸡(38周龄)进行翅下静脉采血。非抗凝血1～2mL，血清用于测定三碘甲腺原氨酸(T3)和皮质酮;抗凝血1～2mL，用于测定H/L和CD细胞含量。

     1.3生理及免疫指标测定

     非抗凝血直接离心吸取血清，由中山大学广州达瑞抗体中心用T3和皮质酮ELISA试剂盒检测，操作按照试剂盒说明书进行。

     1.3.2H/L的测定

     翅下采血，肝素钠抗凝，用瑞氏和吉姆萨复合染色法对血涂板染色［5］，镜检，按Alfred等(1961年)的白细胞分类方法进行细胞分类，并按Campo等［6］的方法进行计数和计算。由解放军458医院免疫细胞实验室代测。

     1.3.3CD3+、CD4+的检测

     采用流式细胞术检测个体外周血的CD3+、CD4+T细胞含量，由解放军458医院免疫缺陷病研究与特殊实验中心检测。

     1.4数据分析

     利用SAS9.0软件的T程序分析不同状态下生理和免疫性状指标的差异。

     由表1可知，夏季矮小型黄羽肉鸡血液中的T3含量极显著地高于冬季(P＜0.01)，皮质酮含量显著高于冬季(P＜0.05)。

     由表2可以看出，夏季矮小型黄羽肉鸡血液中的H/L值极显著地高于冬季(P＜0.01);与冬季相比，夏季矮小型黄羽肉鸡的CD3+T细胞含量极显著降低(P＜0.01)，CD4+T细胞含量差异不显著。

   

     高温是影响鸡生产性能的主要因素之一，同时会引起鸡体内血液成分和内分泌机能的变化。高温热应激下，交感神经兴奋，肾上腺髓质释放大量儿茶酚胺，肾上腺皮质激素分泌增加，鸡血液的皮质醇浓度升高，以调节盐、糖、蛋白质和脂肪的分解。杜荣等［7］研究表明，环境温度高于25℃时，鸡血浆皮质酮水平显著升高，且随温度的升高而升高。Edens等(1978年)对使雌、雄仔鸡进行43℃处理2h，每隔30min屠宰采血，发现血浆皮质类固醇先急剧增加，而后迅速下降。而也有不同观点认为高温条件下皮质酮无显著变化或者下降。Lin等［8］研究报道，高温(35℃)处理3h和6h时，溶剂血浆皮质酮无显著变化;同样地，韩爱云等［9］也得出相同结论。本研究发现，夏季矮小型黄羽肉鸡血清中皮质酮含量显著高于冬季，这与杜荣等、Edens等报道类似。环境温度升高到一定程度(超过25℃)，对鸡体来说是一种不良刺激，除了进行行为等物理调节外，还必须改变血浆中某些激素水平以加强化学调节，血清中皮质酮水平的改变正是鸡体应对环境温度升高的生理反应，它可以作为评价热应激的候选指标。甲状腺激素分泌的变化会导致机体代谢功能紊乱，抵抗热应激的能力下降。血浆T3水平下降时，代谢速度减慢，产热减少，反之亦然。大量研究表明，高温会使鸡甲状腺功能降低，血浆T3、T4明显降低，T3是敏感的热应激指标［10－11］。然而也有学者持有不同的观点。高增兵等［12］认为不同高温条件下，各试验组与对照组相比，血浆T3浓度先升高后降低。刘思当等［16］的研究也得出相似结论，随着应激时间的增加，T3先升高再下降，然后接近恢复正常水平。本研究发现，夏季矮脚黄鸡T3水平极显著升高，这与高增兵等、刘思当等报道大致相符。本试验为自然条件下的高温，采样时间正处于逐渐的升温阶段，正如高增兵等［12］所说，在这个短期时间内，鸡处于急性热应激状态，其为适应这种不利环境，甲状腺分泌机能亢进，故T3升高。T3虽然和热应激紧密相关，但是由于影响因素较多，所以是否能作为评价热应激的候选指标还有待进一步验证。淋巴细胞是重要的免疫细胞，在机体免疫系统中起着重要的作用。Maxwell等［14］的研究表明轻度或中度的应激会引起H/L值的升高。zge等［15］研究也发现当鸡处在(39±1)℃的急性高温热应激条件下，血液中H/L值增加。H/L值的变化与家禽的应激程度密切相关，可以作为检测家禽应激程度的一项准确指标［16］。本研究发现，夏季矮小型黄羽肉鸡H/L值极显著高于冬季，这与Maxwell等、zge等报道类似。H/L值已经作为一个成熟的评价抗逆性的指标应用到育种上，本试验的结果也证明了H/L值可以作为评价鸡热耐受性的指标性状。T淋巴细胞亚群的检测是观察机体细胞免疫水平的重要方法。外周血T细胞亚群是公认的反应细胞免疫状态较好的指标［17－18］。根据T细胞表面分化抗原的不同，T细胞可以分为CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞。CD3+T细胞在抗原识别和免疫信号传导过程中具有重要作用;CD4+T细胞可以促进T细胞、B细胞免疫应答;CD8+T细胞具有免疫抑制和细胞毒性作用。Hammami等［19］研究发现热应激后鸡外周血中CD3+和CD4+会显著降低，CD8+会显著升高。并且认为热应激会明显的改变外周血中淋巴细胞亚群数。Trout等［20］研究显示热应激可使鸡外周血CD4+、CD8+T细胞显著减少。本研究发现，与冬季相比，夏季矮小型黄羽肉鸡的CD3+T含量极显著低于冬季，而CD4+T含量差异不显著。CD4+和CD8+能在一定程度上反映CD3+含量，它们足以反映免疫功能的变化，可以结合起来作为评价热应激的准确的免疫指标。本研究也测定了CD8+的含量，但是含量很低，是否是因为抗体或者采样原因还有待进一步研究。

     高温会增加鸡外周血中的T3和皮质酮浓度，同时也会使H/L值显著升高。皮质酮和H/L值可以作为评价鸡耐热性的重要性状，但T3和CD细胞是否能作为评价耐热性能的候选指标还需进一步验证。

(1．华南农业大学动物科学学院，罗庆斌，孔丽娜，张德祥，罗庆斌;2．广东温氏食品集团股份有限公司，肖雄，季从亮)