样品:从玉林、贵港、北海三市23个中型规模场共采集723份血清样品，包括公猪、能繁母猪、后备母猪。

     试剂:CSFV抗体检测试剂盒、PＲVgpI(gE)抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司;PＲＲSVELISA检测试剂盒、PCV－2ELISA检测试剂盒，购自北京金诺百特科技有限公司。

     CSFV的检测步骤:①每个检测孔和对照孔中加入50μL样品稀释液;②50μL的阳性对照和阴性对照分别加入对照孔中;③剩余检测孔中加入50μL待检样品;④覆盖封板膜后室温孵育2h;⑥用300μL洗涤液洗板3次，最后一次拍干洗液;⑦每个反应孔加入100μL辣根过氧化物酶标记(HＲPO)的抗CS-FV的酶标抗体，覆盖封板膜室温孵育30min;⑧重复步骤⑥;⑨每个反应孔加入100μL底物溶液，避光反应10min后，每孔加入100μL终止液。

     PＲＲSV的检测步骤(PCV－2的检测步骤相同，仅加入酶结合抗体不同):①将抗原反应板取出，分别加入100μL稀释后的阳性对照、阴性对照和样品，覆盖封板膜后室温孵育30min;②弃去①中液体，并加入300μL洗涤液，洗涤3次，最后一次拍干洗液;③每个反应孔加入酶结合抗体100μL，室温孵育30min;④重复步骤②;⑤每个反应孔加入TMB底物溶液100μL，室温孵育15min;⑥每个反应孔加入50μL终止液。

     PＲV的检测步骤:①将抗原反应板取出，分别加入100μL稀释后的阳性对照、阴性对照和样品，覆盖封板膜后室温孵育60min;②弃去①中液体，并加入300μL洗涤液，洗涤3次，最后一次拍干洗液;③每个反应孔加入100μL辣根过氧化物酶标记的抗PＲVgpI的酶标抗体，覆盖封板膜室温孵育20min;④重复步骤②;⑤每个反应孔加入TMB底物溶液100μL，室温孵育15min;⑥每个反应孔加入50μL终止液。

     结果判定:CSFV、PＲＲSV、PCV－2试验结果均置酶标仪450nm波长处读数，PＲV试验结果置酶标仪650nm波长处读数。其中，CSFV抗体判定标准:阻断率(%)=(1－样本A450/阴性对照平均值)×100%，阻断率≥40%，判为阳性(有抗体存在)，阻断率≤30%，判为阴性(无抗体存在);PＲＲSV和PCV－2抗体判定标准:S/P=［(样品值－阴性值)/(阳性值－阴性值)］，S/P值≥0.4，判为阳性，S/P值＜0.3，判为阴性，但此结果不能区分感染阳性或免疫阳性;PＲV抗体判定标准:S/N=样本A650/阴性对照平均值，S/N值≤0.60，判为PＲVgpI抗体阳性，S/N值＞0.70，判为PＲVgpI抗体阴性。由于所调查地区规模场均使用gpI缺失PＲV疫苗，因此通过此试剂盒检测，一旦检出PＲVgpI抗体阳性，则可判定为已受野毒感染。

     检测结果显示，CSFV抗体检测阳性数为655份，阳性率为90.59%(655/723)。PＲV抗体检测阳性数为51份，阳性率为7.05%(51/723)，有8个规模场检测到PＲV抗体阳性。有6个规模场种猪不免疫PＲＲS疫苗，PＲＲSV抗体检测阳性数为70份，阳性率为100%(70/70);17个已免疫疫苗的规模场，PＲＲSV抗体检测阳性数为652份，阳性率为99.85%(652/653)。有13个规模场种猪不免疫PCV－2疫苗，PCV－2抗体检测阳性数为169份，阳性率为93.89%(169/180);10个已免疫疫苗的规模场，PCV－2抗体检测阳性数为508份，阳性率为93.55%(508/543)。

     23个规模场种猪群免疫抗体阳性率达到90.59%。许多研究表明，当猪群免疫抗体合格率平均达到85%以上时，种群感染或发生CSF的几率较小。本次调查结果显示，所抽查检测猪群整体免疫情况良好，种群获得较好的保护力。CSF是广西地区流行的主要猪群疫病之一，但流行态势已从过去急性发生，大规模死亡转变成病毒在在猪群潜伏感染，温和散发流行。因此，当前规模场在开展种猪CSF防控工作时，在疫苗有效含量，疫苗质量得到保证的前提下，应将工作重心转移到免疫程序和生物安全措施上，根据本场特点，掌握母源抗体消长规律，制定科学合理的免疫程序。对长期免疫抗体低下，经多次检测免疫抗体仍不达标准，或病原检测呈阳性的种猪群，应及时淘汰。

     6个规模场不免疫PＲＲS疫苗，其场内种猪群所抽检70份样PＲＲSV抗体阳性率达到100%(70/70)。据此看出，未免疫种猪群体可能已全部隐性感染PＲＲSV，这十分容易引起该地区规模场猪群PＲＲSV的传播与流行。建议规模场养殖者应高度重视种猪群体的PＲＲS的防控工作，有条件的主场可以检测场内存在的流行毒株，选择合适的毒株疫苗配合种群净化工作对PＲＲS进行综合防控。

     本次调查结果显示，有13个规模场种猪不免疫PCV－2疫苗，占56.52%(13/23)，种群抗体阳性率达到93.89%。部分省份和地区PCV－2血清抗体阳性率达到100%，笔者对广西10个地级市的发病猪群使用PCＲ方法进行病原学检测发现，全区PCV－2检出率达到67.15%，已成为广西地区猪群普遍感染病原。PCV－2感染可以一定程度上抑制机体对猪瘟疫苗免疫的应答，成为免疫失败和诱使猪瘟发生的原因。规模场应当制定更严格的调运措施，切实做好入场检疫工作，特别是进一步制定合理的PCV－2免疫程序，认真做好种群疫病净化工作，降低猪群隐性感染或继发感染PCV－2的风险。

     共有8个规模场检测出PＲV抗体阳性，占检测场数的34.78%(8/23)。结果显示，所调查规模场约1/3存在种猪PＲV抗体阳性。本次调查结果gE感染抗体阳性率7.05%，与山西8地市部分规模场gE感染抗体平均阳性率2.98%相比偏高，与广东省36个中小规模猪场种猪gE感染抗体平均阳性率11.67%～23.50%，福建省106个规模场种猪gE感染抗体平均阳性率12.3%～24.2%相比则偏低，且差异性极显著(P＜0.001)。这表明广西地区种猪的PＲV野毒感染能得到够较为有效的控制。通过现场调查发现，规模场均高度重视PＲ的防控，全群均按程序进行免疫，因此PＲ的防控收到较为良好的效果，但仍有gE感染抗体阳性，原因可能一是种猪群已隐性感染PＲＲSV、PCV－2等免疫抑制性疫病病原，增加了感染野毒的风险;二是由于忽视前期引种工作，入场检疫不严格，引发PＲV在场内垂直或水平传播，但由于疫苗的广泛应用，使感染强度一直维持在较低水平;三是没有做好PＲ净化工作，导致阳性种群持续存在，成为隐性感染源。因此，针对近年PＲV侵袭力持续渐增的情况，建议对于出现种群gE感染抗体阳性的规模场，应当对种猪进行血清学或病原学监测，对检测阳性猪坚决淘汰，此后按季度进行筛查，直到全群阴性，并且配合建立良好的饲养管理和生物安全措施，达到全场PＲ净化。

(广西动物疫病预防控制中心，甘海霞，郑敏，温丽霞，杨荣，陈芳芳，郑列丰，梁晟，钟华训)