丹麦的“ACTIYE”、西班牙的“DILTEC”及“LIFESTAR”、法国的“PRIMXCELL”、比利时的“CXM”、荷兰的“Sperm Protecter”和曲靖自配的“靖稀 3 号”7种稀释粉。

     现采集沾益县种公猪供精站的239603号、234801号和204601号3头大约克种公猪的原精液。

     恒温水浴锅2台、17 ℃恒温冰箱 1 台、DF—PSⅢ型猪精子质量电脑检测系统1套、磁力搅拌器 1台、电子称量器1台、车载 17 ℃恒温运输箱 1 个。

     无菌双蒸馏水10 L，1 000 mL刻度烧杯8个，200 mL刻度烧杯8个，移液器2支，电热恒温板1块，滤纸1盒，记号笔1支，量筒2个、玻棒、试管、水温计、一次性移液头、精密 pH 试纸若干，记录表格1 套。

     （1）将曲靖的“靖稀 3 号”、西班牙的“DILTEC”、丹麦的“ACTIYE”、法国的“PRIMXCELL”、比利时的“CXM”、荷兰的“Sperm Protecter”、西班牙的“LIFESTAR”7种稀释粉按使用说明分别用同质无菌双蒸馏水在磁力搅拌器上配制成稀释液，分别用滤纸过滤装入7个1 000 mL刻度烧杯中，用记号笔依次分别标上1、2、3、4、5、6、7号稀释液，置于37 ℃恒温水浴锅中水浴恒温备用。

     （2）将现采集过滤好的第1头大约克种公猪的原精液充分轻摇混匀，用pH试纸测定记录pH，取样涂片，用DF—PSⅢ型猪精子质量电脑检测系统检测记录原精液的精子活力和密度等（检测3个视野，记录系统自动形成的平均值）。取样检测后，将原精液再次轻摇混匀，按30 mL 17份，分别放入7个200 mL刻度烧杯中，分别标上1、2、3、4、5、6、7号原精，置于37 ℃恒温水浴锅中水浴恒温备用。

     （3）在稀释液与原精液同温的条件下，统一按原精液∶稀释液为1∶2的比例，分别用量筒准确量取1、2、3、4、5、6、7号稀释液，分别对应1、2、3、4、5、6、7号原精液，沿原精液烧杯壁缓慢添加到原精液中，轻摇使之混匀，即完成稀释。

     （4）稀释好以后，用pH试纸分别测定记录7种稀释精液的pH，随即分别取7种稀释精液涂片，置DF—PSⅢ型猪精子质量电脑检测系统，检测记录每一种稀释精液的精子活力和密度。之后将 7 种稀释精液用80 mL精液瓶分别分装，用记号笔对应标记“公猪耳号”和“1、2、3、4、5、6、7 号”稀释精液，置室温条件下待温度都降至室温后，转移到17 ℃恒温冰箱保存。

     （5）每隔6个小时，将17 ℃恒温冰箱中保存的7种稀释精液拿出来，均颠倒轻摇使之均匀，用pH试纸分别测定记录1次pH，然后用移液器各取2 mL分别放入标有1、2、3、4、5、6、7的7个试管中，置37 ℃恒温水浴锅中升温2 min，分别从中取样涂片，用DF—PSⅢ型猪精子质量电脑检测系统检测记录活力和密度1次（每次均检测3个视野，记录系统自动形成的平均值），直至多数稀释精液的精子活力降至30%以下为止。

     （6）按如上方法同期进行第2头和第3头种公猪的精液稀释保存试验，使试验的相同品种公猪达3头。

     （7）分别统计分析7种稀释粉稀释3头种公猪精液的系列检测数据，从精子活力、保存时间等方面分析比较，选出效果较好的前3种稀释粉，作为曲靖主推品牌进行推广。

     稀释前，3头公猪原精液的精子活力为（83.96±1.15）%，用种稀释粉配制的7种稀释液进行稀释后，7种稀释精液的精子活力都不同程度下降，其中下降幅度最小的是7号稀释粉稀释的精液，精子活力由原精液的83.96%降为82.75%（P＞0.05），下降1.21个百分点，降幅为1.44%；其次是6号稀释粉稀释的精液，精子活力由原精液的83.96%降为81.75%（P＞0.05），下降2.21个百分点，降幅为2.63%；再就依次为4号、3 号、5 号、2 号和 1 号稀释粉稀释的精液，精子活力依次下降3.24、3.38、3.89、5.29和6.81个百分点，降幅依次为3.86%、4.03%、4.63%、6.3%和8.11%，但与原精液比，差异均不显著。详见表 1。

   

     由表1可知，用7种稀释粉稀释的精液，精子活力比稀释前都有所下降，但差异都不显著，说明7种稀释粉，在规范化稀释的情况下，稀释后精子活力与稀释前相比都没有影响。但是，不同稀释粉稀释精液的精子活力却有差别，3、4、5、6、7号稀释粉稀释精液的精子活力均在80%以上，1、2号稀释粉稀释精液的精子活力却只分别为77.15%和78.67%。1、2、5号稀释粉稀释精液的精子活力差异不显著，3、4、5号稀释粉稀释精液的精子活力差异不显著，6、7号稀释粉稀释精液的精子活力差异不显著，但1、2号稀释粉稀释精液的精子活力与3、4、6、7号相比有显著差异，5号稀释粉稀释精液的精子活力与6、7号相比有显著差异。初步说明用 3、4、6、7 号稀释粉稀释精液更有利于保障精子的活力。

     7种稀释粉稀释精液均按照每6 h检测1次精子活力等指标，统计3头公猪的平均值，以每24 h的数据为主，详见表2。

  

     由表2可知，保存6 d即144 h精子活力仍在60%以上的有法国的“PRIMXCELL”、丹麦的“AC－TIYE”和西班牙的“LIFE STAR”3种稀释粉稀释的精液，精子活力分别为65.45%、61.04%和60.24%；保存7 d即168 h精子活力仍在60%以上的只有1种稀释粉稀释的精液，就是法国的“PRIMXCELL”稀释的精液，精子活力仍有61.99%；保存8 d即192 h精子活力仍在60%以上的依然是法国的“PRIMX－CELL”稀释的精液，精子活力仍有60.02%。从保存的活力效果看，保存8 d即192 h，精子活力最高是法国的“PRIMXCELL”稀释的精液，精子活力60.02%；其次是丹麦的“ACTIYE”稀释的精液，精子活力为56.46%；再就是西班牙的“LIFE STAR”稀释的精液，精子活力为54.53%。保存12 d以上（12.75 d即306 h） 精子活力仍在30%以上的有法国的“PRIMXCELL”、丹麦的“ACTIYE”、西班牙的“LIFESTAR”和荷兰的“Sperm Protecter ”4种稀释粉稀释的精液，精子活力分别为45.43%、37.07%、33.41%和32.6%。由此得出结论：在曲靖推广使用的7种精液稀释粉中，稀释保存效果最好的是法国的“PRIMXCELL”稀释粉（即4号稀释粉），其次是丹麦的“AC－TIYE”稀释粉（即3号稀释粉），再就是西班牙的“LIFE STAR”稀释粉（即7号稀释粉），用它们稀释的精液，保存6 d即144 h，精子活力仍在60%以上，仍符合配种要求，说明这3种稀释粉是值得推广使用。

     （1）本试验用具和器皿等的清洗消毒，蒸馏水的选择，剂量的称量，稀释液配制，精液稀释、分装和保存，品质指标检测等一系列操作都非常严谨和规范，因此从曲靖推广的7种猪精液稀释粉中选出较好的3种稀释粉，不仅可以作为曲靖今后的主推品牌，在曲靖以外的其他地区同样适用。

     （2）本试验虽然只是同期做了3头大约克种公猪的精液稀释保存测定试验，样本数量偏少，但是在测定精子活力、密度等指标时，每头猪精液的每一次测定都是3个视野求出的平均值才得出结论，说明的问题还是具有代表性的。

（曲靖市畜禽改良工作站，尤如华，高春国，杨祖云，邓德富，陈克开；云南沾益县龙华街道畜牧兽医站，张家贵，尹乔友）