由于霉菌呈点状生长，在进行分析检测时，要通过成熟的取样方案取得具有代表性的样品。实验室检测样品需要与该样品的来源保持相同的待测物质含量。为了达到这个目的，我们需要以这份具有代表性的样品为基础，从中选取一小部分分析样品，以便能够取得精确并且可重复的检测结果。

     按GB/T14699.1规定要求采集试样。如果是从堆状等散装产品中取样，根据最少份样数，随机选取每份样的位置，用手柄勺采取样品；如是从袋装产品中取样，根据最少份样数，随机选取包装袋，打开包装袋，用手柄勺采取样品。

     小麦类样品检测玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）、赭曲霉毒素A（OA）、T－2毒素（T-2）；饼粕类样品检测玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、T－2毒素、黄曲霉毒素B1（AFB1）；玉米类样品检测玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉毒素B1。

     1.2.2.1仪器设备北京生产的DNM-9602酶标分析仪、日立CRGseries高速离心机、江苏生产HY-3多功能振荡器。

     1.2.2.2试剂美国RomerLabs公司生产的AgraQuant玉米赤霉烯酮检测试剂盒、呕吐毒素检测试剂盒、赭曲霉毒素A检测试剂盒、T－2毒素检测试剂盒和黄曲霉毒素B1检测试剂盒。

     1.2.3.1样品制备按GB/T20195规定要求，选取具有代表性的实验室样品1kg，四分法缩减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。

     1.2.3.2样品的萃取玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、T－2毒素、黄曲霉毒素B1的萃取：称取20g研磨样品+100mL70/30（V/V）甲醇/水振荡提取3min，样品与萃取溶液比例应为1:5（W:V）,静置样品，滤纸过滤上清液，收集滤液待测。呕吐毒素的萃取：称取20g研磨样品+100mL去离子水或蒸馏水，振荡提取3min，样品与萃取溶液比例应为1:5（W:V），静置样品，滤纸过滤上清液，收集滤液待测。

     1.2.3.3样品稀释稀释比例见表2。

  

     1.2.3.4试剂盒检测将试剂取出放置在室温（20～25℃）下平衡2～3h。将200μL（或100μL）酶联偶合物（绿色瓶盖）与100μL（或50μL）标准品或样品混匀（用移液器混匀）；将混合液100μL同时转移至抗体包被的孔中，室温孵育10min（呕吐毒素、黄曲霉毒素B1室温孵育15min）；用蒸馏水或去离子水清洗4次（拍干）；加100μL底物（蓝色瓶盖），室温孵育５min；加100μL终止液（红色瓶盖）；450nm读数（带630nm示差波长）。1.2.3.5检测结果的判定标准品0ppb的吸光度值应大于0.5；标准曲线的线性关系应大于0.985。数据报告的判定方法见表3。

  

     2.13种原料各指标阳性检出率

     2.23种原料各霉菌毒素的含量情况

     3.1.1小麦类样品中霉菌毒素检出结果分析

  

     从表4看出，小麦类样品呕吐毒素和T-2毒素检出率高；玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A检出率低。小麦类样品易长脱氧雪腐镰刀菌，继而产生呕吐毒素。有的在田间已产生，有的在加工、储存或运输过程中产生。

     3.1.2饼粕类样品中霉菌毒素检出结果分析

     从表4看出，饼粕类样品玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A和黄曲霉毒素B1检出率低；T-2毒素检出率高。花生饼（粕）、棉籽饼（粕）易长霉菌，产生黄曲霉毒素B1。

     3.1.3玉米类样品中霉菌毒素检出结果分析

     从表4看出，玉米类样品玉米赤霉和T-2毒素检出率高；玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A检出率低。小麦类样品易长脱氧雪腐镰刀菌，继而产生呕吐毒素。有的在田间已产生，有的在加工、储存或运输过程中产生。

  

（农业部饲料质量监督检验测试中心，杨琳芬，饶辉，符金华）