实验室软件和硬件仪器设备不到位，有些仅有一些最基本的设备设施，如防疫包、手术剪刀、夹镊子、烧杯、烧瓶、离心机等，有些地方甚至没有实验室。每次做抗体检测都要送到区、市或省实验室。这样，不仅样品采集、运输、保存耽误很多时间，耗费人力，并且需要加大经费的投入。

     由于基层兽医站的技术人员部分来自乡村兽医，未经过专业理论学习，对于开展抗体检测的知识缺乏。

     凡具有血凝特性的病毒均可选用，如，新城疫病毒、禽流感病毒、禽传支病毒等。

     通过滴定病毒的血凝效价，可用于监测血清中抗体水平，也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。

     待检病毒（可购买）、待检血清、生理盐水、1%鸡红细胞悬液、96孔V形微量血凝板、加样器、离心机等。

     （1）血凝试验（HA）：取96孔V形血凝板，按以下步骤操作：

     第1步：第1排1～12孔各加生理盐水50μl；

     第2步：吸50μl病毒液于第1排第1孔，混匀后取50μl至第2孔，依次稀释至第12孔，弃去50μl；

     第3步：第1排1～12孔加1%鸡红细胞悬液50μl，微型震荡器震荡2min（如没有可用手轻拍）混匀；

     第4步：37℃温箱静置30min；

     第5步：判定结果，将血凝板倾斜45°，看是否呈泪滴状，不呈泪滴状的说明发生血凝。以4单位抗原进行血凝抑制实验。

     （2）血凝抑制实验（HI）：配置4单位抗原，取96孔血凝板，按以下步骤操作：

     第1步：第1排1～12孔各加生理盐水50μl；

     第2步：吸50μl病毒液于第1排第1孔，混匀后取50μl至第2孔，依次稀释至第10孔，弃去50μl；11孔加阳性对照血清；12孔加阴性对照血清；

     第3步：第1排1～12孔各加4单位抗原50μl；

     第4步：第1排1～12孔加1%鸡红细胞悬液50μl，微型震荡器震荡2min（如没有可用手轻拍）混匀。

     第5步：37℃温箱静置20min；

     第6步：判定结果，将血凝板倾斜45°，以孔底沉淀的红细胞流动性好，呈泪珠样流淌，边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。以此判定免疫动物的抗体水平。

     猪牛羊检测皆可采用此法。

     用布鲁氏菌缓冲抗原诊断布鲁氏菌病的一种简便方法。

     被检血清、玻璃平板、布病虎红抗原（购买）、标准阴性对照血清、阳性对照血清（购买）、吸管或分装器。

     第1步：将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应的血清30μl；

     第2步：在每孔滴加抗原30μl；

     第3步：设阴、阳性对照；

     第4步：用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合，室温（20℃）5～10min内记录反应结果；

     第5步：判定结果：在阴阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性（+），无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性（-）。

     猪瘟、口蹄疫检测均可采用此法。

     对动物疫病的早期诊断以及测定免疫动物血清抗体效价。

     被检血清、6孔微量血凝板、微量移液器、间接血凝抗原（购买）、阴性对照血清、阳性对照血清（购买）、稀释液。

     第1步：诊断前，将间接血凝抗原加稀释液浸泡7～10d前；将待检血清在56℃水浴锅灭活30min；

     第2步：第1排1～6孔各加稀释液50μl；

     第3步：吸50μl被检血清于第1排第1孔，混匀后取50μl至第2孔，依次稀释至第6孔，弃去50μl；

     第4步：设阴性和阳性地照血清；

     第5步：第1排1～6孔各加血凝抗原25μl震荡混匀。将血凝板置于微量振荡器1～2min，（如无振荡器，用手轻拍混匀亦可）。室温或37℃下静置1.5～2.0h后判定结果；

     第6步：判定结果：先观察阴性血清对照和稀释液对照孔，红血球应全部沉入孔底，无凝集现象（－）或呈阳性（+）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（+++）凝集为合格。

     在以上3孔对照合格的情况下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待检血清最大稀释度为血凝效价（血凝价）。血清的血凝价一般以达到1∶16为免疫合格。

     可用于猪细小病毒、猪蓝耳病、猪乙型脑炎、伪狂犬、猪瘟、口蹄疫等抗体检测。

     酶联免疫吸附（ELISA）试验具有灵敏性、特异性高，且重复性好，检测速度快的特点，尤其适合于大批量血清样品的检测，是国际认可的标准化诊断方法。

     被检血清、多孔移液器及一次性枪头、国标试剂盒。

（四川省雅安市雨城区八步乡畜牧兽医站，刘永香）