猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病是农业部规定的国家动物疫病强制免疫病种，按农业部免疫计划要求，这三种疫苗的免疫接种需要间隔7～10d分两次完成，但这种方式将耗费大量的人力物力，且不为农户接受。基于此，笔者开展了三种疫苗同时分点注射一次完成的免疫效果测定试验。现将试验过程和结果报告于后，供同行参考与指正。

     1.1试验动物试验对象为散养农户自繁自养的同窝健康仔猪，在35日龄时实施疫苗注射，30d后采集血清进行抗体检测。

     1.2试验疫苗全部由北川县动物疫病预防控制中心统一提供相同厂家、同一批号的疫苗，并按冷藏要求运输、保管、稀释和注射。

     1.2.1猪瘟疫苗。政府采购专用猪瘟活疫苗（脾淋源，后称猪瘟脾淋苗），杭州荐量兽用生物制品有限公司生产，批号：1301004。

     1.2.2猪蓝耳病疫苗。高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（后称蓝耳弱毒苗），吉林正业生物制品股份有限公司生产，批号：20121248。

     1.2.3猪口蹄疫苗。猪口蹄疫O型灭活疫苗（后称口蹄灭活苗），新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产，批号：2013019；猪口蹄疫O型合成肽疫苗（后称口蹄合成肽），新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产，批号：2013008。

     1.3.1“321”免疫模式。“321”即三种疫苗、两点注射、一步完成。试验组A：将猪瘟脾淋苗与猪蓝耳苗各1头份分别作等量稀释（即1mL含1头份），混合于一支注射器，在仔猪颈部肌肉注射，另一侧同时注射猪口蹄疫灭活苗。

     试验组B：方法同A，只是将猪口蹄疫灭活苗改为合成肽苗。

     试验组C：只注射猪瘟和猪蓝耳疫苗，且混合1针注射。

     1.3.2三针分点注射。对照组D：将猪瘟脾淋苗、猪蓝耳苗、猪口蹄疫灭活苗分三针（颈部左右各1针，臀部1针）同时注射。

     对照组E：将猪瘟脾淋苗、猪蓝耳苗、猪口蹄疫合成肽苗分三针（颈部左右各1针，臀部1针）同时注射。

     1.4注射剂量严格按照疫苗说明书稀释、足量注射，即：猪瘟疫苗均肌肉注射1头份/1mL，猪口蹄疫O型灭活苗25kg以下每头注射1mL、25kg以上则注射2mL，猪口蹄疫O型合成肽苗每头注射1mL，猪蓝耳弱毒苗每头注射1头份。

     1.5作好记录注射后仔猪出现不食、呕吐、发烧及24h内死亡的情况均要作详细登记，试验期间出现疾病的医治用药也要如实记录。

     1.6.1猪瘟抗体用间接ELISA测定。猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒系武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，批号为131116。样品OD630nm值≥0.35判定为抗体合格（阳性）。

     1.6.2猪蓝耳抗体用间接ELISA测定。PRRSV非结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒系吉林正业生物制品股份有限公司生产，批号为2013004。测定的S/P值即样品值≥0.39为阳性。

     1.6.3口蹄疫抗体测定。灭活苗采用固相ELISA法，猪口蹄疫病毒O型抗体诊断试剂盒系深圳市绿诗源生物技术有限公司生产，批号为2013115，样品OD630nm值≥0.2判定为抗体合格（阳性）；合成肽苗采用定性ELISA分析法，猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫抗体诊断试剂盒由广东现代农业集团研究院有限公司生产，批号为20120801，当临界值为0.204即样品值≥0.204时判为阳性。

     1.7检测仪器BIORAD（伯乐）酶标仪，型号：IMARK15186，波长根据试剂要求调整。

     2.1免疫副反应及死亡情况发生轻微减食的有3头，占试验猪只的2.4%，未见死亡现象。

     2.2抗体水平检测结果详见表1。

     3.1从表1可以看出，“321”模式中试验组A、试验组B在免疫后1个月，猪瘟、猪蓝耳病的抗体水平远远超过了70%的合格标准，试验组C的猪瘟和猪蓝耳抗体水平也均达到90%以上，说明猪瘟脾淋苗和猪蓝耳弱毒苗是可以混合注射的。

     3.2试验组两针注射和对照组三针注射相比，猪瘟、猪蓝耳病的抗体合格率均能超过70%的合格标准（已达75%以上），而口蹄疫抗体则出现不同的结果：合成肽苗（合格率93.3%）明显好于灭活苗（合格率低至43.5%）。

     4.1猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病是基层动物防疫队伍春秋集中防疫的重要工作内容，如何做到覆盖密度100%、抗体合格率达70%，各地做了很多尝试。其中云南地区的“321”免疫模式经本试验证实是切实可行的。笔者本次将猪瘟脾淋苗与猪蓝耳弱毒疫苗混合注射，结果完全没有出现互相干扰的现象，说明可以等量混合一针注射。大家知道散养猪只不好保定，防疫员都习惯追着猪打针，左右颈部各一针比较好打，而注射臀部比较困难，容易打在皮下或脂肪层，影响免疫效果。因此，如果只打两针，臀部就不用打了，相较于原来分阶段或三点同时注射来说，大大节省了人力、物力，值得全面推广。

     4.2从三种疫苗的相互影响来看，很有必要细分研究，如上所述，使用口蹄疫合成肽苗明显好于O型灭活疫苗，这也是多次春秋集中免疫检测所证实的，其具体原因还需进一步研究。

     4.3动物疫病的强制免疫是一项全国性的工作，基层防疫如何开展事关重大，免疫程序是否合理直接与质量相关联，而政府采购招标疫苗生产厂家的变动较大，疫苗自身质量如何基层也无手段检测，建议国家动物疫病预防控制中心配备统一的检测试剂盒，并下发到县级动物疫病预防控制中心，以监测春秋集中防疫的质量。

（四川省北川羌族自治县 张国安，桂勇帮，李霞）