随着我国经济的不断发展，我国生猪生产规模也在逐年扩大。如何发挥生猪的生产力以达到最高的经济效益是养猪场（户）最关心的问题。而要保证规模化养猪场的生产量，提高经济效益，最为关键的就是制定合理的猪场免疫程序。目前，猪口蹄疫病毒（FMDV），猪圆环病毒（PCV），猪细小病毒（PPV），猪乙型脑炎病毒（JEV）对规模化养猪场危害性最严重。猪场需要及时检测猪血清的抗体，掌握猪各种抗体水平，对免疫程序及时做出调整，为疫病防控提供指导。

     1.1.1抗体检测试剂FMDV抗体检测试剂盒，PPV抗体检测试剂盒，PCV抗体检测试剂盒，JEV抗体检测试剂盒，均购自上海延吉生物科技有限公司。

     1.1.2仪器-80℃超低温冰箱、海尔冰箱（青岛海尔股份有限公司）、SCOTSMAN制冰机摩尔超纯水机（上海摩勒科学仪器有限公司）。

     1.1.3待检猪血清取自某集约化养猪场15周龄猪，每月30头份，共150头份。

     1）设30个待测样品孔，先加样品稀释液40μL,然后加待测样品10μL。设标准孔10个，2个为1组，做倍比稀释，最终浓度分别为64,32,16,8,4ng/L。最后设一个空白孔不加血清。置37℃温育30min。

     2）甩掉板中的液体，每孔加满洗涤液，静置30s后弃去，如此重复5次，拍干。

     3）每孔加入酶标试剂50μL，空白孔除外。

     4）温育：操作同1）。

     5）洗涤：操作同2）。

     6）显色：每孔先加入显色剂A50μL，再加入显色剂B50μL，轻轻震荡晃匀，37℃避光显色15min。

     7)终止：每孔加终止液50μL，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

     8)以空白孔调零，450nm波长处测量每孔的吸光度（OD值）。

     9)结果判定。

     以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值带入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

     与以往的ELISA定性检测不同，本文采用定量ELISA对4种猪病的抗体水平进行检测，以评估群体免疫保护力。综合表1、表2、表3和表4数据，以及猪场反馈的猪的发病状况，得出猪血清抗体含量与猪的免疫力正相关。当猪群抗体水平在40～100ng/L时，猪群可以获得较高的免疫力。之后须在此基础上进一步提高猪群的抗体水平，以求获得更高的免疫力。猪的免疫力不仅与猪的抗体水平有关，与地域性因素、季节性因素、饲料管理因素等有关。除了注重疫苗接种的时机与次序以及疫苗之间的相互作用，还应注意提高管理水平，根据疫病的流行季节调整接种时间与次序。

（1.上海交通大学俞嘉雄，叶佳欣；2.江苏天兆实业贾亚伟，蔡学海，陈方林）