笔者于2007～2010年对贵州省9个地州（市）奶牛、肉牛人畜共患疫病进行了血清学检测和病原学诊断，以期为贵州省养牛业的健康发展和人畜共患病的防控提供参考依据，现将调查结果统计分析如下。

     随机采集贵州省9个地州（市、县)选择规模化养牛场、种牛场和散养户牛血清样本7833头份，3766头份血清进行口蹄疫隐性感染抗体检测、4067头份血清进行布鲁氏杆菌感染抗体的检测。采集4个地州（市、县)种牛场、规模养牛场和散养户共295份病料（22份奶样、158血液样本、87头份粪样、8份内脏组织），所有样本由本实验室4℃或-80℃保存备用。

      口蹄疫非结构蛋白间接酶联免疫吸附试验（FMD-NSP-3ABC-I-ELISA）检测试剂盒均购自兰州兽医研究所。布鲁氏菌杆菌病虎红平板凝集抗原、阳性血清和阴性血清购自国家农业部青岛易邦生物工程有限公司。

     PCR检测试剂（DNA聚合酶、dNTP）均购自Takara公司；上下游引物均由上海生物工程技术有限公司合成；细菌学及寄生虫检测试剂由实验室自制；其他试剂均为国产分析纯。

     口蹄疫非结构蛋白间接酶联免疫吸附试验（FMD-NSP-3ABC-I-ELISA）和布鲁氏菌杆菌病虎红平板凝集试验，按试剂盒说明书进行操作。

     取送检病牛的体表皮肤皮屑镜检体表寄生虫，送检血涂片染色镜检进行血液源虫检测，送检粪便用盐水漂浮法进行虫卵检测。取送检牛口腔唾液反复冻融，离心取上清液，合成口蹄疫O型特异性引物，预计扩增片段为216bp采用Trizol法提取病料RNA，经RT-PCR扩增，凝胶成像仪观察结果。

     口蹄疫非结构蛋白间接酶联免疫吸附试验（FMD-NSP-3ABC-I-ELISA）和布鲁氏杆菌病虎红平板凝集试验，对种牛场、规模牛场、散养户牛血清样本进行牛血清阳性抗体检测，结果见表1。

     

     由表1可知，布鲁氏杆菌病感染抗体平均阳性率为1.11%±0.00，口蹄疫隐性感染抗体平均阳性率为9.72%±0.06。经统计学分析,4年间布鲁氏杆菌病阳性率2007年与2009年相比差异显著（P＜0.05），2008年显著高于2007年（P＜0.05），2008年与2009年差异显著（P＜0.05），2009年与2010年差异不显著（P＞0.05）。口蹄疫隐性感染抗体2007年与2008年、2009年、2010年；2008年与2009年、2010年；2009年与2010相比年差异均极显著（P＜0.01）。2009年隐性感染抗体阳性率。

     显著高于其余几年。

     对采集的295份病料，运用寄生虫及RT-PCR方法进行病原学检测，结果如见表2。

           

     由表2可知，对4个地区病原学检测结果表明，寄生虫病发病较为严重，占38.64%(114/295)。其中以附红体病发病最高，为28.47%(84/295)；血液原虫占3.39%(10/295)，其他还有前后盘吸虫和梨形虫均为2.37%(7/295)，泰勒虫0.34%(1/295)、艾美球虫0.68%(2/295)、肝片吸虫0.34%(1/295)。

     由上分析看出，在检区中主要存在的人畜共患病有口蹄疫、布鲁氏杆菌病、寄生虫等。在贵州省曾经暴发的牛布氏杆菌病(布病)，2008年显著高于其余几年（P＜0.05），而2010年与2009年和2007年相比则差异不显著。有报道称，使用虎红平板凝集试验检出的阳性牛数最多，ELISA方法次之，试管凝聚试验最低。本试验采用的是虎红平板凝集试验，抗体特异性不高可能是导致结果不显著的原因。可能由于该年度大量的引种疫区牛，导致隐性感染抗体显著高于其余几年的隐性感染抗体阳性率（P＜0.01）。

     寄生虫病一直危害着我国人畜健康，在贵州省以上检区主要以附红体、梨形虫、双芽巴贝斯、血液原虫，发病率较高，贵州省温湿的气候因素可能是导致寄生虫感染比较严重的原因。

（贵州省遵义市，颜艾）