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美国猪业应对猪流行性腹泻的挑战

    猪流行性腹泻病(PED)—一种对新生仔猪致死、美国养殖业界陌生的疾病,以惊人的速度在美国中西部扩散。自 2013 年 4 月开始发病,到2013 年 9 月 有 17 个 州 确 诊 612 个 病例,2014 年 1 月已经扩散到 20 个州。PEDV 在国际养猪业界已经流行几十年,英国和中国分别在 1972 年和 1982年报道了本病,但此病先前在美国没被发现。PEDV 对美国猪群的 68  300 个猪场形成了经济威胁。

 

PED的首先确诊
   英国首先在 1972 年报道本病,随后欧盟很多国家、 中国 (包括台湾地区) 、韩国、日本、印度和印度尼西亚均确诊本病 ; 现在北美也确诊本病。然而,如同 2013 年出现在美国的情况一样,来自瑞典、澳大利亚和北爱尔兰的少量猪的血清中并未检测到 PEDV 抗体。同样的疾病被证实在加拿大也有发生,但同样没有被确认为流行性腹泻。血清学调查发现,与比利时相比,本病在匈牙利和瑞士的发病较低。

 

病原学
    引发 PED 的病原为冠状病毒,与TGEV(猪传染性胃肠炎病毒) 、PRCV(猪呼吸道冠状病毒)和 PHEV(猪血凝性脑脊髓炎病毒)截然不同。PEDV在负染下测量为95~150nm(平均为130nm),而在切片中为60nm。病毒的膜粒长度为18~23nm。PEDV主要有3种抗原蛋白:S蛋白,穗状糖化蛋白85-130ku;M 蛋白27ku;N 蛋白58ku,与猫感染性腹膜炎病毒有一定相关性。
    所有分离的病毒属于单一血清型,添加胰酶后可在非洲绿猴肾脏上皮细胞(Vero)上培养,在传代培养物中产生合胞体。序列对比发现,中国和韩国分离株的基因簇与欧洲不同,最近中国与韩国分离株也有差异。该病毒在高于60℃,30min内灭活,50℃时较稳定。37℃时在pH6.5—7.5 之间稳定,4  ℃时在 pH5.0—9.0 之间稳定。

 

发病机理
    PEDV 不在呼吸道复制,其他病理过程与 TGEV 相似。PEDV 吸附在上皮细胞一个 150  kb 的受体上,在细胞系上要求较大密度的猪亮氨酸氨肽酶受体。肠绒毛尖端和边缘上皮细胞受到感染,细胞不受损伤,但可释放病毒。腹泻一旦发生,上皮细胞即开始脱落。感染 6  h,PEDV 出现在回肠。二糖酶、碱性和酸性磷酸酶、琥珀酸水解酶和单氨酸氧化酶水平下降,大猪乳糖酶含量也下降。出现临床症状 24  h 内,肠绒毛发生大面积融合和萎缩。在部分免疫过的仔猪体内,小肠内局部多处也表现肠绒毛萎缩。猪感染 PEDV2~4周后可在血清中检测到PEDV抗体,抗体滴度水平升到1∶10000,但很快又降到1∶20—1∶640。
    仔猪体内的被动抗体在5~13周内从血清中消失,此时主动免疫开始启动。哺乳母猪体内血清抗体出现不能排除其窝内仔猪发生流行性腹泻。粪中排毒至少持续 8d。感染猪场内抗体的水平在4个月到达高峰,之后下降。
    因为 PEDV 影响猪肠道系统,抑制细胞吸收营养物质、饮水量下降,造成猪体严重脱水。较大的猪可在 2 ~4 d康复,整窝新生仔猪群将会覆灭。因不能从母猪初乳中获得对此病免疫,3 周龄或更小的猪对本病没有抵抗力,加之缺乏机体康复的必须储备,死亡率在80%~100%。

 

PED临床症状
    PED对无免疫力的断奶仔猪或所有年龄段的猪发生暴发性腹泻。在潜伏 1 ~ 3  d 后,仔猪出现 TGE 样的水样腹泻和呕吐。尽管无免疫力猪(中大猪)的发病率达到 100%,但其死亡率较低。本病在一个区域内扩散很快。20% ~ 80% 的大猪将出现呕吐和腹泻。几乎百分百的出现食欲减退,尤其在繁殖群。
    临床症状可能仅限在较大乳猪,32kg 以下较小断奶猪很少受影响。感染的断奶猪行动迟钝、不喜站立、少见发热。腹泻物非常稀薄、色呈棕绿,常污染猪体。也常常出现脱水症状。在一些暴发病例中,呕吐为主要症状,其他症状不明显。呕吐和腹泻的急性期持续大约 3d,康复要等7~ 8d。病猪有充足饮水,若无并发病则较少死亡。因为食欲减退和体况虚弱,受影响的肥育猪要延长 14d 才能达到90kg。 临床康复猪对将来没有太大影响。 母猪也许会发生无乳症,导致没有感染仔猪间接发生死亡,后期仔猪的生产性能将降低,尤其是在公猪。已发生严重脱水,对于支持疗法没有反应或应答的衰竭仔猪, 可以实行人道主义处死。

 

病理学表现
    当死亡率低时,对少部分断奶仔猪进行了检查。剖检可见 : 胃内空虚或者充满胆汁黄染液体,肠道苍白,肠壁变薄,经常充满液体内容物。受到该病影响的一些初生仔猪可以发现在小肠出现肠绒毛萎缩,或发生胃炎。

 

危险因素
    整个美国猪群尚未经历过 PED,对本病高度易感。出生到育成饲养段的仔猪受到严重影响, 死亡率出乎意料的高。在生长到肥育模式下,PEDV 阳性猪的比率最高。这也许与从农场到屠宰场的运猪卡车清洗不当有关。
    在两次运输之间,如果卡车没有进行仔细的清洁, 容易携带屠宰场的病毒,在猪场间扩散。PEDV 是一种粪口传播病毒,猪摄入粪便而感染,粪便可通过人类运输工具、饲料、污染的卡车和拖车或设备引入。本病毒对其他动物和人类无害,人类可以放心消费感染 PEDV的猪肉。

 

流行病学
    在1966-1977年英国TGE暴发的流行病学基础上,PED 在 1971 年与TGE 分离开来,本病持续到 1972 年夏天,在 1972 冬天又重新出现。猪之间接触起到主要作用, 本病通过猪的调动、市场或运输卡车传播。
    1977 年首先报道断奶仔猪发病。流行性腹泻多通过带毒猪引入群内,随之为大暴发。目前,在英国涉及母猪和仔猪的严重暴发病例少见,临床多见单窝或新购生长猪发病。本病 2005-2006 年在意大利暴发,随后是中国、韩国、日本,现在是美国。

 

PED的诊断
    断奶仔猪可根据发病史来判断,临床发病较急、扩散速度快、呕吐、食欲减退等。PED 与 TGE 临床症状相似,可通过实验室诊断来加以区分。PEDV与(TGEV)具有相同起源,二者均来自于冠状病毒家族,引起症状相似 : 腹泻、呕吐、食欲减退,严重脱水和哺乳母猪少乳。
    正因二者的临床症状相同,诊断PED 的唯一方法是实验室诊断。可对粪便样品、直肠拭子、反馈材料或环境拭子进行实验室检测。PEDV 和 TGEV 的免疫力不能互相交叉保护,免疫 TGE不能保护猪群免受 PEDV 感染,猪群暴露在 TGEV 下对于 PEDV 没有免疫力。当该病影响到所有年龄段的猪时,可通过在非免疫猪群中的死亡模式来怀疑为PEDV。
    在特定的免疫猪群内,只有少量仔猪会发生该病,应该与E.coli clostritdia(大肠杆菌病,病原缺失,绒毛萎缩 ),cryptosporidia(隐孢子虫)  和 coccidia(球虫病,小肠上皮没有出血或坏死) 和 rotavirus  (轮状病毒)和 TGE(实验室检测方法有免疫荧光,RT-PCR 和 ELISA 为必做项目)相区别。采用免疫电镜技术观察到病猪小肠内容物或粪便中有冠状颗粒来确诊。
    用ELISA和定量RT-PCR可以确定病毒。特异荧光抗体或免疫过氧化物酶可显示小肠上皮细胞上的病毒。ELISA 可以检测血清或康复猪乳中特定抗体滴度。只有成(配)对血清样本中抗体滴度上升才具有诊断价值。很多ELISA 技术用来检测本病。尽管 S 蛋白作为检测抗原,最有效的是利用整体、组织培养病毒作为抗原。目前已知一头猪身上可同时感染 TGEV 和 PEDV。

 

治疗和控制
    提供充足的饮水。对于因母猪感染而无乳的仔猪提供乳汁替代物,同时对群内所有感染猪提供充足饮水。用葡萄糖、像甘氨酸电解质溶液治疗病仔猪。尽管利用猪干扰素能够减少体重丢失,混合单克隆抗体、蛋黄抗体也具有保护功能,实际上对于 PED 没有特异疗法。对 14d 内将要分娩所有母猪进行隔离, 可以控制PED暴发造成的影响。哺乳仔猪也可以感染,以降低暴发持续时间。若出现猪痢疾或并发病,应治疗并发症来加快 PED 猪的康复。已报道有经过传代 83 次的弱毒疫苗,   注射21d 后对猪保护率有 94.6%,但欧洲尚无此种疫苗。

 

生物安全措施
    PED 如何到达美国尚属未知。多个 PED 病例在全美范围内不同的猪场同时确诊。在首先确诊暴发后 3 周,美国国家猪肉生产董事会(National Pork Board)拨款 450  000 美元来研究 PEDV。研究人员在寻找如何防止PEDV 蔓延和清除的方法。现在尚不知道已感染猪的传染性有多长时间,也不明确 PEDV 在其宿主体外的衣物、设备或饲料上能存活多长时间。
    在对 PEDV 有更多的了解之前,预防其首要步骤是加强生物安全。建议养猪者做好接触设施人员的记录,同时限制猪场内运输工具和人员的流动。全美猪产业目的是防止 PEDV 添加到美国猪病病原名单上。
    更进一步,已感染猪场要防止病毒的蔓延直到 PEDV 从猪群中清除为止。往返于猪场之间的卡车要采用温水和消毒剂进行适当的清洗消毒。PEDV 对绝大部分含有破坏病毒成分的消毒剂敏感。

 

场内的生物安全措施
    对于多于一栋猪舍或多点饲养猪场,强调场内生物安全措施具有同等重要性。如果饲养场内一栋猪舍发生PEDV 感染,要格外注意确保病毒不会扩散到场内其他猪舍。
    为防止有传染性猪与未感染猪群混合, 需要将猪转入全进全出模式下饲养。员工、参观者和兽医出入不同猪舍时必须更换工作靴和工作服。高压清洗机和其他设备在不同舍内使用时必须用消毒剂进行彻底清洗消毒。

 

清除PEDV
    因为TGE 疫苗和免疫力不能够保护猪群免受 PEDV 感染,但清除 TGE的措施同样适用于 PEDV。TGE 病毒在温暖天气即失活。而 PEDV 在美国温暖天气条件下易扩散,说明此病毒比TGE 更稳定,可以在 30  ℃甚至更高温度下生存。美国猪业界希望在 2013 夏季,PEDV 的快速扩散会慢下来或停止。

 

清除PEDV的四项措施
1)封闭猪群。一旦猪场中确定有PED 病例后,建议养猪者与兽医一道,尽可能快地启动一个严格的 “12 周策略”清除病毒。 本策略首先要做到封闭猪群,已感染猪群不再进行生猪流动。如果计划在 12 周的封闭期后期需要向猪群内加入替换的猪,那么就立刻添加。在封闭头 3 周内,通过群内易感染猪与未感染者鼻 - 鼻接触及污染的粪便扩散,整个猪群暴露在病毒下。在此期,监测每一头猪非常重要,保证病毒已经感染而且猪出现临床症状。
2)对设备的完全清洗消毒。通过3~4周的积极接触后,猪群临床症状消失,猪群从已经污染的猪舍内同时移出。在允许猪返回猪舍之前,对已被污染设施用温水和消毒剂清洗消毒,完全干燥。
3)加入哨兵猪。当临床症状消退后 30d,向每个封闭猪群中放入哨兵猪。猪群对 PEDV 产生免疫力后,临床症状将减少。向猪群中加入从未接触过PEDV 的猪来检测猪群是否处于阴性。30d 后,如哨兵猪没有表现出 PEDV 临床症状,意味着成功从猪群中清除了PEDV。
4)建立妊娠母猪免疫力。已感染猪场的怀孕母猪要尽可能早将母猪接触污染的排泄物,以保证母猪在分娩前感染 PEDV 并建立免疫。3 周以后,母猪将获得通过初乳来提高仔猪的免疫力,以减少仔猪死亡。
清除计划并非万无一失。其他病原可通过哨兵猪传递给猪群,而感染其他病毒。在清除病原过程中采取的所有步骤都要做好预防措施。
    来自于其他猪舍或猪场哨兵猪应在分开的圈舍内隔离 30d,至少与其他圈舍相距 500码(457.2m) 。美国养猪产业对严格的清除程序和有助于控制病毒蔓延的生物安全措施持乐观态度。但是他们担心其中的风险,并会继续探究PEDV 是如何进入美国。

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