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南昌金牧动物保健服务有限公司
江西农业大学动物科学技术学院
2013年11月,江西某规模化猪场生长肥育猪陆续发病, 表现为体温升高 (40.5~41 ℃ ) 、 咳嗽、 腹式呼吸、 流涎、 流脓鼻涕, 部分猪表现神经症状 (原地转圈、 步态不稳 ) 。经临床诊断、 实验室 PCR 检测以及家兔感染试验, 确诊为猪伪狂犬病, 现将该病的诊治情况报告如下。
1发病情况
2013 年 11 月上旬,江西某 100 头母猪的规模化猪场 40 kg 以上的肥育猪陆续发病,共存栏 800头肥育猪, 每栋均有发病猪, 发病比例约 30%, 共死亡 40 多头, 整个流行过程持续 5 周。其它阶段猪群均未见症状。该场母猪伪狂犬病疫苗使用的是进口苗, 每年普免 3 次; 商品猪使用某国产疫苗, 在 30 d左右接种 1 次。
2临床症状
发病猪主要表现体温升高 (40.5~41 ℃) , 咳嗽,腹式呼吸, 流涎, 流脓鼻涕, 部分猪表现步态不稳、 原地转圈等神经症状。
3病理变化
病理剖检 4 头病死肥育猪,胸腔和心包积液, 肺部肿大实变, 气管内有大量泡沫, 气管内覆有一层伪膜, 肝脏肿大, 脾脏和肾脏均未见明显病变, 扁桃体有化脓性坏死灶, 膀胱黏膜有点状出血, 喉头有坏死灶。
4实验室诊断
4.1细菌学检查
无菌操作分别取4头病死猪的肺脏和肝脏涂布并划线接种于兔鲜血琼脂平板, 37 ℃烛缸培养24 h, 结果均未见细菌生长。
4.2 PCR 检测
取 4 头病死猪的肺脏提取 DNA, 进行猪伪狂犬病病毒 gE 基因 PCR 检测; 同时提取 RNA 进行猪瘟病毒和蓝耳病病毒的 RT-PCR 检测。结果从 4 头病死猪的肺脏中均扩增出大小约 350 bp 的伪狂犬病病毒目的条带, 其它病原检测均为阴性 (图 1 ) 。
4.3家兔人工感染试验
无菌取病死猪肺脏剪碎,按 1∶5 比例加生理盐水匀浆, 冻融 3 次, 经 4 层灭菌纱布过滤, 滤液加双抗 (1 000 IU/mL ) 。取病料滤液颈部接种成年雌性家兔 2 只 (2 mL/只) , 同时设对照组 (每只颈部注射 2mL 生理盐水 ) , 记录家兔反应情况。 试验组的 2 只成年雌性家兔于接种病料滤液 4~5 d 后便出现奇痒、死亡现象, 颈部因抓痒导致溃烂; 对照组家兔则未见异常反应。
5控制措施
采用猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗(勃林格 ) 对全群猪进行 1 次紧急免疫接种 (1 头份/头 ) , 每头新生仔猪于出生后 3 d 内接种猪伪狂犬病弱毒疫苗 (0.5头份滴鼻, 0.5 头份肌肉注射 ) , 45~50 日龄进行 1 次加强免疫。同时在饲料中添加爱乐新 (酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素, 1 kg/t 料 )和伊克力康(10%氟苯尼考,600 g/t 料 ) , 连用 5~7 d, 防止细菌继发感染。 经上述防制措施 1 周后病情得到有效控制, 发病猪逐渐康复。
6讨论与小结
现有的猪伪狂犬病诊断方法主要是针对抗体或gE 抗体缺失的血清学 ELISA(酶联免疫吸附试验)诊断方法,本次诊断采用猪伪狂犬病病毒 gE 基因PCR 方法检测, 能有效检测出猪伪狂犬病病毒野毒株, 区分疫苗毒株; 同时经家兔人工感染试验, 两者结果一致, 为本次疾病的确诊提供了可靠依据。一般而言,猪伪狂犬病对猪场的危害主要表现为母猪繁殖障碍, 哺乳仔猪、 保育猪发病或死亡, 而生长肥育猪通常表现为隐性感染或临床症状不明显, 易于恢复; 国内有大量关于母猪、 哺乳仔猪发生伪狂犬病病例的报道, 偶见生长肥育猪发生猪伪狂犬病的病例。该场本次发病全部为生长肥育猪, 其它阶段猪群 (母猪、 哺乳仔猪和保育猪) 均未见明显异常, 且肥育猪表现出明显的临床症状, 发病率和死亡率 (大于 5% ) 均较高, 相对以往伪狂犬病的发病特点和流行形式有了明显变化。2012 年 3—4 月份开始, 江西部分地区已经出现较多类似病例, 造成生长肥育猪死亡, 且有进一步流行的趋势, 应引起高度重视, 至于该流行毒株导致肥育猪出现较高的发病率和死亡率, 是否发生了某些变异, 有待进一步研究。
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