种鸡场鸡白痢、 鸡伤寒净化抗原比较及检测方法的确定

王海源 徐家芳 莫国东 侯雪娇 葛子汉 韦平
广西大学养禽与禽病研究所

    鸡白痢和鸡伤寒是严重危害我国家禽业健康发展的传染病， 特别是对于种鸡场及其孵化场。而目前我国种鸡鸡白痢、 鸡伤寒净化不彻底， 因种蛋污染造成商品鸡的感染可逐代放大。大多数种鸡场主要用国内B公司生产的多价染色抗原通过全血平板凝集试验对种鸡群进行连续多个代次的检测， 淘汰阳性鸡以达到建立健康鸡群的目的。全血平板凝集试验主要是在鸡舍内现场操作， 受到鸡舍条件、 温度以及环境等因素的影响，玻片上会出现比较多的假阳性， 从而影响判断结果。本试验通过应用3家国内外不同公司生产的抗原对2家公司的种鸡样品， 同时进行血清平板凝集试验和全血平板凝集试验的比较， 以确定种鸡场在鸡白痢、 鸡伤寒的净化过程中可采用的最佳抗原及检测方法。

1材料与方法
1.1检测抗原
    2种鸡白痢、 鸡伤寒多价染色抗原， 分别购自国内A和B公司 （以下简称A抗原和B抗原） ； 鸡白痢多价染色抗原， 购自国外的C公司 （C抗原） 。
1.2试验血清
试验血清分别由Ⅰ、 Ⅱ公司提供， 其中2个公司的血清样品已用B抗原进行初次检测， Ⅰ公司初检全血为阳性的鸡血清300份， 初检全血为阴性的鸡血清303份； Ⅱ公司初检血清为阳性的鸡血清200份。
1.3检测方法
血清平板凝集试验的操作与结果判定参照杨晓辉的方法进行。

2结果与分析
2.1检测方法的比较结果
    初检应用全血平板凝集试验检测， 结果为阳性的样品 （300份） 及结果为阴性的样品 （303份） ，均分别用 3 种抗原作血清平板凝集试验进行复检。结果呈现阳性的分别为13.7%和1.3%， 符合率分别为13.7%和98.7%。
2.2 3种不同抗原比较检测的结果
    用初检结果为阳性和阴性的样品共503份分别用 3 种不同的抗原进行血清平板凝集试验对比。结果显示， 对于初检为阴性的303份样品， 用A、 B 和 C 抗原检测判为阴性的数量分别为 293、293和244份， 至少2种抗原检测均为阴性的样品数为299， 3种抗原复检为阳性的样品数为0。其中， A、 B抗原在检测阴性样品时相对准确， C抗原会出现大量可疑结果； 对于初检为阳性的200份血清样品， 用A、 B和C抗原检测判为阳性的样品数分别为160、 172、 和166， 至少2种抗原检测复检结果为阳性的样品数为164， 3种抗原检测复检结果为阳性的样品数为155。其中， A公司检测的抗原最准确， 在155~164范围之内， C抗原检测阳性数为166， 而B抗原检测的阳性数为172， 也说明B抗原有较高的敏感性。
    对803份总样品进行比较检测， 发现A、 B抗原的检测结果较相近， 有89.9%血清的检测结果相同。B与C、 A与C的检测结果的符合率相对稍低，分别为84.3%和83.7%。

3讨论
    我国鸡群感染沙门菌非常普遍， 但很少发展成急性全身性感染， 主要表现为隐性感染， 常在机体免疫力低下时发病， 死亡率不高。莫国东等曾对2005~2012年送检的45例鸡关节炎病例进行统计分析， 发现由沙门菌感染引起的占44.4% （ 20/45 ） 。推测发病鸡是先天或早期感染沙门菌， 在生长过程中受到某些应激反应刺激， 从而导致鸡发病。这也表明了对种鸡进行鸡白痢净化的重要性和必要性。从上个世纪， 国内鸡白痢、 鸡伤寒净化已经取得很多进展。1985年北京市畜牧兽医站在全市百余个父母代种鸡场展开鸡白痢、 鸡伤寒净化工作，至1991有46个种鸡场110万只种鸡鸡白痢-鸡伤寒阳性率均在0.5%以下； 1986~1988年内蒙古原种鸡场进行了 4 次鸡白痢的净化后， 阳性率从20.76%降至0.3%； 1987年， 辽宁省开始鸡白痢净化工作， 经过多年的工作， 已取得显著成效， 使祖代鸡场鸡白痢阳性率由12.72%下降到0.5%， 父母代种鸡阳性率由26.51%下降到1%［7］。上述研究表明传统的平板凝集试验可作为监测和净化鸡白痢的一种有效方法。反观其他新兴的检测方法如PCR、 DNA探针法、 ELISA方法和环介导等温扩增技术 （LAMP）在净化方面基本上都不适用。
本试验中， 全血平板凝集试验检测为阴性的结果比较可信， 而检测为阳性的结果则误差比较大。说明在鸡场进行鸡白痢净化时， 漏检或阴性鸡转阳或者阳性鸡转阴的现象普遍存在。另外，长期使用抗生素对鸡白痢、 鸡伤寒沙门菌具有抑制性， 从而导致鸡白痢净化不完全， 产生漏检。B抗原检测的准确性相对较低， 结果可能存在较多的假阳性， 如果将这些假阳性的鸡淘汰掉， 会大大增加生产成本； 而A抗原检测的阳性比较准确； 整体来说C抗原的检测效果比较理想， 但用C抗原检测的成本过高， 且C抗原对阴性样品检测时会出现大量可疑结果， 可能因为国内外抗原的制作材料和方法不同， 导致C抗原对国内一些样品产生较大误差。在实际生产过程中， 可先采用B抗原或A抗原进行全血平板凝集试验的初检， 然后对初检阳性鸡用A抗原进行血清平板凝集试验复检， 这样既能保证鸡群净化的质量又能减少经济损失。
鸡场的鸡白痢、 鸡伤寒的净化还在于合理管理和正确的饲养策略。若鸡白痢较为严重的鸡场应采取循序渐进的净化思路， 对鸡白痢阳性母鸡采取隔离饲养、 逐步淘汰的方法。而对于鸡白痢不严重的鸡场采取适时抽检、 发现即淘汰的方法来保护整个鸡群。

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