我国猪病毒性腹泻的诊断与流行病学调查研究概况

杨丽梅 马力 徐倩倩 王艳 张颖 郭时金
沈志强 王艳萍 张志美
山东省滨州畜牧兽医研究院
山东绿都安特动物药业有限公司

    随着我国养猪业的规模化、 集约化发展， 猪病毒性腹泻病的流行与暴发日益增多， 严重危害我国养猪业健康发展， 给我国养猪业造成了巨大的经济损失。引起猪病毒性腹泻的病原有猪流行性腹泻病毒（ Ｐ ｏ ｒ ｃ ｉ ｎ ｅ 　 ｅ ｐ ｉ ｄ ｅ ｍ ｉ ｃ 　 ｄ ｉ ａ ｒ ｒ ｈ ｅ ａ 　 ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ） 、 猪传染性胃肠炎病毒（ Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｍ ｉ ｓ ｓ ｉ ｂ ｌ ｅ 　 ｇ ａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｉ ｔ ｉ ｓ 　 ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ，Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ） 、 猪 轮 状 病 毒 （ ｒ ｏ ｔ ａ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ，Ｒ Ｖ） 、 猪 瘟 病 毒（ Ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｃ ａ ｌ 　 ｓ ｗ ｉ ｎ ｅ 　 ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ 　 ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ， Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ） 、 猪伪狂犬病毒（ Ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｒ ａ ｂ ｉ ｅ ｓ 　 ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ， Ｐ Ｒ Ｖ） 及猪细小病毒（ Ｐ ｏ ｒ ｃ ｉ ｎ ｅｐ ａ ｒ ｖ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ， Ｐ Ｐ Ｖ） 等， 其中以Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ最为常见， 危害最为严重， ３种病毒对各种年龄阶段的猪群都易感， 但对仔猪的危害最大， 病死率最高， 即使猪耐过存活， 但康复后的猪生长缓慢， 致使饲料报酬降低， 增加养殖成本， 降低经济效益［ ２ － ３］。３种病毒引起的临床症状和病理变化都非常相似， 又常常存在混合感染， 给临床诊断增加了难度， 且混合感染对动物机体的损伤比单一感染还要严重［ ４］。论文从临床诊断技术、 实验室诊断技术、 流行病学调查等方面概述分析了我国目前Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ感染和流行现状， 旨在为兽医工作人员建立行之有效的综合防控措施提供参考， 降低猪病毒性腹泻带来的危害， 保障我国养猪业的健康发展。

１　临床诊断
１ ． １ 　猪流行性腹泻
    该病的流行无季节性， 但季节变换， 或温度下降时发病率较高， 夏季发病率较低。临床症状表现为运动僵硬、 发热、 精神沉郁、 厌食、 呕吐、 脱水等。发病后突然腹泻， 开始排黄色黏稠粪便， 随后排水样粪便， 呈灰黄色或水泥色， 混杂有黄白色的凝乳块。临床症状的轻重与猪日龄大小有关， 日龄越小， 症状越重。７日龄以内的仔猪常于腹泻后２ ～ ４ｄ内因严重脱水死亡，病死率约５ ０％。日龄较大的仔猪约１周后康复， 成年猪仅发生呕吐、 厌食及精神沉郁。病变主要在小肠， 表现为小肠绒毛萎缩， 肠管膨胀扩张， 肠内充满黄色液体呈水样， 肠壁变薄发亮， 呈半透明状， 肠淋巴结充血、 水肿， 消化道黏膜发炎、 糜烂。
１ ． ２ 　猪传染性胃肠炎
    该病在寒冷季节及饲养管理条件差、 饲养密度过大的猪群极易暴发。各种日龄猪均易感， １ ０日龄内仔猪病死率可高达１ ０ ０ ％， 奶猪、 育肥猪及成年猪症状较轻， 都取良性经过。仔猪发病初期表现为口渴、 呕吐、排灰色或黄色水样稀粪， 继而水样腹泻（ 喷射状） 、 脱水， 粪便呈黄色、 绿色或白色， 严重腹泻仔猪粪便中常含有未消化的凝乳块， 腥臭。１ ０日龄内仔猪感染后２ｄ ～ ７ｄ死亡， 而２周龄～ ３周龄以上仔猪将存活， 但体质虚弱， 也可能形成僵猪。肥猪、 母猪和公猪通常临床症状轻微或没有症状， 但有时泌乳母猪发病较重， 表现为体温升高、 厌食、 呕吐、 腹泻、 泌乳停止。病变的主要部位在胃和小肠， 表现为卡他性胃肠炎。胃内充满凝乳块， 胃黏膜充血， 小肠充血， 肠壁变薄发亮， 内充满黄绿色或灰白色液状物、 内含泡沫和水样的乳凝块， 肠系膜淋巴结充血水肿。
１． ３　猪轮状病毒病
    该病的流行具有明显的季节性， 多发生于晚冬至早春的寒冷季节， 常与致病性微生物混合感染， 致病情加重， 死亡率升高。人、 畜和禽类等均易感， 各种动物之间可互相感染、 传播， 多发于２月龄内仔猪， 育成猪和成年猪常表现为隐性感染。病初精神萎顿， 厌食， 不愿活动， 继而出现呕吐和腹泻， 粪便呈黄色、 灰色或黑色， 水样或糊样， 严重者带有黏液和血液， 较腥臭， 个别猪出现消瘦和脱水， 最后因衰竭而死亡， 病死率小于１ ０％， 若继发其他病原感染， 病情恶化， 病死率可达到５ ０ ％， 成年猪不表现临床症状。病变主要表现为小肠黏膜呈条状或弥漫性充血， 肠壁黏膜易脱落， 肠壁变薄、 呈半透明状， 肠绒毛不规则、 变短， 肠管膨胀扩张， 肠内充满黄色液体呈水样。

２　实验室诊断
    因上述３种猪病毒性腹泻病的临床症状和病理变化极其相似， 且常常存在混合感染和细菌性继发感染等， 增加了临床诊断的难度。根据流行病学资料、 临床症状、 病理变化仅能做出初步诊断， 确诊还需借助实验室诊断方法。目前猪病毒性腹泻病的常用实验室诊断方法主要有病毒分离鉴定、 免疫学和分子生物学方法。
２． １　病毒分离鉴定
病毒分离与鉴定是猪病毒性腹泻最经典、 准确、可靠的诊断方法。庄金秋等［ ５］和Ｐ ａ ｎ 　 Ｙ等［ ６］均利用Ｖ ｅ ｒ ｏ细胞进行连续传代， 分别通过病毒中和试验、套式Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ、 免疫荧光、 电镜方法鉴定表明分离株病毒为Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ。姜春霞等将腹泻仔猪的粪便接种Ｐ Ｋ － １ ５细胞， 经间接免疫荧光、 电镜、 Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ、 核酸序列分析鉴定分离毒株为Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ。库旭钢等将临床腹泻粪样接种 ＭＡ － １ ０ ４细 胞， 经对分 离 毒 株 的Ｖ Ｐ ６、 Ｖ Ｐ ７和Ｖ Ｐ ８基因进行序列分析表明为Ｒ Ｖ。病毒分离方法由于需要在细胞系中连续传代才能出现明显的细胞病变， 且对培养物需经Ｐ Ｃ Ｒ、 免疫荧光、 电镜等其他诊断方法进行鉴定， 操作繁琐、 复杂、试验周期较长， 限制了该方法在基层的推广应用。
２． ２　分子生物学技术诊断
２． ２． １　Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ　Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法操作简单、 检测快速、 敏感性高、 特异性强， 是目前最常用的分子生物学快速诊断技术。闫若潜等建立的Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ和Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ的二重Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ检测方法可特异性地扩增 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ和Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ， 扩增Ｓ Ｔ细胞和其他猪病病原均为阴性，适用于Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ和Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ的快速鉴别诊断［ ９］。Ｓ ｏ ｎ ｇＤ 　 Ｓ等［ １ ０］建立的 Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、Ｒ Ｖ 的多重 Ｒ Ｔ －Ｐ Ｃ Ｒ方法检测１ ５ ７份仔猪临床腹泻病料， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ阳性率分别为２ ６． ３％、 ２． ７％和１ ３． ２％，该方法敏感性高、 特异性强， 具有较高的临床实用价值。Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法可以准确快速地检测出极低含量的病毒核酸， 为３种病毒性腹泻病原的临床鉴别诊断和流行病学调查等提供了一种快速、 灵敏、 特异、准确的分子生物学诊断方法。
２． ２． ２　荧光定量Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ　荧光定量Ｐ Ｃ Ｒ技术综合Ｐ Ｃ Ｒ、 荧光标记、 数码显相技术于一体， 具有定量准确、 灵敏度高、 特异性强、 重复性好等优点。王金良等［ １ １］建立的检测Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ的荧光定量Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法的敏感性达５． ８ ７ ５拷贝／μＬ， 比常规Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ高１ 　 ０ ０ ０倍。张云等［ １ ２］建立的检测Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ的荧光定量Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法的灵敏度可达３ ０拷贝／μＬ。高婉俊等［ １ ３］建立的Ｒ Ｖ的荧光定量Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法检测Ｃ Ｓ －Ｆ Ｖ、 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｐ Ｃ Ｖ － ２均为阴性。实时荧光定量Ｐ Ｃ Ｒ具有特异性强， 敏感性高、 重复性好、 稳定性强， 全封闭反应、 耗时短等优点， 为猪病毒性腹泻病的快速诊断与病毒的定量检测提供了有效的技术手段， 可用于临床早期诊断以及分子流行病学调查。
２． ２． ３　Ｒ Ｔ － Ｌ ＡＭＰ方法　环介导等温扩增（ ｌ ｏ ｏ ｐ －ｍ ｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ 　 ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｍ ａ ｌ 　 ａ ｍ ｐ ｌ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ， Ｌ ＡＭＰ） 技术操作简单、 检测快速、 肉眼判读、 无需特殊仪器设备， 特别适合基层单位使用。Ｒ ｅ ｎ 　 Ｘ等［ １ ４］建立的可视化检测Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ的Ｒ Ｔ － Ｌ ＡＭＰ方法在６ ３℃水浴５ ０ｍ ｉ ｎ即可完成， 检测Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｐ Ｒ Ｖ、 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ等常见猪病毒均为阴性， 敏感性高于常规Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ和Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ。Ｌ ｉＰ等［ １ ５］建 立 的 检 测 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ 的 Ｒ Ｔ － Ｌ ＡＭＰ方 法 在６ ０℃水浴中３ ０ｍ ｉ ｎ可完成。Ｃ ｈ ｅ ｎ 　 Ｑ等［ １ ６］建立的Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ 　 Ｒ Ｔ － Ｌ ＡＭＰ方法的灵敏度达１ ０ｐ ｇ 　 Ｒ ＮＡ， 其敏感性是常规Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ方法的１ ０ ０倍， 与套式Ｒ Ｔ －Ｐ Ｃ Ｒ方法相当。Ｒ Ｔ － Ｌ ＡＭＰ方法本质是一种核酸诊断方法， 具有敏感性高、 特异性强、 操作简便等优点，非常适用于基层兽医部门和广大养殖户进行猪病毒性腹泻病的诊断与流行病学调查。
２． ３　抗体免疫学诊断
２． ３． １　酶联免疫吸附试验（ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ）　Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测
方法具有操作简单、 重复性好、 高通量、 价格低廉等优点。Ｒ ｅ ｎ 　 Ｘ等、 鲁娜等、 Ｚ ｈ ｕ 　 Ｊ等分别以原核表达的Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ　 Ｍ 蛋白、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ 　 Ｓ蛋白、 Ｒ Ｖ　 Ｖ Ｐ ７蛋白作为诊断抗原， 建立分别检测Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ抗体的间 接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方 法［ １ ７ － １ ９］。 屈 月 等［ ２ ０］分 别 以 抗Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ　 Ｎ蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体为包被抗体和检测抗体， 建立了检测Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ抗原的双抗体夹心Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法。黄小波等［ ２ １］将纯化的Ｒ Ｖ分别免疫仔猪和兔， 制备了猪抗Ｒ Ｖ和兔抗Ｒ Ｖ高免血清， 建立了检测 Ｒ Ｖ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方 法。Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测方法快速、 特异、 敏感、 高通量， 为猪病毒性腹泻病抗原／抗体的诊断、 流行病学调查等提供了一种快速、 简便的血清学诊断方法。
２． ３． ２　胶体金免疫技术　胶体金免疫技术具有简便、 快速、 无污染、 价格低、 不需特殊仪器、 结果判断直观 等 优 点。 张 利 勃 等［ ２ ２］将 葡 萄 球 菌 蛋 白 Ａ（ Ｓ Ｐ Ａ） 标记胶体金， 将Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ　 Ｍ 蛋白和抗Ｓ Ｐ Ａ多抗血清 分 别 作 为 检 测 线 和 质 控 线， 研 制 了 检 测Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ血清抗体的胶体金试纸条。刘兆磊等［ ２ ３］将Ｒ Ｖ　 Ｖ Ｐ ６蛋白单克隆抗体标记胶体金颗粒， 将 Ｒ Ｖ多克隆抗体和羊抗鼠Ｉ ｇ Ｇ分别作为检测线和质控线， 制成了检测Ｒ Ｖ的胶体金试纸条。胶体金免疫技术具有简便、 快速、 特异、 灵敏等优点， 非常适合于在基层兽医单位、 养殖场及广大养殖户间推广应用，将具有广阔的应用前景。

３　流行病学调查
    通过流行病学调查方法可以迅速掌握猪群中Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ的感染与流行情况， 为了制定合理的防控措施提供参考依据。同时， 分子流行病学调查可以分别对Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ的基因序列进行系统发育分析和遗传变异分析， 能够分别阐明Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ不同毒株、 不同时间、 不同区域之间的遗传衍化关系， 寻找一定区域及时间内的优势毒株， 对制定猪病毒性腹泻的综合防控措施具有重要的指导意义。
３． １　感染情况的调查
    近年来， 猪病毒性腹泻病原在我国各地广泛流行， 不同地区的感染率差别较大， 准确了解掌握不同地区Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ的感染与流行情况， 有助于不同地区指定适合自己的防控措施。甘海霞等［ ２ ４］对２ ０ １ １年广西３ ４个县的２ １ ６份粪便病料进行了Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ 流 行 病 学 调 查，Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ 阳 性 率２ ７． ７ ８％， Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ阳性率７． ４ １％， 表明广西地区存在Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ和Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ的感染， 且Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ阳性率较高。当巴［ ２ ５］采用胶体金试纸条对２ ０ １ ０年青海共和县１ ０ ４头猪粪样进行了Ｒ Ｖ感染情况的调查， 结果阳性率２ ８． ８ ５％， 表明 Ｒ Ｖ 感染在青海省较严重。秦谷雨等［ ２ ６］对安徽省３ ７个规模化猪场的１ ８ ６份样品进行Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ、 Ｐ Ｃ Ｖ － ２等病毒的检测， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ阳性率分别为５ ９． １％、 ５． ４％和２． ７％，Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ阳性率很高， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ有可能是引起安徽地区猪腹泻性疫病的主要病原。郭旋等［ ２ ７］对２ ０ １ １年－２ ０ １ ２年 广 西１ １个 城 市２ ３ ２份 病 料 进 行 Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ的流行病学调查， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｒ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ的阳性率分别为３ ７． ５ ０％、 ０． ０ ３％和０， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ在广西地区广泛存在。刘云波等对２ ０ １ １年－２ ０ １ ２年国内１ ３个省市的猪腹泻样品进行检测， Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、Ｒ Ｖ阳性率分别为２． ６ ５％、 ２ ４． ４ ９％和３． ２ ０％， 以Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ的阳性率最高。以上流行病学调查资料表明， ３种猪病毒性腹泻病毒在我国均具有非常高的感染率， 呈全国性散发流行， 且不同地域间感染情况差异较大。其中以Ｐ Ｅ Ｄ的感染最为突出， 感染率最高， 同时２种病原或３种病原混合感染现象日益突出， 给临床诊断和预防控制增加了难度， 这就要求临床兽医在确诊Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ感染的同时， 还应重点考虑是否存在Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ或Ｒ Ｖ的混合感染。
３． ２　分子流行病学调查
    近年来， 随着分子流行病学的逐步兴起， 在猪病毒性腹泻病原的分析中得到了广泛应用， 为不同地区优势毒株的确定， 不同地区疫苗株的筛选提供了重要的技术支持。郭旋等［ ２ ７］对广西地区Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ阳性病料的 Ｍ基因进行克隆与序列分析， 广西流行毒株与２ ０ １ １年以来我国广东、 福建、 江苏、 江西四省流行毒株的亲缘性较高， 与我国２ ０ ０ ６年前分离获得的北方毒株、 经典疫苗株、 韩国疫苗株相距较远， 表明广西地区Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ 毒株仅几年已发生较大的变异。田野等对华南地区Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ野毒株Ｓ基因序列分析显示， 该毒株与经典毒株的遗传距离较大， 处于不同的亚群， 表明华南地区Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ毒株已发生遗传变异、 关键抗原表位发生较大变化。张志等［ ２ ９］对国内不同地区的６株Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ分离株的 Ｍ基因序列分析，６株 Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ 之 间 的 同 源 性 为９ ８． ２％ ～１ ０ ０％， 与Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ疫苗株的同源性为９ ７． ６％～９ ８． ２％ ， 尽管Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ各分离株之间的同源性仍较高， 但与疫苗株的差异越来越大， Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ地方流行毒株已经逐渐形成独特的流行进化分支。穆杨等［ ３ ０］对Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ陕西分离株Ｓ基因进行克隆与遗传变异分析， 该毒株与Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ中的２ １个Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ参考毒株的核苷酸同源性为９ ６． １ ％～９ ９． ９ ％， 与中国的 Ｈ 株、ＨＮ ２ ０ ０ ２株、 Ｔ Ｓ株， 美国的 Ｍ ｉ ｌ ｅ ｒ 　 Ｍ ６ ０株、 Ｍ ｉ ｌ ｅ ｒ 　 Ｍ ６株及英国的 Ｆ Ｓ ７ ７ ２株 亲 缘 关 系 均 较 近， 表 明 陕 西 地 区Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ未发生较大的变异。王龙涛等［ ３ １］对 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ吉林分离株Ｓ基因进行了遗传变异分析， 该毒株与７个不同来源的Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ毒株核苷酸和氨基酸的同源性分别为９ ６． ３％～９ ９． ３％和９ ４． ８％～９ ８． ８％， 与日本分离的 ＴＱ １ ４毒株和西班牙分离的 Ｔ ＯＹ ５ ６ － １ ６ ５毒株亲缘较近， 表明不同地区Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ分离毒株遗传变异差异性不大。田小艳等［ ３ ２］对Ｒ Ｖ　 Ｇ Ｄ分离株的Ｖ Ｐ ６基因进行了序列分析与遗传变异分析， 该毒株与国内外已知的１ １个Ｒ Ｖ毒株Ｖ Ｐ ６基因的核苷酸同源性分别为７ ６． ５％～９ ５． ６％， 与轮状病毒Ｊ Ｌ ９ ４、Ｃ Ｎ ８ ６、 Ｏ Ｓ Ｕ毒株属于为同一个进化群， 但存在较大序列差异。以上分子流行病学调查资料表明， ３种猪病毒性腹泻病毒在我国目前均发生了一定程度的遗传变异， 其中Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ的变异性不大， 与现有疫苗株仍具有高度的同源性； Ｒ Ｖ和Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ与疫苗株及不同区域间差异均较大， 尤其是Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ的遗传变异速度较快， 与现用疫苗株的同源性较低， 需迅速加强Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ新型毒株疫苗的研制， 替代现有疫苗株， 防止免疫失败现象发生。

４　结语
    猪病毒性腹泻病是目前阻碍我国养猪业健康发展的主要疫病， 在我国猪场中普遍存在， 其综合防控的好坏直接影响到养殖场的经济效益。因此， 正确认识我国猪病毒性腹泻的病原诊断方法与流行病学研究现状， 建立行之有效的综合防控措施， 对提升我国养猪业水平、 增加经济效益均具有十分重要的现实意义。Ｐ Ｅ Ｄ Ｖ、 Ｔ Ｇ Ｅ Ｖ、 Ｒ Ｖ的临床鉴别诊断较困难， 不同实验室可根据自身试验条件选择最合适的实验室诊断方法或将几种诊断方法联合应用， 力争做到及时、 准确的诊断。同时， 不同地区应根据本地区的优势毒株， 合理选择疫苗， 制定科学合理的免疫程序， 从根本上避免腹泻性传染病的发生， 保障我国养猪业持续、 健康发展。

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