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西南大学荣昌校区
在动物复杂的繁殖活动背后， 生殖激素体系是动物所有繁殖活动的内在根本调控体系， 并且生殖激素常常运用在实用繁殖技术中来控制动物的繁殖进程。如何让学生能够系统而灵活的掌握好对生殖激素的应用， 对于动物科学专业的本科繁殖学实验教学来说， 这无疑是一个巨大的挑战。西南大学根据多年的教学经验， 经过 2 年的摸索把动物繁殖学中的生殖激素实验作为实验改革的一个突破口， 结合养殖生产需求， 创建一个生殖激素的综合实验教学改革项目， 从而让学生充分体验到动物繁殖的奥妙并建立一个全面的理论和实践体系。
1实验设计理念
1． 1实验动物的选择
在常用实验动物(小鼠、 大鼠、 家兔、 狗、 猪、 牛、猴等)中， 家兔体积中等， 性情温顺， 而且孕期只有一个月， 繁殖快， 常年发情， 无季节性限制。同时， 家兔由于是刺激性排卵动物， 只有在给予诱发条件(注射激素或阴道、 子宫颈口刺激等)下才能排卵， 这样便于确定其排卵时间， 并确定手术剖腹时间， 便于控制实验设计的精准性。当然， 家兔的价格也比较便宜，在实验经费有限的情况下， 可以购买到足够的数量来满足试验设计的需要， 同时也提供了相当多的操作机会给每一个上课的学生。
1． 2本实验相关的知识理论体系
性成熟的雌性动物具有典型的发情行为， 而发情现象的内在体现是卵巢上卵泡的活动以及相应生殖激素的变化。当然， 也可以说是生殖激素控制了雌性周期性的发情变化(行为、 生殖道、 卵巢等)。在生产中， 为提高养殖场的繁殖效率， 可以采用相应的激素来制定同期发情方案， 从而采用同期人工授精技术。另外， 为了充分利用优良母畜的繁殖潜能或者在胚胎生物技术中获取更多的试验素材， 可以利用激素来调动雌性卵巢上有更多卵泡的发育成熟(超数排卵技术)。因此， 笔者可以通过利用外源性的生殖激素来调控雌性动物的繁殖进程。
1． 3本实验相关的操作技能
1．3． 1激素的使用
对大部分生殖激素的使用可以采用肌肉注射， 如 FSH、 PMSG、 氯前列烯醇等， 而有些生殖激素只能采用静脉注射才能达到相应效果， 如HCG。FSH 由于半衰期短， 需要连续多次注射;另外，可以利用缓释剂 PVP(聚乙烯吡咯烷酮)， 将其与FSH 混合溶解后使用， 可以只注射一次即可达到相应效果。
1．3． 2母兔的发情鉴定
对母兔进行激素注射同期发情处理后， 可以看到大部分母兔会表现出发情变化， 这时需要仰势保定母兔， 翻出外阴及时观察， 观察其外阴颜色、 湿润度、 肿胀程度等。另外， 由于发情后， 母兔雌性激素的水平较高， 其阴道上皮细胞类型及分泌物也会有明显变化， 因此笔者进行母兔的阴道涂片检查。
1． 3． 3母兔解剖观察
采用生殖激素 FSH、 PMSG及 HCG 超速排卵处理后的母兔， 在规定时间内进行解剖， 观察卵巢上卵泡发育及排卵情况。首先， 需要对母兔进行麻醉(速眠新)并保定在试验手术台上，及卵巢， 然后观察母兔子宫变化(质地、 颜色等)和卵巢变化(颜色、 排卵点数等)。
1． 3． 4手术冲卵技术
在胚胎移植技术中， 手术法冲卵是一个常用的技术操作， 在本实验中也可以让学生初步体验此技术。实验中， 在暴露母兔子宫后， 用PBS 液从母兔子宫角末端向着母兔输卵管伞方向冲出排出在母兔输卵管内的成熟卵母细胞， 并用培养皿承接冲卵液， 然后在实体显微镜观察。
1．3． 5抽吸法采卵技术
抽吸法采卵技术是做胚胎相关试验的一个基本操作， 通过它可以从屠宰场废弃的卵巢上获取大量而价廉的试验用卵母细胞。在本实验中也可以让学生初步体验此技术。实验中， 收集所有母兔卵巢， 保存在30 ℃生理盐水中， 再用灭菌注射器吸取 PBS 液后穿刺卵巢上的卵泡， 快速抽取卵母细胞， 然后在实体显微镜下观察。
2实验设计技术路线
本综合性试验以生殖激素为主线， 可以将动物繁殖学中的同期发情技术、 发情鉴定技术、 超数排卵技术、 胚胎移植技术等串联起来， 形成一个完整的理论和实践技术体系。同时， 在对母兔进行超数排卵的处理过程中， 可以选择 FSH + HCG、 FSH/PVP + HCG、PMSG + HCG 这样不同的激素组合处理方式， 以及调整不同的激素用量， 让学生分组后进行试验设计， 并总结比较不同的处理方式对实验结果的影响效果， 从而完成一个完整的设计性综合研究， 而不仅是一个简单的验证实验。
3实验实施注意事项
3． 1实验动物的选择
保证本实验顺利开展的首要条件是选择健康的实验母兔。市场上销售的商品肉兔虽然体重可以达到 2 ～3 kg， 但是其生长周期大多不足半年， 生殖系统的发育不完善， 尤其是母兔的卵巢对外源生殖激素的反应很弱， 如果采用这样的商品兔则会显著影响实验结果。因此， 本实验必须选择 1． 5 岁左右的成年母兔， 而且要求健康、 无繁殖疾病。在购买回学校后必须要经过预饲 2 周后才能开始实施实验。
3． 2学生的准备工作
由于这是一个综合性并带有试验设计的一个实验， 所以对学生的理论要求较高。首先， 要求学生掌握雌性动物发情周期的调节机理， 并理解其中相关生殖激素的生理功能， 并能够掌握雌性动物同期发情技术、 超数排卵技术、 发情鉴定技术以及胚胎移植技术的基本理论。其次， 需要学生具备一定的兽医临床操作技能， 如药物注射、 手术解剖等技能。最终， 对于本实验设计部分， 需要学生查阅相关专业文献， 以班为单位， 利用生物统计学的知识制定一个规范的试验方案。
3． 3教师的合理引导
本实验创建时充分考虑了其综合性与设计性， 要求以学生为主， 教师只是辅助作用， 为学生提供技术路线和理论支持。因此， 本实验要求教师在实验授课时注意加强引导方式， 在布置下达本实验要求、 主要技术路线和技术讲解后， 给予学生足够的自我准备时间， 以便发挥其主观能动性来顺利完成实验。
4实验改革效果
本实验综合了动物繁殖学中生殖激素及其应用的大部分知识内容， 实验内容也是针对生产实践迫切需求的繁殖控制技术， 具有很好的生产指导意义。在这 2 年的实验开展中， 从学生的实验报告中可以发现学生在本实验中通过充分的动手锻炼， 将本实验中的一个个知识点构筑成了完整的知识体系， 达到真正的理解和掌握。
5小结
加强实践教学和强化大学生实践创新能力的培养是现代大学本科教育教学改革的一个重要方面， 而如何在传统的本科教学模式中突出实践教学的理念成为当今大学教育的重要任务。本实验对动物繁殖学实验课程改革提供了宝贵的意见和经验， 当然这还不够完善， 对于今后的教学实验改革我们还需要作出更多的思考和探讨。
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